林伟基
- 作品数：30 被引量：55H指数：5
- 供职机构：香港中文大学更多>>
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- p38 MAPK在嗜酸性粒细胞活化支气管上皮细胞释放MCP-1中的作用被引量：5
- 2006年
- 目的:探讨支气管上皮细胞与嗜酸性粒细胞联合培养过程中炎性介质的释放及其机制.方法:应用流式细胞微珠实验(CBA)方法定量比较嗜酸性粒细胞、支气管上皮细胞及其联合培养上清液中单核细胞趋化蛋白(MCP)-1的释放以及p38MAPK抑制剂SB203580干预的影响;用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)分析联合培养过程中嗜酸性粒细胞对支气管上皮细胞MCP-1基因表达的活化及SB203580对MCP-1表达的抑制作用.结果:经嗜酸性粒细胞活化后,支气管上皮细胞中MCP-1基因表达明显上调;嗜酸性粒细胞和支气管上皮细胞联合培养上清液中MCP-1蛋白质释放显著增加[(1266±127)ng/Lvs(134±25)ng/L,P<0.001];多聚甲醛固定后的嗜酸性粒细胞不能释放MCP-1,但其在与支气管上皮细胞联合培养过程中仍可增加支气管上皮细胞释放MCP-1[(773±48)ng/Lvs(107±15)ng/L,P<0.001];p38MAPK抑制剂SB203580可有效抑制嗜酸性粒细胞活化支气管上皮细胞表达MCP-1基因,显著降低正常嗜酸性粒细胞和多聚甲醛固定嗜酸性粒细胞与支气管上皮细胞联合培养过程中MCP-1的释放[(1335±115)ng/Lvs(481±42)ng/L和(868±89)ng/Lvs(239±26)ng/L,P<0.001].结论:嗜酸性粒细胞可通过p38MAPK信号传导通路活化支气管上皮细胞表达MCP-1,调控过敏性气道炎症反应.
- 王成彬童红莉田亚平汪德清黄振国叶伟基李洛谊林伟基
- 关键词：支气管嗜酸细胞单核细胞化学吸引蛋白质1P38
- 屋尘螨1类变应原促进外周血嗜酸性粒细胞释放细胞因子的探讨被引量：1
- 2007年
- 目的探讨屋尘螨1类变应原(DerP1)对嗜酸性粒细胞(E)释放炎性细胞因子IL-1β、IL-6、IL-8、IL-10和TNF-α的影响。方法用CD16抗体磁珠法从新鲜人外周血分离E;5×105/mlE与5μg/mlDerP1共培养12h;用流式细胞小球微阵列(cytometricbeadarray,CBA)法定量细胞培养上清液中细胞因子。结果外周血E单独培养过程中仅有极少量IL-1β、IL-6、IL-8、IL-10和TNF-α释放,但与5μg/mlDerP1共育时,培养上清液中上述5种细胞因子浓度显著增加(P均<0.001),IL-10增加约5倍,其他4种细胞因子均增加约100倍。结论DerP1对E释放炎性细胞因子具有很强的促进作用。
- 王成彬黄振国李洛谊叶伟基林伟基丛玉隆
- 关键词：屋尘螨嗜酸性粒细胞细胞因子
- 重金属中毒：临床与实验室研究被引量：2
- 2001年
- 张志强林伟基等
- 关键词：重金属中毒重金属铅镉汞砷
- 支气管上皮细胞和嗜酸性粒细胞联合培养对IL-8释放的影响
- 目的探讨支气管上皮细胞和嗜酸性粒细胞联合培养对细胞趋化因子白细胞介素（IL）-8分泌的影响。方法人支气管上皮细胞系BEAS-2B细胞与人外周血嗜酸性粒细胞联合培养;应用流式细胞微珠实验（CBA）方法定量细胞培养上清液中细...
