段晓明
- 作品数：17 被引量：35H指数：3
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- 转hGM-CSF基因HepG2细胞疫苗侵袭性和生长活性初步检测
- 2011年
- 目的:探讨经60Co处理的转hGM-CSF基因的HepG2肝癌疫苗的侵袭性和生长活性变化。方法:体外培养三种肝癌细胞(①野生型HepG2肝癌细胞②转染hGM-CSF基因的HepG2肝癌细胞③60Co射线处理的转hGM-CSF基因的HepG2肝癌疫苗)采用MTT方法检测三种细胞在24h、48h、72h的OD值并绘出生长曲线;利用transwell小室进行体外侵袭实验来观察上述三种细胞侵袭性;用RT-PCR技术检测上述三种细胞基质金属蛋白酶2(MMP-2)在mRNA水平上表达的变化;结果:经60Co照射处理的转hGM-CSF基因的HepG2肝癌疫苗组OD值在相同培养时间点较其他两组明显变小且差异有显著性(P<0.05)。三种细胞(上述①②③种细胞)transwell侵袭试验显示:③组穿过人造基底膜的细胞数量明显少于前两组;PT-PCR示:③组细胞的MMP-2的mRNA的表达明显低于①②。结论:经过60Co处理过的转hGM-CSF基因的HepG2肝癌疫苗的侵袭性和生长活性均明显降低。
- 程元星段晓明曾治中黄璐贺修胜
- 动态监测PCT、WBC、ESR、hsCRP诊断骨科内固定术后早期切口感染被引量：9
- 2017年
- 目的探讨血清降钙素原(PCT)联合血清白细胞(WBC)、红细胞沉降率(ESR)、超敏C反应蛋白(hs CRP)连续监测在骨科内固定术后早期切口感染诊断中的意义。方法观察骨科内固定术后疑似切口感染者54例,分为感染组(21例)和非感染组(33例),术前1 d及术后第1、2、3、5、7天取空腹外周静脉血3 ml检测PCT、WBC、ESR、hs CRP。结果感染组术后第3、5、7天PCT高于非感染组,差异有统计学意义(P<0.05)。2组术后各时间点WBC差异无统计学意义(P>0.05)。2组术后第1、2、3天ESR、hs CRP差异无统计学意义(P>0.05);感染组术后第5、7天ESR、hs CRP明显高于非感染组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论动态监测PCT、WBC、ESR、hs CRP可以明确骨科内固定术后早期感染的诊断。
- 向忠贺建军唐长友刘洪李浩波周贤超凌旻李智勇段晓明
- 关键词：术后切口感染红细胞沉降率
- HA纳米载体转hGM-CSF基因的HepG2疫苗的抗肿瘤活性研究被引量：2
- 2012年
- 目的:评价HA纳米载体转hGM-CSF基因的HepG2疫苗的抗肿瘤活性。方法:SCID小鼠20只腹腔内注射健康志愿者外周血淋巴细胞(1×107/ml)1.0 ml,同时背部皮下接种人肝癌HepG2细胞(1×107ml)0.2 ml。当皮下移植瘤体积长至100 mm3时,随机分四组:Ⅰ组,60Co照射的转染GM-CSF基因的HepG2细胞组,Ⅱ组,60Co照射的HepG2细胞组,Ⅲ组,生理盐水组,Ⅳ组,接种前,每组5只。MTT法检测各组小鼠脾细胞CTL活性,ELISA法检测血清IL-4和IL-12的水平。结果:转染GM-CSF基因的HepG2疫苗组小鼠脾细胞CTL活性明显高于其余组(P<0.05);同时血清Th1类细胞因子IL-12的水平明显升高(P<0.05),而Th2类细胞因子IL-4的水平无统计学意义(P>0.05)。结论:HA纳米载体转hGM-CSF基因的HepG2疫苗可刺激机体产生特异性免疫反应。
- 苏小芳段晓明黄璐曾治中程元星贺修胜
- 关键词：GM-CSF基因肿瘤疫苗
- 二烯丙基二硫增强胃癌细胞对5-Fu敏感性的研究被引量：2
- 2008年
- 目的探讨二烯丙基二硫(DADS)对5-Fu诱导胃癌MGC803细胞增殖与凋亡的作用及机制。方法采用四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT),测定DADS对5-Fu诱导MGC803细胞增殖活性的作用;应用流式细胞仪检测细胞凋亡率;Westernblot检测MGC803细胞Bcl-2,Bax,Mcl-1蛋白的表达情况。结果1mg/L、3mg/L的DADS分别与5-Fu联合应用,可增强5-Fu对MGC803细胞增殖抑制作用。DADS(1mg/L)能促进5-Fu诱导MGC803细胞的凋亡。DADS作用于MGC803细胞后,Bcl-2、Mcl-1蛋白表达水平下调,Bax蛋白表达水平上调呈浓度依赖方式。结论ADS能增强5-Fu对MGC803细胞增殖抑制和诱导凋亡,起化疗增敏作用,可能与其下调Bcl-2、Mcl-1蛋白表达水平,上调Bax蛋白表达水平有关。
