林英 作品数:41 被引量:73 H指数:5 供职机构: 西南大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家重点基础研究发展计划 国家高技术研究发展计划 更多>> 相关领域: 生物学 农业科学 理学 医药卫生 更多>>
家蚕分子育种关键技术与素材创新 夏庆友 蒋亮 马三垣 王峰 林英 该项目建立了家蚕分子育种关键技术,对关键性状靶标基因进行了克隆和研究,并以此制备了抗BmNPV病毒和生物反应器等一批具有重要应用价值的素材。主要科学发现点:发现点1:建立了家蚕转基因RNAi技术,以及基于ZFN、TALE...关键词:关键词:家蚕 生物反应器 一个新的家蚕kunitz类型CI基因的克隆和序列分析 被引量:1 2007年 家蚕胰凝乳蛋白酶抑制剂(chymotrypsin inhibitor,CI)的多个编码基因位于多个染色体位点上,是家蚕CI具有丰富多态性的原因之一。根据Gene Bank中登录的家蚕CI基因Sci-sb的mRNA,设计引物克隆了一个家蚕kunitz类型的CI基因,命名为CI-fb。CI-fb基因有3个外显子,开放阅读框长度为255 bp,编码85个氨基酸残基,具有一个典型的kunitz结构域。CI-fb基因与其他已知的kunitz类型的CI基因相比,在基因序列和结构、蛋白序列和结构上高度相似,但在已知的CI基因家族中序列最短。RT-PCR分析表明,CI-fb基因在家蚕的脂肪体、精巢、卵巢、马氏管、气管和中肠6个组织中表达,而在丝腺、血细胞和体壁中没有表达,是一个组织特异性表达的基因。研究结果为进一步研究家蚕CI的多态性和功能提供了新的线索。 赵萍 李娟 林英 夏庆友 向仲怀关键词:家蚕 基因克隆 蜕皮激素对家蚕卵黄原蛋白基因表达的调控 被引量:2 2014年 蜕皮激素(20-hydroxy ecdysone,20E)是由前胸腺分泌的能调节节肢动物昆虫纲、甲壳纲等动物蜕皮的激素.家蚕属于完全变态昆虫,一生经历卵、幼虫、蛹、成虫四个发育时期.20E在家蚕发育过程中有不可替代的作用.本研究通过酶联免疫吸附反应(ELISA)测定家蚕变态期前后血淋巴中20E滴度,发现在卵黄原蛋白基因(Bombyx mori vitellogenin,BmVg)高量表达前的雌雄血淋巴中20E含量没有明显差异,但含量变化趋势与BmVg表达趋势相一致.用20E注射上蔟后60 h的家蚕和添食5龄家蚕,能诱导雌性和雄性脂肪体中BmVg表达和蛋白合成.调查处理后的家蚕所产卵中的卵黄磷蛋白(BmVn)含量及重量,发现蚕卵中BmVn含量及蚕卵重量都明显增加;本研究还通过脂肪体体外培养,证明了20E是直接作用于脂肪体来诱导BmVg的表达.本研究结果表明,20E是通过诱导脂肪体中BmVg的转录来增加蚕卵中BmVn积累,从而最终使得蚕卵重量也相应增加. 沈关望 林英 吕毅华 王继岩 邢润苗 夏庆友关键词:蜕皮激素 卵黄原蛋白 家蚕 基因表达 家蚕丝素重链基因突变序列及突变的方法和应用 本发明涉及家蚕丝素重链基因突变的方法,具体为将编码锌指核酸酶序列的mRNA作用于如SEQ ID NO:1所示的家蚕丝素重链基因1325~1362位为锌指核酸酶识别的靶位点,得一系列家蚕丝素重链突变基因;该突变序列和用于制... 夏庆友 马三垣 徐汉福 程道军 林英 赵萍 向仲怀家蚕(Bombyx mori)全基因组框架图 被引量:1 2008年 我们在此报告了家蚕(Bombyx mori)的基因组序列框架图,它覆盖了所有已知家蚕基因的90.9%。我们估计的基因数是18510,超过黑腹果蝇报道的13379个基因。我们将家蚕基因组与果蝇、蚊子、蜘蛛和蝴蝶等进行了比较分析,揭示了它们在基因组成上同时具有相似性和差异性。 