肖琛闻
- 作品数:102 被引量:160H指数:8
- 供职机构:浙江省农业科学院更多>>
- 发文基金:国家兔产业技术体系建设项目浙江省重点科技计划浙江省公益性技术应用研究计划项目更多>>
- 相关领域:农业科学医药卫生生物学更多>>
- ECMS-油佐剂对兔波氏杆菌灭活苗免疫增强作用的研究
- 2015年
- 为了研究ECMS-矿物油混合佐剂对兔支气管败血波氏杆菌灭活疫苗的免疫增强作用,在灭活的波氏杆菌中加入不同的佐剂,制备波氏杆菌灭活苗。试验A:选取个体质量1.0 kg左右的健康1月龄新西兰肉兔60只,随机分为以下五组,其中第1~2组为不同剂量ECMS-油佐剂组,第3组为矿物油佐剂疫苗组,第4组为铝胶疫苗组,第5组为无佐剂对照组。各组分别于免疫前及免疫后不同时间进行耳静脉采血,分离血清,用间接ELISA法以及微量凝集法(MAT)检测各组兔血清抗体水平,并对试验兔进行攻毒感染,检测疫苗保护率。试验B:选取个体质量1.0 kg左右的健康1月龄新西兰肉兔32只,平均分为以下四组,分别为ECMS800 g-油佐剂组、矿物油佐剂疫苗组、铝胶疫苗组、无佐剂对照组。于免疫后37 d,无菌心脏采集抗凝血进行淋巴细胞转化试验(MTT),检测各组淋巴细胞增殖情况。结果显示,免疫后13 d开始产生抗体,ECMS-油组和油佐剂组抗体水平均在41 d达到最高,并持续到184 d,三组间差异不显著(P〈0.05),但与铝胶和无佐剂组差异显著(P〈0.05),且ECMS800 g-油组均略高于其他两组;MTT结果表明Con A和LPS刺激下,ECMS800 g-油佐剂组的刺激指数显著(P〈0.05)高于其它各组;ECMS800 g-油佐剂组的攻毒保护率高达100%。结果表明,ECMS和油佐剂两者混合使用可能存在协同作用,可有效提高兔支气管败血波氏杆菌灭活疫苗的免疫效果。
- 刘亚平肖琛闻刘燕季权安韦强鲍国连姚火春
- 关键词:支气管败血波氏杆菌佐剂
- 兔波氏杆菌LAMP检测用引物组、检测试剂盒和检测方法
- 本发明涉及家畜细菌病的诊断技术领域,尤其涉及兔波氏杆菌LAMP检测的引物组、检测试剂盒和检测方法。兔波氏杆菌LAMP检测的引物组,外引物组1如SEQ ID NO.1所示,外引物组2如SEQ ID NO.2所示,内引物组1...
- 刘燕鲍国连李科韦强肖琛闻季权安
- 文献传递
- 兔波氏杆菌fimN蛋白间接ELISA抗体检测方法的建立被引量:3
- 2013年
- 为建立兔波氏杆菌(Bb)的快速检测方法,本研究采用纯化重组兔Bb fimN蛋白作为包被抗原建立了间接ELISA抗体检测方法。通过优化反应条件,确定其检测临界OD450nm值为0.295。检测结果显示,该方法对兔Bb标准阳性血清检测的敏感性为1∶216;而与兔巴氏杆菌、兔出血症病毒阳性血清无交叉反应。重复性试验表明,其组内和组间变异系数均小于10%。采用建立的间接ELISA方法对浙江省5家兔场采集的150份兔血清样品的检测阳性率为55%。该方法的建立为进一步研发兔Bb ELISA诊断试剂盒提供了实验依据。
- 刘燕章春桃韦强鲍国连肖琛闻季权安
- 关键词:ELISA
- 兔多杀性巴氏杆菌环介导等温扩增检测方法的建立被引量:8
- 2013年
- 为建立一种快速、准确地检测兔多杀性巴氏杆菌(Pm)的环介导等温扩增(LAMP)方法,本研究利用设计的4条特异性引物,在链置换DNA聚合酶的作用下,优化反应条件,并进行特异性和敏感性试验。结果表明,建立的LAMP扩增反应可以在70 min内完成;具有良好的特异性;敏感性为普通PCR的10倍,最低可以检测量为16 cfu的DNA;采用建立的LAMP方法对27份经PCR检测Pm阳性的样品进行检测,结果均呈阳性。该方法的建立为Pm在临床上的快速检测提供了一种新的技术手段。
- 李科刘燕韦强肖琛闻季权安鲍国连
- 关键词:兔多杀性巴氏杆菌PCR
- 兔巴氏杆菌与肠型球虫混合感染的诊治
- <正>兔巴氏杆菌与肠型球虫病是家兔发生在两个不同系统的疾病,前者属于呼吸系统疾病,主要表现为呼吸系统的症状;后者属于消化系统的肠道疾病,主要表现出腹泻的特征。临床上这两种疾病一起混合感染并不多见,而作为养殖者,以及兽医工...
