王中华
- 作品数：25 被引量：77H指数：5
- 供职机构：宁波大学海洋学院更多>>
- 发文基金：浙江省科技攻关计划宁波市科技局资助项目公益性行业科研专项更多>>
- 相关领域：环境科学与工程生物学农业科学轻工技术与工程更多>>
- 宁波沿海陆源排污口拟杆菌(Bacteroidetes)分布的特点被引量：10
- 2014年
- 采用高通量454焦磷酸测序方法对宁波沿海2个重点排污口、8个一般排污口的20个站位水样进行分析,得到2011年3月、5月、8月、10月份各排污口总体微生物以及拟杆菌纲的分布情况。通过对454测序结果分析,共成功鉴定24个门,主要包括变形菌门(Proteobacteria)、拟杆菌门(Bacteroidetes)和后壁菌门(Firmicutes)等。其中拟杆菌门的变化趋势与梭杆菌门(Fusobacteria)相似,均为随月份的增加而递增的趋势。在拟杆菌门下,共鉴定出3个纲3个目9个科27个属,4个采样月份大部分站点的优势属为黄杆菌纲(Flavobacteria),其次为拟杆菌纲(Bacteroidetes)、鞘脂杆菌纲(Sphingobacteria),通过聚类分析发现,拟杆菌门分布规律主要与排污口类型和季节有一定的关系。通过454测序检测到了极难培养的寡营养细菌鞘脂杆菌,也说明了454测序较传统微生物生态学研究方法的优势,同时针对普雷沃菌属(Prevotella sp.)及黄杆菌属(Flavobacterium sp.)两种具有代表性的属的分布情况进行了分析。
- 王中华徐茂琴谢利张迪骏周君何伟娜陈丽萍童茜茜张春丹苏秀榕
- 关键词：黄杆菌
- 原油微生物群落构成及降解菌降解特性的研究
- 为分离得到高效原油降解菌,直接向原油中加入营养物刺激,培养一段时间后原油乳化降解。气相色谱法、红外光谱法和紫外吸收均表明降解菌体系具有较强的降解原油烃的能力。采用细菌16S r DNA通用引物和PCR扩增等方法,构建原油...
- 王中华梁静儿杨建强周君李成华李太武
- 关键词：原油红外光谱RDNA气相色谱
- 文献传递
- 一株海洋细菌对原油降解的分析被引量：2
- 2011年
- 对实验室所获得的一株海洋细菌LU1进行原油的降解特性分析和降解条件的优化,结果表明,温度、pH、盐度、油质量浓度、接种量等均对石油的降解率有影响,在25℃,初始pH8.0,含油量为0.5%的低盐条件下,其对原油的降解效果最佳,降解率达61%。将其与实验室分离得到的一株降解率为67%的原油降解微生物DYL-1混合后,其对原油的降解率可达78%,混合菌的降解效果要优于单菌。气相色谱分析结果表明,此菌株能够降解原油组分中的烃类物质,对原油具有较为显著的降解。16S序列分析结果表明此株菌属于假交替单胞菌属(Pseudoalteromonassp.)细菌。
- 王中华李佳霖李太武苏秀榕秦松
- 关键词：原油生物降解RRNA降解率气相色谱
- 排污口水体中阴沟肠杆菌的多重PCR检测方法
- 本发明公开了排污口水体中阴沟肠杆菌的多重PCR检测方法，通过阴沟肠杆菌抗体溶液制备和免疫磁珠溶液制备，将待测水样中用免疫磁珠溶液富集，得到阴沟肠杆菌富集的待检样品溶液，然后用DNA提取试剂盒提取DNA模板，再通过多对引物...
- 苏秀榕周君张春丹李晔王中华李春丽张迪骏何伟娜
- 文献传递
- 基于蛋白组学和代谢组学技术解析腐败希瓦氏菌净化水产品加工废水的生物学机制被引量：4
- 2016年
- 目的:利用蛋白组学、代谢组学和实时荧光定量PCR技术研究腐败希瓦氏菌净化水产品加工废水的生物学机制,挖掘相关功能蛋白,为食品加工废水治理提供理论依据。方法:以淡水培养为对照,宁波象山石浦水产品加工园区排污口处废水培养为试验组,应用双向电泳(2-DE)技术筛选2种培养的腐败希瓦氏菌功能蛋白;利用实时荧光定量PCR(q RT-PCR)技术验证基因表达情况;核磁共振(NMR)技术鉴定菌体胞内代谢产物。结果:双向电泳筛选出31个差异蛋白,表达差异1.5倍以上的蛋白22个,最大差异比率为12.1。采用MALDITOF-MS-MS技术进行蛋白定性,GO和KEGG分析,其差异蛋白涉及铁代谢、ABC转运系统、抗生素合成、硫代谢、谷胱甘肽合成等。选取11个基因进行q RT-PCR,7个基因与蛋白表达水平一致,4个基因呈现负相关。NMR检出10类59种胞内代谢产物,其中腐胺、乙酸盐等8种代谢物的表达差异较大。结论:与净化水产品加工废水相关的功能蛋白2个,即半胱氨酸合酶和异柠檬酸脱氢酶。这两种酶在降解无机硫、重金属解毒、清除自由基,抵御氧化性损伤等方面发挥关键的作用,有望将其应用于废水治理。
- 何伟娜王中华张迪骏陈丽萍周君苏秀榕
- 关键词：蛋白组学代谢组学实时荧光定量PCR水产加工废水
- 宁波陆源入海排污口优势菌群的数量、组成分析与研究被引量：7
- 2013年
- 研究了宁波地区海域2011年3月、5月、8月、10月的排污口污水水体中可培养细菌的数量、组成及其分布,探讨了优势菌群与当地环境的相关关系.结果表明:各地区细菌分布各月份性差异明显,5月份、8月份细菌数量明显高于3月与10月,其均值数量级能达到106cfu mL-1;象山、余姚地区排污口细菌数量高于奉化、宁海、北仑地区,细菌数量最高均值为8月份象山地区排污口(4.7×106cfu mL-1).优势菌群分布具有季节性分布特征:3月份特有优势菌群为假单胞菌属(Pseudomonas sp.)与海单胞菌属(Marinomonas sp.);5月份为假单胞菌属(Pseudomonas sp.)、海单胞菌属(Marinomonas sp.)与弧菌属(Vibrio sp.);8月份为泛菌属(Pantoea sp.)、弧菌属(Vibriosp.)、肠杆菌属(Enterobacter sp.);10月份为不动杆菌属(Acinetobacter sp.)、弧菌属(Vibrio sp.)、希瓦氏菌属(Shewanella sp.).多维尺度分析表明:临近海域类型与排污口类型为排污口细菌群落变化的两个关键因素.