- 周自华段晓明贺修胜王俊李志昭
- 关键词：胃癌二烯丙基二硫氟脲嘧啶化疗增敏
- HA纳米载体介导转hGM-CSF基因的HepG2疫苗诱导的抗瘤效应研究被引量：2
- 2011年
- 目的:观察HA纳米颗粒载体介导转染hGM-CSF基因的HepG2细胞疫苗体外抗肿瘤效应,为hGM-CSF基因修饰的HepG2细胞疫苗的临床应用提供依据。方法:HA纳米颗粒载体介导hGM-CSF基因转染HepG2细胞制备转GMCSF基因的HepG2细胞疫苗。密度梯度离心法分离人PBMC,体外诱导人PBMC。WST-1法测定PBMC的增殖活性及对HepG2细胞的杀伤效应,流式细胞术分析CD4+和CD8+的阳性表达率,ELISA法测定INF-γ的分泌。结果:WST-1结果显示,转基因HepG2组疫苗能诱导PBMC增殖,其增殖率优于野生型疫苗(p<0.05);其诱导的PBMC对HepG2的杀伤率高于各野生型疫苗组和各空白对照组(p<0.05)。FCM结果显示,转基因HepG2疫苗组PBMC中CD4+和CD8+阳性表达率均高于各野生型疫苗组和各空白对照组(p<0.05)。ELISA结果显示,转基因组PBMC培养上清中IFN-γ含量为1989.76±254.21pg/ml,高于各野生型疫苗组和各空白对照组(p<0.05)。结论:HA纳米颗粒载体介导转染hGM-CSF基因能增加HepG2细胞疫苗的免疫原性,转hGM-CSF基因HepG2细胞疫苗可有效诱导PBMC增殖、分化,增加INF-γ的分泌,提高其对HepG2细胞的杀伤作用。
- 曾治中段晓明程元星黄璐贺修胜
- 关键词：肿瘤疫苗粒细胞巨噬细胞集落刺激因子
- HA纳米载体转GM-CSF基因制备自体肿瘤疫苗治疗肝癌的实验研究被引量：2
- 2009年
- 目的:观察自体肿瘤疫苗对人肝癌PBL-SCID嵌合模型的治疗效果。方法:SCID小鼠20只腹腔内注射健康志愿者外周血淋巴细胞(2×10~6/mL)0.5 mL,同时背部皮下接种人肝癌HepG2细胞(1×10~7/mL)0.2mL。当皮下移植瘤体积长至100mm^3时,随机分4组:Ⅰ组,生理盐水组;Ⅱ组,^(60)Co照射的HepG2细胞组;Ⅲ组,转染GM-CSF基因的HepG2细胞组;Ⅳ组,^(60)Co照射的转染GM-CSF基因的HepG2细胞组即自体肿瘤疫苗组,每组5只。结果:自体肿瘤疫苗组6周存活率(100%)高于生理盐水组(60%)和单纯^(60)Co照射的HepG2细胞组(40%);自体肿瘤疫苗腹腔注射抑制皮下移植瘤生长,其肿瘤生长抑制率为89%;免疫组化检测发现人淋巴细胞分布于小鼠移植瘤组织中。病理切片见移植瘤细胞变性和死亡。结论:HA纳米载体转GM-CSF基因制备的自体肿瘤疫苗具有抑制人肝癌PBL-SCID嵌合模型的皮下移植瘤生长作用,并诱导有效的抗肿瘤免疫反应。
- 刘婷段晓明曹建国贺修胜童平真蒋俊豪
- 关键词：GM-CSF基因自体肿瘤疫苗免疫重建
- 反义c-myc寡核苷酸对转染FHIT基因胃癌细胞MKN28的影响
- 2008年
- 目的:探讨脂质体介导的c-myc反义寡核苷酸对导入脆性组氨酸三联体(FHIT)基因的胃癌细胞增殖及凋亡的影响.方法:通过脂质体将重组FHIT基因PRC/ CMV质粒和空载体转染到人类胃癌细胞系MKN28,并分别转染c-myc反义寡核苷酸,RT- PCR和Westen blot法检测FHIT基因的转染,Western blot法检测细胞c-myc的表达,MTT法分析细胞增殖,AO/EB染色法和流式细胞分析技术检测细胞凋亡.结果:转染FHIT基因后,MKN28细胞检测到FHIT基因片段和FHIT蛋白,而未转染的细胞及转染空载体的细胞未检测到FHIT基因片段及FHIT蛋白.转染c-myc反义寡核苷酸后.对MKN28细胞c-myc的表达有明显的抑制作用,并呈明显的时间依赖性;c-myc asODN对FHIT^+ MKN28细胞抑制率(F=177.480,P<0.05),凋亡率(F=41.500,P<0.05)和凋亡比例明显高于FHIT MKN28细胞。结论:癌基因c-myc的表达抑制联合FHIT基因的表达可以发挥较强的抗肿瘤细胞作用,为多基因治疗肿瘤提供了理论基础.
