王晶磊 作品数:45 被引量:82 H指数:5 供职机构: 南昌大学基础医学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 江西省教育厅科学技术研究项目 江西省自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 农业科学 文化科学 更多>>
胚胎卵巢生殖细胞表达的Stra8在成年雌鼠骨髓干细胞离体分化中的表达 被引量:1 2009年 目的探索雌性骨髓干细胞(FBMSCs)离体培养条件下是否表达生殖干细胞减数分裂启动标志基因Stra8,判断其是否有向卵母细胞样细胞分化的能力。方法全骨髓贴壁法分离青年雌性SD大鼠FBMSCs,传代培养第3代FBMSCs。将第3代FBMSCs随机分为2组:(1)对照组应用DMEM+15%胎牛血清培养8d;(2)全反式维甲酸(ATRA)组在对照组基础上加入终浓度为10-5mol/L的ATRA。用RT-PCR方法检测2组Oct4、Vasa、Stra8 mRNA的表达。结果对照组和ATRA组连续培养8d都可检测到Oct4、Vasa、Stra8 mRNA在诱导分化的FBMSCs中的表达。结论FBMSCs中具有能向卵母细胞样细胞分化的多能干细胞;减数分裂启动标志基因Stra8不仅在雌性胚胎生殖干细胞表达,也在成年FBMSCs离体分化中表达。 熊明娣 杨蓓 卢夏英 米美玲 倪秀丽 邹挺 张大雷 王晶磊 徐斯凡关键词:全反式维甲酸 VASA OCT4 睾丸支持细胞与骨髓间充质干细胞共培养的初步研究 被引量:2 2007年 目的观察睾丸支持细胞(sertoli cells,SCs)与骨髓间充质干细胞(mesenchymal stemcells,MSCs)共培养时SCs对MSCs扩增的影响。方法取雄性SD大鼠睾丸,分离出SCs,取SD大鼠,分离出骨髓MSCs,将两种细胞用"三明治"式的方法共培养7d。结果共培养组的MSCs前四天生长较对照组快,第5天无明显差异,第6和第7天细胞数量迅速减少。结论在体外共培养的早期,SCs可以显著促进MSCs的生长,但在后期则反而抑制MSCs的生长,具体原因有待进一步研究。 杨蓓 邹挺 王晶磊 米美玲 周玲 陈加祥 徐斯凡关键词:骨髓间充质干细胞 睾丸支持细胞 细胞培养 慢性束缚应激对围着床期小鼠胚泡的影响及其机制 被引量:1 2018年 目的探讨慢性束缚应激刺激对围着床期小鼠模型胚泡着床的影响及其机制。方法选择10~12周龄的健康、清洁级性成熟的雌性和雄性昆明种小鼠各20只,建立妊娠动物模型。将16只孕鼠随机分为应激组和对照组,每组8只。应激组小鼠在妊娠第3天(D3)上午开始给予束缚应激刺激,连续3d。对照组小鼠在应激组束缚应激刺激时给予断水、断食,同时不给予任何处理。妊娠D5慢性束缚应激刺激后,采用酶联免疫吸附法(ELISA法)检测血清皮质酮、孕酮和催乳素的水平,尾静脉注射0.5%锥虫兰染液观察小鼠子宫内膜组织胚泡的着床位点数,观察、测定孕鼠子宫蜕膜胚泡数及孕鼠体质量、子宫和卵巢质量,并计算子宫和卵巢指数,HE染色法观察慢性束缚应激刺激对小鼠子宫蜕膜组织间质细胞和腺体的病理学改变,半定量RT-PCR法检测子宫蜕膜组织中IL-10mRNA和TNF-αmRNA水平的变化。结果与对照组比较,应激组血清皮质酮水平明显升高,催乳素、孕酮水平均明显降低,子宫内膜胚泡着床位点数减少,体质量、子宫质量均减轻,子宫指数减少,光学显微镜观察显示对照组子宫蜕膜内胚泡呈串珠状,胚泡大小和形状基本一致,分布均匀。应激组子宫蜕膜见胚泡串珠状部分消失并分布不均匀,子宫蜕膜胚泡数减少。子宫蜕膜中IL-10mRNA、TNF-αmRNA表达水平均明显降低,TNF-αmRNA/IL-10mRNA比值明显升高(均P<0.05)。