林志楷
- 作品数：4 被引量：2H指数：1
- 供职机构：福建师范大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金福建省自然科学基金卫生部科技专项基金更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程化学工程更多>>
- 花生白藜芦醇合酶基因转化单子叶植物表达载体的构建
- 2007年
- 构建了花生白藜芦醇合酶基因(RS)转化单子叶植物的表达载体,该表达载体含有ub i启动子和内含子,能启动该基因在单子叶植物中高效地表达.通过PCR反应扩增出目的片段,连接到克隆载体Pub i35s上,切下含ub i和RS约3 000 bp的片段连接到植物表达载体pCAM B IA-1 380上.经PCR和酶切检测,结果与预期相同,经测序确定插入片段读码框正确.该表达载体可用于单子叶植物高效的表达.
- 许玉芬叶冰莹陈由强王冰梅黄庆煌林志楷陈如凯
- 关键词：花生白藜芦醇合酶基因UBI单子叶植物
- pVT102U/α-bgln重组真核表达质粒的构建和鉴定被引量：1
- 2007年
- 构建重组真核表达质粒pVT102U/α-bgln使之可以在酿酒酵母中表达以获得β-葡糖苷酶,用于提高从植物中提取白藜芦醇的得率.以含有从黑曲霉中获得的编码β-葡萄糖苷酶(bgln)成熟肽的cDNA的克隆质粒pMD19T-bgln为模板,用PCR的方法扩增β-葡糖苷酶基因片段(bgln),利用真核表达载体pVT102U/α构建pVT102U/α-bgln重组质粒,PCR结果显示扩增片段约2.6 kb,与预期相同.用酶切电泳验证重组结果的正确性,重组质粒酶切后显示其大小约10 kb,大小及酶切图谱与预期相同.测序检测质粒重组后序列情况,经测序发现插入片段两端序列无改变,且读码框正确.pVT102U/α-bgln质粒构建成功.
- 林志楷叶冰莹潘海芳陈由强陈如凯
- 关键词：Β-葡萄糖苷酶真核表达
- 黑曲霉β-葡萄糖苷酶基因和花生白藜芦醇合酶基因的真核表达
- B-葡萄糖苷酶(B—glucosidase，EC 3.2.1.21，简称bgln)在纤维素的酶水解过程中为最后一步关键酶，不仅能够水解白藜芦醇苷为白藜芦醇，还能够作用于细胞壁碎片等其它细胞组成，从而生成更多的白藜芦醇。
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- 林志楷
- 关键词：Β-葡萄糖苷酶白藜芦醇合酶基因重组
- 文献传递
- 银松素合酶基因地高辛标记RNA探针的合成被引量：1
- 2006年
- 目的:体外转录合成银松素合酶(PS)基因地高辛标记反义RNA探针。方法:通过双酶切把PScDNA全长序列接到pBlueskriptⅡKS(+)的多克隆位点上;同时,经由NCBI比对确定PScDNA的特异序列,设计含有SalⅠ和XbaⅠ这2个酶切位点的上、下游引物,用PCR法扩增含有该位点的目的片段,并连接到pBlueskriptⅡKS(+)的多克隆位点上;最后利用pBlueskriptⅡKS(+)上的启动子T7,用T7RNA聚合酶在体外转录合成地高辛标记PS全长及特异序列的反义RNA探针。结果:通过对构建探针的单、双酶切,PCR及电泳鉴定,表明成功合成了PS基因地高辛标记的全长及特异序列的反义RNA探针。结论:RNA探针的合成为后续马尾松PS基因表达的RNA原位杂交研究打下了基础。
- 郭晋隆叶冰莹黄庆煌黄国强许玉芬林志楷陈由强陈如凯
- 关键词：探针马尾松