夏庆友 周泽扬 鲁成 程道军 代方银 李斌 赵萍 查幸福 程廷才 柴春利 潘国庆 许金山 刘春 林英 钱吉凤 侯勇 吴正理 李关荣 潘敏慧 李春峰 沈以红 蓝希钳 袁联伟 李田 徐汉福 杨光伟 万永继 朱勇 余茂德 沈卫德 吴大洋 向仲怀 于军 王俊 王俊 李瑞强 石剑萍 李恒 李光远 苏建宁 王晓玲 李国庆 张增金 吴清发 李俊 张庆鹏 韦宁 徐建哲 孙海波 董乐 刘东源关键词:全基因组 框架图 家蚕 黑腹果蝇 基因组成 家蚕丝素重链基因突变序列及突变的方法和应用 本发明涉及家蚕丝素重链基因突变的方法,具体为将编码锌指核酸酶序列的mRNA作用于如SEQ.IDNO:1所示的家蚕丝素重链基因1325~1362位为锌指核酸酶识别的靶位点,得一系列家蚕丝素重链突变基因;该突变序列和用于制备... 夏庆友 马三垣 徐汉福 程道军 林英 赵萍 向仲怀文献传递 昆虫醛氧化酶研究进展 被引量:4 2010年 醛氧化酶(aldehyde oxidase,AO;EC1.2.3.1)是钼-黄素酶家族(molybdo-flavoenzyme family,MFE)中的一类蛋白,通常是由2个相同亚基形成的同源二聚体构成,每个亚基具有2个[2Fe-2S]氧化还原中心、1个黄素辅因子(FAD)和1个底物结合域,与钼-黄素酶家族的另一成员黄嘌呤氧化还原酶结构特征相似。AO可氧化醛类物质和将含氮杂环物质羟基化,在机体代谢过程中的作用至关重要。对醛氧化酶的结构、催化反应机制、系统进化等研究结果进行了综述,重点介绍了昆虫醛氧化酶的研究进展。 杨从文 杨瑜 王艳霞 费纪涛 林英TILLING技术应用于家蚕化学诱导突变检测的体系优化 被引量:2 2009年 TILLING(Targeting Induced Local Lesions In Genomes)即定向诱导基因组局部突变技术,是近年发展起来的一种高通量检测点突变的反向遗传学方法。本研究从PCR模板量及酶切体系中CELI的酶量两个方面对家蚕TILLING技术的检测体系进行了优化。结果表明:本实验在应用TILLING技术筛选家蚕突变体过程中,用于PCR扩增的家蚕基因组DNA模板最佳用量为20ng;CELI酶切的20μL反应体系中,加入的最适酶量为0.5μL(本实验室从芹菜中自提的CELI酶10倍稀释液)。本研究初步对TILLING技术应用于家蚕化学诱导突变检测体系进行了优化,为TILLING技术在家蚕功能基因组研究中的应用奠定了基础。 林英 陈冬妹 杨瑜 王艳霞 杨从文 夏庆友关键词:家蚕 TILLING 功能基因组 脊椎动物雌激素对家蚕卵黄原蛋白基因表达的调控及其与蜕皮激素受体相互作用的MST分析 被引量:1 2017年 【目的】雌激素雌二醇(E_2)在脊椎动物中通过雌激素受体(ER)调节脊椎动物的生长发育和繁殖。昆虫中并没有ER,但有研究显示某些昆虫能对E_2产生一定的应答。本研究在明确E_2能影响家蚕Bombyx mori卵黄原蛋白基因(BmVg)表达的前提下,分析其对这一基因表达的调控机制。【方法】取BmVg高量表达时的家蚕雌性幼虫(上蔟后60 h)脂肪体,用不同浓度(0.001,0.05,0.5,5和50 nmol/L)E_2处理后,通过qRT-PCR检测BmVg表达的变化,分析家蚕对E_2的应答;克隆家蚕蜕皮激素受体基因(BmEcRB1),构建原核表达载体,表达并纯化BmEcRB1蛋白后与E_2体外孵育,通过微量热泳动仪(MST)分析E_2与BmEcRB1的结合情况。【结果】不同浓度E_2均显著抑制离体培养的雌蚕脂肪体中BmVg基因的表达。MST实验证实,E_2与BmEcRB1具有一定的亲和力,解离常数(Kd)为77.8±22μmol/L。【结论】结果说明,E_2对BmVg表达的影响是通过与蜕皮激素(20E)竞争性结合BmEcRB1实现的。 王勇 王勇 吴金鑫 吴金鑫 沈关望 林英关键词:家蚕 蜕皮激素 卵黄原蛋白 家蚕丝腺特异表达的HLH转录调控因子BmHLH2及用途 一种家蚕丝腺特异表达的HLH转录调控因子BmHLH2,通过对丝腺基因的表达谱进行分析,并经过基因芯片制作及杂交、芯片数据分析等一系列生物技术克隆得到。本发明所获得的HLH型转录调控因子为家蚕丝腺特异表达的新型转录调控因子... 刘春 马三垣 夏庆友 林英 徐汉福 向仲怀文献传递