- 姜南李春丽周君王中华李太武苏秀榕
- 关键词：优势菌群多维尺度分析
- 南移养殖的刺参(Apostichopus japonicus)cDNA文库的构建及原肌球蛋白基因的研究被引量：5
- 2010年
- 以南移养殖的刺参为实验材料,采用非均一化的Oliga-dT引物定向克隆技术构建了南移刺参混合组织的cDNA文库。对文库质量的分析结果表明,cDNA文库的库容量为2.2×107cfu,重组率达95.8%,平均插入片段长度750bp左右。挑取cDNA克隆进行5’端测序,成功测序185个反应,分析得到136个单基因簇(Unigene),其中包括40个重叠群(Contigs)、96个单拷贝EST(Singletons)。结果表明,克隆南移养殖的刺参原肌球蛋白(tropomyosin,Trp)cDNA全长序列为1112bp,ORF编码284个氨基酸,其预测蛋白的分子量为33.27kDa,等电点为4.56。该氨基酸序列与紫石海胆、南极大磷虾、锯缘青蟹、文昌鱼、河蟹、家蚕同源性分别为62%、51%、46%、49%、47%、46%。
- 崔静李太武苏秀榕李晔徐静周君应琪王中华李松伟
- 关键词：刺参CDNA文库基因克隆
- 环介导恒温扩增法快速检测短小芽孢杆菌被引量：1
- 2011年
- 短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)是一种能引起食源性疾病的腐败菌,对其进行快速检测具有重要意义。针对短小芽孢杆菌木聚糖(xynA)基因,设计了4条特异性引物(两条内引物和两条外引物),通过条件优化,首次将一种新颖的核酸扩增技术——环介导恒温扩增技术应用于短小芽孢杆菌的快速检测。采用该技术,63℃温育1h的条件下扩增短小芽孢杆菌DNA,琼脂糖凝胶电泳得到特异性梯度条带。PCR和LAMP的检测灵敏度分别约为162和16.2拷贝每反应。结果表明,该方法检测短小芽孢杆菌特异性强、灵敏度高、操作简便、检测成本低,1h即可完成,有望发展成为快速检测短小芽孢杆菌的有效手段。
- 应琪李太武苏秀榕李晔周君崔静王中华李松伟
- 关键词：短小芽孢杆菌
- 大连长山群岛海岸带沉积物微生物群落结构特征被引量：10
- 2011年
- 【目的】为揭示海岸带微生物群落结构在人类活动影响下的分布差异及对环境因子变化的响应趋势,【方法】本实验采用t-RFLP和DGGE技术,对大连长山群岛不同功能类型海岸潮间带沉积物中的微生物群落结构特征进行比对和分析,并通过16S rRNA基因文库解析养殖污染站位的微生物群落结构特征。【结果】T-RFLP的t-RF分析显示,养殖污染严重站位的微生物丰度、香农指数和均匀度明显高于其它站位。通过对t-RFLP色谱峰和DGGE图谱聚类分析发现,处于旅游区的2个站位微生物群落结构相似度较高,养殖区随污染程度加重与旅游区的群落结构差异增大。对污染严重站位建立的克隆文库显示变形菌门(Proteobacteria)为优势菌群,其中γ-变形菌门是主要存在的亚门微生物。【结论】T-RFLP和DGGE技术从不同方面反映了环境中的微生物群落结构特征,研究结果表明养殖污染区的微生物群落结构发生明显变化,其影响大于地理隔离效应,污染严重区域的微生物群落中存在大量肠杆菌属,且多个物种与富营养化和赤潮相关联,如拟杆菌门和α-变形细菌红细菌目的细菌。
- 李佳霖王中华秦松汪光义
- 关键词：海岸带微生物群落结构
- 原油微生物群落构成及降解菌降解特性的研究
- 为分离得到高效原油降解菌,直接向原油中加入营养物刺激,培养一段时间后原油乳化降解.气相色谱法、红外光谱法和紫外吸收均表明降解菌体系具有较强的降解原油烃的能力.采用细菌16Sr DNA通用引物和PCR扩增等方法,构建原油降...
- 王中华梁静儿杨建强周君李成华李太武
- 关键词：海洋环境溢油污染降解菌
- 文献传递
