牛焱焱
- 作品数：2 被引量：8H指数：1
- 供职机构：中国科学技术大学更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 大豆乙烯受体基因的克隆及相关信号传导途径的研究
- 乙烯作为一种植物激素，影响植物各种生理代谢过程。近年来，人们在拟南芥(Arabidopsisthaliana)中分离出几类与乙烯反应相关的突变体，包括乙烯不敏感突变体(ethylene-insensitive，EIN)、...
- 牛焱焱
- 关键词：亚细胞定位基因克隆
- 文献传递
- 基于地高辛标记对小麦进行Southern杂交分析主要影响因素的优化和验证被引量：8
- 2012年
- 以转基因小麦和野生型小麦DNA为材料,对利用地高辛标记对小麦基因组DNA进行Southern杂交分析的影响因素进行了优化研究,包括探针制备与纯化、样品DNA量、酶切体系、真空转印条件、杂交条件、免疫检测方法等。结果表明,对随机引物标记的模板和标记后的探针进行纯化可明显提高探针的标记效率,10μg高质量的DNA样品在80μl的体系中,酶切8～12h可获得良好的效果;真空转膜时使用碱性液比中性液获得的转膜效果更干净;试剂纯度、杂交温度及杂交炉转速等均对杂交效果产生重要影响;配合改进的CSPD涂布方法,使用化学发光检测系统比单纯使用X光片显像更易操作,背景更干净;本研究所优化的地高辛标记的小麦Southern杂交分析显示出较高的灵敏度和信噪比,结果稳定,可克服同位素标记对实验条件、设备及实验人员身体状况等限制,在普通实验室推广应用。
- 刘禄牛焱焱雷昊林志珊赵翔宇叶兴国张宪省
- 关键词：小麦地高辛标记随机引物免疫检测SOUTHERN杂交
