杨友云
- 作品数：5 被引量：1H指数：1
- 供职机构：中南大学湘雅医学院分子生物学研究中心更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 人类β—珠蛋白基因5’—1559bp上游转录调控区的重组及表达
- 2001年
- 目的 探寻人类β－珠蛋白基因5′－帽位上游新转录调控元件。方法：利用重组DNA技术，构建及克隆3人含有人类β－基因不同5'－帽位上游片段的荧光素酶报告基因重组载体（pGL2-promoter/SB-β^RHB734、pGL2-promoter/SB-β^R AB573、pGL2-promoter/SB-β^RHfB263），分别将其导入Hela细胞中，采用β-半乳糖苷酶报告β-半乳糖苷酶报告基因为转移效率内对照，空白的荧光素酶基因载体为基础对照，进行荧光素酶活性比较。结果 3个基因片段载体构建符合设计，其相对抑制活性分别为59．74％、80．97％、79．42％。结论 初步提示人类β－基因5'帽位上游－2132～－1822bp片段及－1822～15559bp片段内可能存在起负调控作用的顺式作用元件（抑制子），而－2277bp～-2132bp片段间未检出报制子或增强子活性存在。 此初步结果尚需进一步研究证实和阐明其结构与功能的关系。
- 何淑雅杨友云等
- 关键词：珠蛋白基因报告基因抑制子
- 人类β-珠蛋白基因5’-1559bp上游转录调控区的重组及表达
- 2001年
- 目的 探寻人类 β -珠蛋白基因 5′ -帽位上游新转录调控元件 ;方法 利用重组DNA技术 ,构建及克隆 3个含有人类 β -基因不同 5’帽位上游片段的荧光素酶报告基因重组载体 (pGL2 -promoter/SB -βRHB734、pGL2 -promoter/SB - βRAB573、pGL2 -promoter/SB - βRHfB2 63) ,分别将其导入Hela细胞中 ,采用 β -半乳糖苷酶报告基因为转移效率内对照 ,空白的荧光素酶基因载体为基础对照 ,进行荧光素酶活性比较。结果 3个基因片段载体构建符合设计 ,其相对抑制活性分别为 59.74 %、80 .97%、79.4 2 % ;结论 初步提示人类 β -基因 5’帽位上游 - 2 132～ - 182 2bp片段及 - 182 2～ - 15559bp片段内可能存在有起负调控作用的顺式作用元件 (抑制子 ) ,而 - 2 2 77bp～ - 2 132bp片段间未检出抑制子或增强子活性存在。此初步结果尚需进一步研究证实和阐明其结构与功能的关系。
- 何淑雅杨友云朱定尔
- 关键词：珠蛋白基因报告基因抑制子
- β-珠蛋白基因的“个体”转录调控元件与功能基因组“体系”的可能关系
- 人类β珠蛋白基因簇的表达调控,其复杂水平为真核基因中少见.可望成为真核基因及其基因组的表达调控研究的典型.我们曾用RT-PCR、Northern印迹杂交、竞争性凝胶滞留分析(cGRA)、虫荧光素酶(Luc)报告基因载体表...
- 朱定尔聂怡玲李厚敏杨友云田菁燕杨宇
- 文献传递
- β珠蛋白基因5′远端新沉默子克隆及定点诱变被引量：1
- 2000年
- 通过凝胶滞留分析和荧光素酶报告基因检测系统 ,鉴定出人类 β珠蛋白基因 5′旁侧远端帽位上游 - 2 1 32～ - 1 82 2 bp间存在一个活性沉默子片段 (31 0 bp) ,将其亚克隆至p UC- T载体中 ,然后采用人工设计的突变引物 ,将经 DNA足纹分析确定的两个结合位点的核心基序 (β珠蛋白基因帽位上游 - 2 0 1 7～ - 2 0 1 1 bp间的“CTTCCGC”序列和 - 2 0 0 6～ -1 997bp间的“CACTTTATTT”序列 )分别定点诱变为“CTTAAGC”和“CACTTAAGTT”两个突变序列 ,从而构建成两种突变型 31 0 bp片段 ,可用于对活性沉默子位点的结构与功能及β珠蛋白基因表达调控机制的深入研究 .
- 杨宇李厚敏杨友云朱定尔
- 关键词：沉默子定点诱变