- 韦强肖琛闻黄叶娥季权安刘燕李科鲍国连
- 文献传递
- 兔巴氏杆菌和波氏杆菌多重PCR检测方法的建立被引量:9
- 2012年
- 参考GenBank中兔巴氏杆菌16SrRNA和波氏杆菌的fim2的基因序列,应用Premier 5.0软件在二者高度保守区设计了2对引物,建立了适合巴氏杆菌和波氏杆菌快速检测的多重PCR检测方法。以该方法对巴氏杆菌和波氏杆菌参考菌株进行PCR扩增,分别能从各自的基因组中扩增出与试验设计相符的644bp和425bp的特异性DNA片段。将扩增所得的DNA片段进行克隆测序,测序结果表明分别为巴氏杆菌16SrRNA和波氏杆菌fim2基因序列。该方法对波氏杆菌的检测下限为4×102 CFU,对巴氏杆菌的检测下限为6×101 CFU。对兔源性沙门菌、葡萄球菌、大肠杆菌、魏氏梭菌扩增结果为阴性。表明所建立的RT-PCR检测技术具有特异、快速和敏感的特点,可用于鉴别诊断兔巴氏杆菌和波氏杆菌以及2者混合感染。
- 刘燕韦强肖琛闻鲍国连季权安庞安娜
- 关键词:巴氏杆菌波氏杆菌多重PCR
- 兔波氏杆菌新免疫原性蛋白免疫效果研究
- 引言兔波氏杆菌病是由波氏杆菌(Bordetella bronchiseptica,Bb)引起的一种家兔慢性呼吸道传染病,给养兔业带来了严重的的经济损失,目前临床尚无有效防控疫苗[1,2]。细菌外膜蛋白(Outer mem...
- 刘燕陈辉韦强肖琛闻季权安鲍国连
- 一种含木鳖子皂甙的油佐剂疫苗及其制备方法
- 一种含木鳖子皂甙的油佐剂疫苗及其制备方法,疫苗中含有油佐剂和木鳖子皂甙佐剂,每毫升疫苗中木鳖子皂甙佐剂的含量为0.5~2.5毫克,油佐剂占疫苗总体积的30%~50%。其制备方法为:先将木鳖子皂甙溶解于少量的生理盐水中成为...
- 胡松华肖琛闻
- 文献传递
- 兔致病性大肠杆菌发病模型的建立
- 兔大肠杆菌病是一种常见多发的肠道传染病,发病率和死亡率极高。药物治疗效果越来越差,减抗治疗的需求越来越强烈,为了考核防制大肠杆菌病抗生素替代品的效果,必须建立大肠杆菌发病模型。本文就这方面开展了研究,并达到了预期的目的。...
- 韦强肖琛闻黄叶娥李科季权安刘燕鲍国连
- 关键词:大肠杆菌
- 文献传递
- 兔波氏杆菌LAMP检测用引物组、检测试剂盒和检测方法
- 本发明涉及家畜细菌病的诊断技术领域,尤其涉及用于兔波氏杆菌LAMP检测的引物组、检测试剂盒及其检测方法。兔波氏杆菌LAMP检测的引物组,外引物组1如SEQNO1所示,外引物组2如SEQNO2所示,内引物组1如SEQNO3...
- 刘燕鲍国连李科韦强肖琛闻季权安