- 王成彬黄振国叶伟基鲍依希田亚平林伟基
- 文献传递
- 支气管哮喘患者白细胞介素-4近侧启动子区克隆和序列分析
- 2001年
- 目的 探讨哮喘患者白细胞介素 4(IL 4)过度表达的可能调控机制。方法 选取 4例有明显家族史的过敏性哮喘患儿和 1例正常儿童 ,采用聚合酶链反应 (PCR)扩增IL 4近侧启动子片段 ,PCR产物经XbaI、HindⅢ限制性内切酶进行双酶切后 ,回收酶切片段 ,再与经过相同双酶切的载体Jx2相连接 ,制备重组质粒。然后经转化、筛选、酶切鉴定得到重组质粒pIL 4 Jx2 ,最后采用双脱氧终止法对重组质粒进行序列测定。结果 ①正常儿童IL 4近侧启动子序列与基因库序列相同。② 1例患儿 - 2 2 9位C被A所替代 ,该变异恰好位于正性调节元件 I之内。结论 过敏性哮喘患者IL 4近侧启动子区DNA片段被成功克隆 ,并发现 1例患者IL 4调控元件内一未曾报道过的变异位点 ,这有助于对哮喘者IL 4基因异常表达调控机制的研究。
- 周玉峰吴健民崔天盆林伟基
- 关键词：哮喘白细胞介素-4启动子分子克隆
- 哮喘患儿IL-4近侧启动子区克隆和多态性分析
- 2002年
- 目的 对哮喘症患儿白细胞介素 4 (IL 4 )近侧启动子区进行克隆并分析其DNA序列的多态性。方法 对 4 0名有明显家族及过敏史的哮喘患儿和 10名正常儿童 ,以多聚酶链式反应(PCR)结合单链构象多态性 (SSCP )扩增、筛选IL 4近侧启动子片段 ,进一步构建正常对照和异常条带PCR产物的重组质粒pIL 4 Jx2 ,并用双脱氧链终止法对重组质粒进行序列测定。结果 在对 4 0名患儿SSCP分析中发现了 7组异常条带。DNA测序结果显示有 4处变异位点位于已知的调控元件之内或毗邻位点 ,1名病人 2 2 9位C被A所替代 ,该变异恰好位于IL 4正性调节元件 Ⅰ (PRE Ⅰ )之内 ;2名病人负性调节元件 Ⅱ (NRE Ⅱ )毗邻C被T所替代 ,TATA框前增加 1个G ;1名病人STAT 6元件附近缺少了ATTTT五碱基核苷酸。结论 过敏性哮喘患儿IL 4近侧启动子区DNA序列存在多态性 ,这可能与IL
- 周玉峰李成荣付劲蓉吴健民林伟基
- 关键词：白细胞介素4分子克隆
- MG-132活化人支气管上皮细胞表达IL-6
- 2006年
- 目的探讨核因子(NF-κB)抑制剂MG-132对支气管上皮细胞释放细胞因子白细胞介素(IL)-6的影响。方法人支气管上皮细胞系BEAS-2B细胞与MG-132(10μmol·L-1)共同培养12h,细胞核中NF-κB活性和细胞培养上清液中IL-6浓度用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法定量,BEAS-2B细胞总IL-6mRNA表达,应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)分析。结果BEAS-2B细胞与MG-132共同培养过程中,BEAS-2B细胞IL-6mRNA上调,细胞培养上清液中IL-6释放量显著增加,而且IL-6增加量与细胞培养液中MG-132浓度呈正相关,但与NF-κB活性无关。结论MG-132可诱导BEAS-2B细胞释放IL-6,但不是通过NF-κB活化途径。
- 王成彬谷锋田亚平黄振国叶伟基李洛谊林伟基鲍依稀
- 关键词：支气管上皮细胞NF-ΚBMG-132IL-6
- 细胞固定技术在两种细胞共同培养研究中的应用被引量：3
