李晓东
- 作品数：8 被引量：9H指数：2
- 供职机构：新疆农业科学院更多>>
- 发文基金：新疆维吾尔自治区高技术研究发展计划项目国家自然科学基金新疆维吾尔自治区自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学文化科学更多>>
- 海岛棉与陆地棉不同纤维发育时期苯丙烷代谢相关基因表达差异比较
- 2012年
- 【目的】比较研究在海岛棉与陆地棉纤维发育过程中苯丙烷代谢相关基因(PAL和4CL)表达模式的差异。【方法】利用荧光定量PCR,检测不同品种来源纤维在不同发育时期目的基因表达量。【结果】发现PAL1及4CL1基因的表达量随纤维发育天数的增加而增加,在陆地棉军棉1号中,基因表达量在15 DPA达到最高,而在海岛棉新海20号中PAL1及4CL1基因的表达高峰期则为20 DPA。【结论】发现PAL1基因与4CL1基因的表达模式在海岛棉与陆地棉纤维发育过程中出现差异,海岛棉中两个基因的表达高峰期均晚于陆地棉,为逐步揭示海岛棉和陆地棉纤维品质差异的分子机理奠定了一定实验基础。
- 吕淑萍李波李晓东杨洋范玲
- 关键词：陆地棉海岛棉纤维品质基因表达
- 棉花GhCOMT1基因原核表达载体构建及蛋白纯化和Western鉴定被引量：6
- 2012年
- 为进一步研究GhCOMT1基因的功能,构建了原核表达载体pET-28a-GhCOMT1,酶切鉴定并测序后转化到大肠杆菌BL21(DE3)中,在0.2mmol/L IPTG浓度条件下分别进行不同温度梯度诱导,用蛋白标记亲和层析柱(His TrapTM HP)对重组蛋白进行纯化,并用SDS-PAGE和Western blotting方法鉴定表达产物。结果表明:16℃诱导12h、30℃诱导3h和37℃诱导3h后融合蛋白均以包涵体的形式表达,其中16℃诱导12h的蛋白表达量最大;SDS-PAGE检测目的蛋白相对分子量约为39.748kD;Western blotting分析表明,目的蛋白能与His多克隆抗体起特异性反应。
- 李波倪志勇李晓东范玲
- 关键词：原核表达蛋白纯化WESTERNBLOTTING
- 棉花纤维中苯丙烷类结构单体的检测方法
- 棉花纤维中苯丙烷类结构单体的检测方法，先采用巯基乙酸法提取出棉花纤维中的苯丙烷类化合物，再利用还原降解反应(DFRC)法分析巯基乙酸法提取的棉花纤维苯丙烷类化合物。该方法解决了棉花纤维中苯丙烷类化合物由于含量低其结构单体...
- 胡文冉范玲李晓东王玉晶孙涛乔坤云
- 文献传递
- 外源松柏醛和芥子醛影响棉纤维苯丙烷代谢途径基因表达及生长被引量：2
- 2013年
- 利用棉花胚珠离体培养和半定量RT-PCR及数字化图像处理技术,通过体外饲喂不同浓度苯丙烷代谢途径中间代谢物松柏醛(CA)和芥子醛(SA)来研究在棉花纤维发育过程中苯丙烷代谢关键中间产物对棉花纤维发育的影响。结果表明,在离体培养棉纤维中,不同浓度(100μmol.L-1、200μmol.L-1)外源松柏醛(CA)和芥子醛(SA)不但诱导了以CA和SA为底物的基因产物表达量增加,也诱导了苯丙烷代谢途径上游基因产物的表达量增加,且高浓度(200μmol.L-1)诱导的表达量高于低浓度(100μmol.L-1),芥子醛高于松柏醛;对GhEx-pansin1的表达和纤维生长均有抑制作用,且高浓度(200μmol.L-1)抑制作用更加明显,芥子醛抑制作用大于松柏醛。
- 李晓东杨洋李波杨家平范玲
- 关键词：基因表达
- 棉花纤维中苯丙烷类结构单体的检测方法
- 棉花纤维中苯丙烷类结构单体的检测方法，先采用巯基乙酸法提取出棉花纤维中的苯丙烷类化合物，再利用还原降解反应(DFRC)法分析巯基乙酸法提取的棉花纤维苯丙烷类化合物。该方法解决了棉花纤维中苯丙烷类化合物由于含量低其结构单体...