结论围着床期慢性束缚应激刺激可使血清中催乳素和孕酮的含量下降,皮质酮含量升高,并可能导致子宫局部Th1/Th2免疫平衡向Th1漂移,降低小鼠胚泡着床数,从而影响胚泡着床。 刘红宇 叶婵琦 刘仁平 黄博抒 胡炜华 王晶磊关键词:慢性束缚应激 围着床期 胚泡着床 子宫蜕膜 皮质酮 小鼠 原癌基因c-src通过磷酸化信号转导与转录激活子-3蛋白影响大鼠精原干细胞活性 被引量:8 2008年 本文旨在研究原癌基因c-src在体外培养的9日龄大鼠精原干细胞中的表达及其与精原干细胞活性相关的信号通路。用MTT比色法观察反义c-src脱氧寡核苷酸(oligodeoxynucleotides,ODNs)对精原干细胞作用的量效及时效关系;用RT-PCR检测c-src mRNA的表达;用Western blot检测c-src表达产物pp60c-src和磷酸化的信号转导与转录激活子-3(phosphorylatedsignal transducer and activator of transcription-3,p-STAT3)的表达。结果显示,与空白对照组相比,10μmol/L反义c-srcODNs作用12h后精原干细胞活性下降8.1%(P<0.05),且c-src mRNA表达明显下调;Western blot结果显示反义c-src ODNs组pp60c-src、p-STAT3蛋白表达与空白对照组相比分别下降了33.8%、45.3%(均P<0.01)。以上结果提示,原癌基因c-src可能通过p-STAT3蛋白影响精原干细胞的活性。 陈加祥 王新长 王晶磊 徐斯凡 秦海燕 杨蓓 杨俊玲 邹挺关键词:精原干细胞 c-SRC基因敲减降低宫颈癌HeLa细胞活性及磷酸化的信号转导与转录激活子-3蛋白表达 被引量:2 2011年 本文旨在研究c-SRC蛋白对人宫颈癌HeLa细胞的活性及对磷酸化的信号转导与转录激活子-3(phosphorylated signal transducer and activator of transcription-3,p-STAT3)表达的影响。人宫颈癌HeLa细胞转染c-SRC RNA干涉质粒后,分别用RT-PCR和Westernblot检测细胞内c-SRC mRNA和蛋白的表达;用MTT比色法观察c-SRC敲减后细胞的活性;用流式细胞仪检测细胞周期;同时检测细胞内p-STAT3的表达情况。转染c-SRC RNA干涉质粒后,HeLa细胞内c-SRC mRNA和蛋白的表达显著降低;在转染c-SRC RNA干涉质粒24、48、72及96h后,细胞活性分别下降了23.1%、29.3%、38.6%和45.0%(均P<0.05)。转染c-SRC RNA干涉质粒24、48、72及96h后,HeLa细胞S期细胞数分别下降了5.6%、10.0%、15.2%和19.9%(均P<0.05)。敲减c-SRC后,细胞内p-STAT3的含量也显著下降。与对照组相比,STAT3抑制剂Piceatannol处理细胞24、48、72、96h后,细胞活性分别下降了23.8%、29.7%、37.3%和45.4%(均P<0.05),而Piceatannol预处理细胞后再用重组人c-SRC蛋白处理增加细胞内c-SRC蛋白的含量,细胞活性未见明显增加。以上结果表明,c-SRC敲减后抑制HeLa细胞的活性可能与其抑制STAT3蛋白磷酸化相关。 