- 刘晓宇郭淦华段晓明陈建曹建国贺修胜
- 关键词：脆性组氨酸三联体反义C-MYC寡核苷酸转染逆转录聚合酶链式反应
- 外源性FHIT基因对奥曲肽诱导胃癌细胞MGC-803凋亡的影响被引量：3
- 2010年
- 目的:探讨外源性脆性组氨酸三联体(fragile histidine triad,FHIT)基因对奥曲肽(octreotide)诱导胃癌细胞凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法:采用脂质体法将带有FHIT基因的表达载体pRcCMV-FHIT和空载体pRcCMV分别转入FHIT表达缺失的人类胃癌细胞系MGC-803中。Western印迹法检测转染细胞中FHIT蛋白的表达。使用不同浓度的奥曲肽(10-10、10-9、10-8、10-7和10-6mol/L)分别处理各组细胞24、48和72h,MTT法检测分析细胞增殖情况,FCM法检测细胞凋亡。Western印迹法检测奥曲肽作用细胞前后,细胞中bcl-2和bax的表达。结果:转染FHIT基因后,胃癌细胞系MGC-803中检测到FHIT蛋白的表达。奥曲肽(10-8mol/L)处理细胞48h后,转染FHIT基因组细胞的凋亡率为(26.777±1.702)%,与转染空载体组的(13.800±0.511)%和空白细胞组的(12.634±0.479)%相比,凋亡率明显增高(F=245.789,P<0.05,)。转染FHIT基因组细胞经奥曲肽处理后bcl-2蛋白表达量减少,bax蛋白表达量增加。结论:外源性FHIT基因表达与奥曲肽可协同促进胃癌细胞MGC-803凋亡,其机制可能与bcl-2家族中的凋亡相关蛋白改变有关。
- 罗玲丽段晓明吴正茂贺修胜
- 关键词：基因转移技术奥曲肽脆性组氨酸三联体蛋白
- 外源性FHIT基因表达对长春新碱诱导人胃癌MKN-28细胞凋亡的影响被引量：2
- 2008年
- 目的:探讨外源性FHIT基因表达对长春新碱诱导的胃癌细胞凋亡的影响及其分子机制.方法:通过脂质体将重组FHIT基因PRC/CMV质粒和空载体转染到人胃癌细胞MKN-28,Western blot法检测外源性FHIT蛋白的表达;使用不同浓度的长春新碱分别处理各组细胞,MTT法分析细胞增殖,流式细胞术检测细胞的凋亡;Western blot法检测细胞Bcl-2和Bax的表达.结果:转染FHIT基因后,MKN-28细胞检测到FHIT蛋白的表达;长春新碱处理48h后,转染FHIT基因组细胞、转染空载体组细胞及未转染组细胞的凋亡率分别是30.967%±2.122%、11.033%±1.724%、10.733%±1.021%,转染FHIT基因组细胞凋亡更明显(F=142.045,P<0.05);转染FHIT基因组细胞经长春新碱处理后Bcl-2蛋白表达减少,Bax蛋白表达增加.结论:外源性FHIT基因表达可以增强长春新碱诱导的胃癌细胞凋亡,其机制可能与凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax表达有关.
- 王俊段晓明周自华贺修胜
- 关键词：胃癌脆性组氨酸三联体长春新碱
- HA纳米载体转hGM-CSF基因的HepG2疫苗联合多柔比星抗肝癌作用
- 2014年
- 目的:评价HA纳米载体转hGM-CSF基因的HepG2疫苗联合多柔比星治疗肝癌的效果。方法:建立Hu-PBL-SCID HepG2荷瘤小鼠模型,待皮下种植瘤长至100-150mm3时,随机分为5组,每组5只:对照组(PBS);化疗组(多柔比星DOX);疫苗组(60Co照射的转染GM-CSF基因的HepG2细胞);先疫苗后化疗组;先化疗后疫苗组。末次治疗后第5天处死各组小鼠,用MTT法测定脾脏CTL活性及肿瘤组织浸润淋巴细胞(TIL)杀伤活性;取肿瘤组织行HE染色及CD8+T细胞免疫组化检查。结果:化疗组的CTL活性与对照组相比无显著变化(P>0.05)。疫苗组和先疫苗后化疗组及先化疗后疫苗组的CTL活性显著强于上述两组(P<0.05),该3组两两之间也存在显著差异(P<0.05),而先化疗后疫苗组的CTL活性增强最为明显,明显高于其他两组(P<0.05)。该组的TIL活性同样强于其他各组。同其它组相比,先化疗后疫苗组的瘤体内可见大量肿瘤细胞坏死,CD8+T细胞浸润显著增加。结论:HA纳米载体转染hGM-CSF基因的HepG2疫苗的主动免疫联合多柔比星化疗具有协同抗肝癌作用,为肿瘤免疫联合化疗治疗肿瘤提供了实验依据。
- 赵祺段晓明苏小芳邓彦君杨陈贺修胜
- 关键词：肝癌肿瘤疫苗多柔比星免疫化疗