- 胡文冉范玲李晓东王玉晶周小云孙涛乔坤云
- 文献传递
- 棉花转基因“喷花法”应用条件优化的研究被引量：1
- 2013年
- 针对目前众多的棉花转基因方法存在转化过程复杂、成本高、效率较低等问题，实验对转基因方法一“喷花法”进行优化，明确了在棉花育种科研中应用条件，达到快速、高效转化外源基因的目的。实验选用了5个陆地棉品种（系）和2个海岛棉品种为转化受体材料，转化了2个外源基因-抗虫（Bt＋CpTI）和增强纤维品质基因（NPTII-GhCAD6），并对转化时等渗液各成分的比例、转化的时间段、温度及湿度条件等因素对转化率的影响进行研究。结果表明，转化效率最高时等渗液各成分的含量：陆地棉为1／2MS＋10％蔗糖＋0．5g／LMES＋0．01mg／L6-BA＋200μl／／L表面活性剂，pH=6菌株浓度OD600=0．5；海岛棉为1／2MS＋15％蔗糖＋0．5g／LMES＋0．01mg／L6-BA＋200μl／L表面活性剂，pH=6菌株浓度OD600=0．5；转化效率最高时转化的时间段为11：00—13130，相应的温度为22～29℃、湿度为70％-85％；转化后的哟代受体材料，首先在田间进行抗生素检测，然后在获得的阳性植株中，转抗虫基因材料用金标BT-CryIAb／Ac试纸条定性检测，转纤维品质基因材料做PCR电泳检测，经检测最终获得了一批转基因阳性植株。最终建立一种应用在农业育种科研中大批量、高效快速、简易实用的转基因方法。
- 聂新辉尤春源雷江荣杨洋李波李晓东吕军冯国礼孔杰张大伟
- 关键词：棉花转基因
- 一种甜菜用流体施肥装置及使用方法
- 本发明公开一种甜菜用流体施肥装置及使用方法，包括调节支架组件，其特征在于：所述调节支架组件包括对称的电动推杆，对称的所述电动推杆固定连接，对称的所述电动推杆的推杆端分别固定连接竖板，对称的所述竖板分别固定连接长条板；对称...
- 刘华君董心久白晓山阿不都卡地尔·库尔班沙红李思忠余道乾陈友强张济鹏岳海霞李晓东
- 棉花GhCOMT1基因的正义、反义与RNAi干扰载体的构建及转化
- 2013年
- 【目的】咖啡酸-O-甲基转移酶(caffeic acid O-methyltransferase,COMT)是苯丙烷代谢途径中的一个关键酶催化,通过转基因技术深入研究GhCOMT1基因在棉纤维发育和木质素代谢途径中的作用。【方法】采用由棉纤维组织特异性启动子E6驱动的GhCOMT1基因构建正义、反义表达载体GhCOMT1基因的植物表达载体和RNAi干扰载体并转化棉花。【结果】目的基因成功整合至表达质粒中并且获得转基因后代。【结论】构建了由棉纤维组织特异性启动子E6驱动的GhCOMT1基因正义、反义表达载体;同时克隆了GhCOMT1基因的一段450 bp高度保守的NBD区序列,构建了GhCOMT1基因的RNAi干扰载体,并将上述载体转入农杆菌菌株LBA4404并成功转化棉花。
- 李晓东李波倪志勇张桦范玲
- 关键词：棉花RNAI