- 2006年
- 目的探讨细胞固定对鉴别支气管上皮细胞和嗜酸粒细胞两种细胞共同培养过程中细胞代谢产物来源的作用及其机制。方法用1%多聚甲醛固定嗜酸粒细胞和支气管上皮细胞系BEAS-2B细胞;通过锥虫蓝、伊红细胞染色,观察多聚甲醛固定对细胞形态、结构、活力和与正常细胞接触培养过程中与正常细胞黏附能力的影响;用酶联免疫吸附测定(ELISA)方法定量分析固定细胞与正常细胞共同培养过程中对白细胞介素(IL)-6释放的影响。结果多聚甲醛固定后支气管上皮细胞和嗜酸粒细胞均变为死亡细胞,但其形态、结构及嗜酸粒细胞中颗粒着色无明显变化;多聚甲醛固定的BEAS-2B细胞与正常及固定的嗜酸粒细胞接触培养仅有极少量细胞发生黏附,而多聚甲醛固定的嗜酸粒细胞与正常BEAS-2B细胞接触培养则有较大数量的细胞发生黏附,但黏附细胞数量少于两种正常细胞的共同培养;固定后的嗜酸粒细胞与正常BEAS-2B细胞共同培养过程中可诱导BEAS-2B细胞释放IL-6。但与嗜酸粒细胞单独培养比较,固定后BEAS-2B细胞与正常嗜酸粒细胞共同培养对细胞培养上清液中IL-6浓度无明显影响。结论经多聚甲醛固定后,细胞死亡并丧失其代谢功能,但其表面仍保留可诱导其他细胞活化的结构成分,此技术可用于两种或多种细胞共同培养过程中代谢产物来源的鉴别。
- 王成彬黄振国叶伟基李洛谊鲍依稀田亚平林伟基
- 关键词：上皮细胞嗜酸细胞白细胞介素6酶联免疫吸附测定
- 香港儿童膳食及血脂研究被引量：6
- 1994年
- 对香港１２５名７岁儿童进行膳食调查和体格量度研究。结果表明，肥胖发生率为５０％，平均血胆固醇含量为４．６±０．８ｍｍｏｌ／Ｌ。膳食脂肪、肥胖状况分别与血脂水平有明显相关；膳食中多不饱和与饱和脂肪比例较低者，其血胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇含量较高；肥胖儿童的甘油三酯和极低密度脂蛋白胆固醇含量较高，而高密度脂蛋白胆固醇含量则较低。提示在社会富裕起来的同时必须注意生活与饮食健康教育，警惕各种富裕疾病包括冠心病、糖尿病等发生。
- 梁淑芳吴文英林伟基李德强
- 关键词：饮食血脂膳食儿童
- 嗜酸性粒细胞对支气管上皮细胞中p38 MAPK信号转导通路的活化作用观察
- 2008年
- 目的探讨嗜酸性粒细胞在与支气管上皮细胞接触共培养过程中对后者炎性介质释放的影响。方法用CD16抗体磁珠法分离嗜酸性粒细胞,免疫印迹(Western blotting)、酶联免疫吸附试验(ELISA)检测支气管上皮细胞中磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)、激活转录因子(ATF)-2蛋白含量,微珠免疫沉淀结合免疫印迹法检测p38MAPK活性。结果经与嗜酸性粒细胞共同培养活化后,支气管上皮细胞中磷酸化p38MAPK蛋白含量及其活性均显著上升,p38MAPK信号转导通路链中下级底物蛋白质ATF-2(细胞内调控某些基因表达的转录因子)量也显著上升;多聚甲醛固定的嗜酸性粒细胞同样可以活化支气管上皮细胞,增加其细胞内p38MAPK蛋白质磷酸化。p38MAPK酶选择性抑制剂SB203580可有效抑制p38MAPK诱导其底物ATF-2磷酸化。结论嗜酸性粒细胞与支气管上皮细胞接触共培养过程中对炎性介质表达和释放的调控作用可能是通过活化支气管上皮细胞内p38MAPK信号传导通路未实现的。
- 王成彬黄振国叶伟基林伟基丛玉隆
- 关键词：P38丝裂原活化蛋白激酶嗜酸细胞
