毕燕会
- 作品数：59 被引量：86H指数：5
- 供职机构：上海海洋大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划上海市自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学轻工技术与工程医药卫生更多>>
- 海带雌配子体特异性分子标记FSMSJ-1294及其应用
- 本发明公开了海带雌配子体特异性分子标记FSMSJ‑1294及其应用，属于基因工程领域。海带雌配子体特异性分子标记FSMSJ‑1294的序列如SEQ ID NO:5所示，其扩增引物的序列如SEQ ID NO:3和SEQ I...
- 周志刚李郅杜宇郑倩刘鹏飞毕燕会王雯
- 文献传递
- 缺刻缘绿藻CDP-乙醇胺：二酰甘油乙醇胺磷酸转移酶的基因序列和应用
- 本发明属于基因工程领域，公开了缺刻缘绿藻CDP‑乙醇胺:二酰甘油乙醇胺磷酸转移酶的基因序列和应用，MiEPT基因包括SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:3所示或与其互补的核苷酸序列，其编码蛋白的氨基酸序列如SEQ...
- 周志刚焦建璐毕燕会
- 光对海带雌、雄配子体lhcf5和lhcf6基因相对转录量的影响被引量：4
- 2009年
- 利用实时荧光定量PCR(Q-RT-PCR)方法分析了在不同光照强度、光质及有利于配子产生的条件下,lhcf5和lhcf6基因在海带(Laminaria japonica)雌、雄配子体中转录量的变化。不同光照强度条件下(光源为白光),lhcf5和lhcf6基因在黑暗中接近不转录;雌配子体在光照强度40μmol·m-2·s-1时转录量最高,而雄配子体的最高转录量出现在80μmol·m-2·s-1的光照强度处;高于此光照强度,2个基因的转录量都会随光照强度增加而降低。相对于同强度的白光来说,红光照射无论是短时间(3d)还是长时间(7d),都会促进2个基因的相对转录水平;蓝光对雌配子体中2个基因转录的促进作用不明显,而对它们在雄配子体中的转录有一定的促进作用。将海带配子体从营养生长转至有利于配子发生的条件下,雌、雄配子体lhcf5和lhcf6基因在第1天的转录量都明显增加;雌配子体在第4天以及第12天(lhcf6)或第14天(lhcf5)均显著增加,第6天及第10天接近不转录;雄配子体在第8天及第14天增加,第10天也近似不转录;发育阶段其他时间内的转录量都低于营养生长期的。结果表明,海带配子体lhcf5和lhcf6的转录受光诱导,其中红光的促进作用最明显;其转录可能因有利于配子体细胞叶绿体结构的完善及物质与能量的积累而利于细胞分裂与营养生长。
- 邹丹燕毕燕会周志刚
- 关键词：海带配子体光质
- 海带配子体碳酸酐酶(CA)基因的克隆及其特征分析被引量：4
- 2011年
- 根据海带雄配子体抑制消减cDNA文库2个长为376 bp的表达序列标签(expressedsequence tag,EST),Blastn搜索发现它们与掌状海带的碳酸酐酶(carbonic anhydrase,CA)基因序列(GenBank登录号:AJ130777)有70%的相似性,结合该EST以及掌状海带CA基因保守序列设计引物,扩增得到海带配子体CA基因部分开放阅读框(open reading frame,ORF)序列,再以此为基础设计基因特异性引物,然后利用cDNA末端快速扩增技术(rapidamplification of cDNA ends,RACE),克隆得到一条长2 804 bp的cDNA序列(GenBank登录号:JF827608),其中5'-非翻译区(untranslated region,UTR)长166 bp,3'-UTR长1 765 bp,且具有明显的polyA尾巴,ORF长873 bp。它编码一个由290个氨基酸组成的前体蛋白,预测在20 Gly-21 Val处有一个典型的信号肽酶切位点,酶切后的成熟蛋白由270个氨基酸组成,具有3个锌结合的His残基所构成的催化活性中心,其分子量为30.44 ku,等电点为5.06。无论在cDNA或者DNA序列上,雌、雄配子体CA基因都没有差异,且无内含子。Southern-blotting杂交结果显示,海带配子体CA基因为单拷贝基因。蛋白同源性搜索,发现该基因的编码蛋白与掌状海带的α-CA蛋白有87%的同源性。基于36个CA蛋白的氨基酸序列所构建的邻接(Neighbor-Joining)系统进化树显示,自海带配子体中所克隆的CA基因位于α-CA蛋白所组成的一支,推测它可能为α-型,因而不在线粒体中起作用。实时荧光定量PCR(quantitativereal-time PCR,Q-RT-PCR)结果表明,在增加CO2浓度的条件下,CA基因在海带雌、雄配子体中的日表达量均较未增加的条件下有所增加,由此推测该CA基因不属于胞外CA;基于海带配子体CA蛋白仅具有一个信号肽,可以推测它是定位于叶绿体外膜上,以泵的方式为叶绿体光合作用提供充足的CO2。