陈加祥 徐林林 吴圣娇 刘红宇 王晶磊 邹挺关键词:宫颈癌 C-SRC 子宫内膜细胞培养方法的研究 被引量:13 2007年 秦海燕 王晶磊 陈加祥关键词:子宫内膜 细胞培养 上皮细胞 间质细胞 原癌基因c-jun对EDS诱导大鼠睾丸间质细胞凋亡的研究 被引量:2 2006年 本研究用c-junASODNs拮抗c-jun,用EDS诱导的大鼠睾丸间质细胞凋亡,通过琼脂糖凝胶电泳、Henchest33342染色荧光显微镜检查方法研究c-jun对EDS诱导的大鼠睾丸间质细胞凋亡的影响.实验结果显示0.5μmol/Lc-junASODNs抑制EDS诱导的离体间质细胞凋亡(P<0.01).提示c-jun有促进大鼠睾丸间质细胞凋亡的作用. 徐斯凡 袁双虎 王晶磊关键词:睾丸间质细胞 C-JUN 反义寡脱氧核苷酸 生殖干细胞增殖中的信号转导 被引量:2 2006年 在多细胞有机体中,细胞的生物活动都是由细胞内信号来调节的,这些信号转导途径可以决定细胞是增殖还是分化,这些信号途径的不协调有可能导致癌症或其他疾病.生殖干细胞(germline stem cells,GSC)是配子发生的中枢,与其他干细胞相似,GSC既能够增殖也能够分化,GSC的增殖能够保持动物体内配子数量在正常范围;如果其增殖异常,将会使机体出现不孕不育.本文主要阐述与生殖干细胞增殖相关的信号转导途径:转化生长因子β超家族(transforming growth factoβrsuper family,TGFβ超家族)信号转导途径、JAK-STAT信号转导途径(janus kinase-signal transduer and activator of transcription,JAK-STAT)和Piwi信号途径进行阐述. 陈加祥 王晶磊 徐斯凡关键词:生殖干细胞 增殖 信号转导 血清培养对大鼠精原干细胞生长周期的影响 被引量:3 2006年 目的探讨血清培养对大鼠精原干细胞生长周期的影响。方法采用percoll分离及差速贴壁法纯化精原干细胞,抗端粒酶逆转录酶免疫组化进行鉴定,用流式细胞仪对细胞生长周期进行判断。结果在有血清的培养基中培养的精原干细胞,其OD值逐渐升高(P<0.05);精原干细胞DNA合成期(S期)含量的增多。结论抗端粒酶逆转录酶免疫组化可作为鉴定精原干细胞提供较为充分的依据;血清能促进精原干细胞的体外增殖。 陈加祥 戴群 陈月江 胡晓 徐林林 王晶磊 杨俊玲关键词:精原干细胞 纯化 血培养 细胞周期 原癌基因A-myb对大鼠精原干细胞活性的影响 被引量:1 2011年 目的研究原癌基因A-myb在体外培养的9日龄大鼠精原干细胞活性中的作用。方法用不连续密度的Percoll液结合差速贴壁方法分离和纯化精原干细胞;用RT-PCR检测A-myb mRNA的表达;用Western blot检测A-myb表达产物A-myb的表达;用MTT比色法观察反义A-myb脱氧寡核苷酸(oligodeoxynucleotides,ODNs)对精原干细胞作用的量效及时效关系。结果分离提取的细胞基本上为精原干细胞。与空白对照组相比,10μmol.L-1反义A-myb ODNs作用48h后精原干细胞内A-myb mRNA表达下降了47.8%(P<0.05),A-myb蛋白下降了51.7%(P<0.05)。5、10、20μmol.L-1反义A-myb ODNs组与0μmol.L-1组在作用细胞48h后相比,精原干细胞的活性分别下降11.8%(P<0.05)、50.1%(P<0.01)、53.8%(P<0.01)。与空白对照组相比,10μmol.L-1反义A-myb ODNs组作用12、24、48、72h后精原干细胞活性分别下降18.8%(P<0.05)、30.0%(P<0.01)、38.6%(P<0.01)、41.0%(P<0.01),而正义A-myb ODNs组和空白对照组相比无明显差异。结论原癌基因A-myb可调节大鼠精原干细胞的活性。 陈加祥 徐林林 王晶磊关键词:精原干细胞