王艳红
- 作品数：5 被引量：9H指数：2
- 供职机构：东北林业大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划中央高校基本科研业务费专项资金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 羽衣甘蓝泛素结合酶ubc7基因分离、原核表达及纯化被引量：3
- 2013年
- 为分离羽衣甘蓝(Brassica oleracea var.acephala)自交不亲和系(S13-b S13-b)泛素结合酶7(ubc7)基因,探讨Ubc7重组蛋白的原核表达及纯化。利用CTAB的方法提取羽衣甘蓝柱头总RNA,通过RT-PCR的方法分离ubc7基因,将编码ubc7基因的cDNA序列亚克隆到pET-14b原核表达载体中,将阳性重组表达质粒转化到大肠杆菌表达菌株BL21(DE3)pLysS中,利用IPTG进行诱导表达,并通过Ni2+-NTA树脂进行亲和层析的方法纯化重组蛋白。结果表明,获得的Boubc7含有一个长度为501 bp的开放读码框,编码一个含有166个氨基酸残基的蛋白质。预测BoUbc7的相对分子质量约为18.7 kDa,理论等电点(pI)为5.35。利用IPTG诱导的细菌蛋白中,SDS-PAGE显示出在分子量大小23 kDa处有蛋白特异性的表达,这与预测的His6融合的BoUbc7蛋白分子量相符;利用Ni2+-NTA树脂进行亲和层析纯化后,成功获得了BoUbc7融合蛋白。该试验分离了羽衣甘蓝ubc7基因,并通过原核表达系统获得了BoUbc7重组蛋白,为进一步分析其生物学功能奠定了基础。
- 蓝兴国李晓屿杨佳王艳红李玉花
- 关键词：羽衣甘蓝泛素结合酶原核表达
- 芸苔属植物自交不亲和性中的细胞识别被引量：4
- 2009年
- 从细胞识别的角度概述芸苔属植物自交不亲和信号的产生和转导机制的研究进展。
- 王艳红李玉花蓝兴国
- 关键词：芸苔属自交不亲和性SCRSRK
- HBsAg血清型及其亚型检测的研究及临床分析进展被引量：1
- 2011年
- 全世界有3.5～4.0亿乙型肝炎病毒（hepatitis B virus,HBV）慢性感染者,并且每年约有100万人死于HBV相关的肝脏疾病。在我国HBV高度传播的区域,人群感染率高达9%～10%,其中约2 000万为慢性乙型肝炎患者。
- 王艳红周亦凭殷珏蓝兴国陆梅生李玉花
- 关键词：慢性乙型肝炎患者乙型肝炎病毒人群感染率肝脏疾病
- 羽衣甘蓝柱头酵母双杂交cDNA文库的构建与分析被引量：1
- 2010年
- 目的:构建应用于酵母双杂交系统的羽衣甘蓝柱头cDNA文库。方法:以羽衣甘蓝S13-bS13-b自交不亲和系为材料,提取柱头的总RNA,用亲和层析法分离纯化mRNA,利用CytoTrapXR建库试剂盒构建羽衣甘蓝柱头cDNA文库。结果:羽衣甘蓝柱头cDNA原始文库的库容量为2.5×105;扩增后文库的库容量约为4×108,重组率为96%,插入片段大小为0.4～3kb,平均长度在0.8kb左右。结论:构建了应用于酵母双杂交系统的羽衣甘蓝自交不亲和系柱头的cDNA文库,为探讨芸苔属植物自交不亲和的分子机理奠定了基础。
- 杨佳王艳红李玉花蓝兴国
- 关键词：羽衣甘蓝柱头CDNA文库酵母双杂交
- 羽衣甘蓝S_(13-b)位点受体激酶基因的克隆及激酶结构域的原核表达被引量：1
- 2010年
- 目的:分离羽衣甘蓝S13-b位点受体激酶(SRK13-b)基因并进行序列及结构域分析,构建SRK13-b结构域的原核表达载体并进行重组蛋白质的原核表达和纯化。方法:提取羽衣甘蓝S13-bS13-b自交不亲和系花期柱头的RNA,用RT-PCR法分离SRK13-b基因;将编码SRK13-b激酶结构域的序列插入大肠杆菌表达载体pET-14b中,构建原核表达质粒pET-SRK13-bCT,转化大肠杆菌BL21(DE3)pLysS菌株,经0.1mmol/LIPTG诱导,用Ni-NTA亲和层析柱对SRK13-b激酶结构域蛋白进行纯化。结果:分离获得羽衣甘蓝SRK13-b基因的长度为2571bp,编码856个氨基酸,GenBank收录号为EU180597;对SRK13-b激酶结构域蛋白进行诱导表达及纯化,SDS-PAGE显示相对分子质量约43×103的蛋白质特异表达,对表达产物进行分离纯化,获得了SRK13-b激酶结构域的融合蛋白。结论:羽衣甘蓝SRK13-b基因的克隆及激酶结构域的原核表达,为研究SRK的功能及自交不亲和性奠定了基础。
- 蓝兴国杨佳王艳红李玉花
- 关键词：羽衣甘蓝自交不亲和原核表达纯化