- 余贞毕燕会周志刚
- 关键词：海带配子体碳酸酐酶基因
- 大型海藻能源化利用的研究与思考被引量：16
- 2011年
- 随着一次性能源资源的枯竭及环境的恶化,生物质能越来越被更多的人们接受为未来重要的一种可再生能源。大型海藻因生活于海洋、不含有木质素、单位面积产量大等优点,必将引起更广泛的关注。但关于大型海藻生物质积累的生物学基础、合成代谢途径、微生物降解及其效率等方面的研究都非常缺乏。针对大型海藻能源化的潜能、国内外研究进展以及存在的问题,展开了讨论并展望其应用前景。
- 周志刚毕燕会
- 关键词：海藻海水养殖碳同化生物乙醇
- 不同地理种群瓦氏马尾藻ITS序列特征及其系统进化分析被引量：3
- 2014年
- 为研究不同地理种群瓦氏马尾藻ITS的序列变异,实验采用PCR扩增和序列测定方法,获得了3个不同地理种群15株瓦氏马尾藻的ITS全长序列,并进行序列分析。结果显示,15个个体共出现4种不同的ITS序列,它们相应的ITS1、5.8S、ITS2长度相同,均为762、158和507 bp,共有3个位点发生碱基变异。结合从GenBank中下载的马尾藻科3个属24种马尾藻的ITS序列,以羊栖菜属的羊栖菜,喇叭藻属的拟小叶喇叭藻和下延喇叭藻作为3个外群,采用邻位相连法构建分子系统进化树,结果显示,瓦氏马尾藻的ITS序列优先聚在一起然后以较高的置信度与南海马尾藻和球囊马尾藻聚为一支,在系统发生上显示出更近的亲缘关系。在选取的马尾藻中瓦氏马尾藻与南海马尾藻遗传距离最近为0.004,与拟小叶喇叭藻遗传距离最远为0.422。
- 毕燕会杨旭周志刚
- 关键词：ITS序列地理种群系统进化
- 海带配子体光捕获蛋白基因lhcf6的启动子克隆与鉴定被引量：1
- 2014年
- 根据海带配子体光捕获蛋白基因lhcf6的cDNA全长序列(GenBank登录号:DQ250739)设计引物,利用基因组步移技术克隆得到其在雌、雄配子体中的5'-侧翼序列,长度分别为932,901 bp。测序结果比对显示二者相似度为33.3%,说明该基因在雌、雄配子体中具有不同的上游调控区。网络服务器PlantCARE和Softberry启动子元件预测结果表明,二者均含有TATA框、节律性相关元件MBS、光反应相关元件MNF1和GAG-motif,其中雌配子体lhcf6基因5'-侧翼序列还特有LHC基因特征元件AT-rich序列,雄配子体特有节律性相关元件Circadian元件,这些元件可能与该基因表达受光质、光强、节律性等因素的调控有关。将其与GFP报告基因一起构建融合表达载体pCAMBIA1304-Flhcf6和pCAMBIA1304-Mlhcf6,利用pCAMBIA1304作对照,通过电击转化法分别转化莱茵衣藻。激光共聚焦荧光显微镜检测结果显示,含pCAMBIA1304-Flhcf6和pCAMBIA1304-Mlhcf6的转基因藻体中GFP基因均有表达,说明克隆得到的海带雌、雄配子体lhcf6基因的5'-侧翼序列具有启动子功能。
- 宁璞毕燕会周志刚
- 关键词：海带配子体启动子GFP
- 2个重组海带α-碳酸酐酶(CA)的酶活性比较研究
- 2022年
- 为了探究海带(Saccharina japonica)α-CA1和α-CA2是否具有催化CO_(2)的可逆水合反应和酯酶活性,作者通过原核表达得到这两种α-CA的可溶性的异源重组蛋白。分别用电极法和酯酶活性检测法来检测重组α-CA1(rα-CA1)和rα-CA2的水合酶活性和酯酶活性,结果发现,rα-CA1的水合酶活性(1.52±0.120U/mg)几乎是rα-CA2(0.54±0.046U/mg)的3倍,表明rα-CA1催化CO_(2)的水合能力明显大于rα-CA2。而两者的酯酶活性并没有显著的差别(rα-CA1比活力:0.697±0.176U/g,rα-CA2比活力:0.743±0.129 U/g),说明催化乙酸对硝基苯酯(p-NPA)生成对硝基苯酚(p-NP)的能力是没有显著差别的。实验结果证实这2个α-CA为功能蛋白,可能参与海带无机碳吸收和储存过程,因此,本研究为海带无机碳吸收和储存机制的解析提供了生物化学依据。
- 王震毕燕会周志刚
- 关键词：酯酶活性
- 海带α型碳酸酐酶基因Sjα-CA2及其编码蛋白和应用
- 本发明公开了海带α型碳酸酐酶基因Sjα‑CA2及其编码蛋白和应用，其cDNA序列如SEQ ID NO:1所示，其DNA序列如SEQ ID NO:2所示，上述基因Sjα‑CA2编码蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:3所...
- 周志刚王震乔亚明毕燕会
- 文献传递
- 瓦氏马尾藻叶绿体基因组特征和进化分析
- 毕燕会周志刚
