目的探讨CLCA4对结直肠癌细胞增殖、侵袭、迁移及上皮-间质转化的影响及可能机制。方法收集100例患者的结直肠癌组织及癌旁正常组织。培养SW620细胞,根据转染质粒不同分为Vector组(转染pcDNA3.1)、CLCA4组(转染pcDNA3.1-CLCA4)、sh-NC组(转染sh-NC)、sh-CLCA4组(转染sh-CLCA4)及Control组(无处理)。sh-NC组及sh-CLCA4组细胞用GSK2126458分处理并定义为sh-NC+GSK2126458组、sh-CLCA4+GSK2126458组。分析CLCA4与结直肠癌临床病理特征、预后的关系,CCK-8检测细胞增殖能力,Tanswell实验检测细胞侵袭能力,划痕实验检测细胞迁移能力,qRT-PCR检测细胞、组织中CLCA4 mRNA表达水平,Western blotting检测细胞或组织中CLCA4、E-cadherin、N-cadherin、Vimentin、PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT、mTOR、p-mTOR蛋白表达水平。结果结直肠癌组织CLCA4 mRNA、蛋白表达水平低于癌旁正常组织(P<0.05)。CLCA4表达水平与临床分期、淋巴结转移、脉管侵犯、神经侵犯及血清癌胚抗原水平有关(P<0.05)。CLCA4高表达组患者总体生存率高于CLCA4低表达组(P=0.006)。CLCA4组细胞48 h、72 h OD值、侵袭细胞数,Vimentin、N-cadherin表达水平及p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT、p-mTOR/mTOR值低于Vector组,迁移率及CLCA4、E-cadherin表达水平高于Vector组(P<0.05);sh-CLCA4组细胞48 h、72 h OD值、侵袭细胞数,Vimentin、N-cadherin表达水平及p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT、p-mTOR/mTOR值高于sh-NC组,迁移率及CLCA4、E-cadherin表达水平低于sh-NC组(P<0.05);sh-NC+GSK2126458组细胞48 h、72 h OD值、侵袭细胞数低于sh-NC组,迁移率高于sh-NC组(P<0.05),sh-CLCA4+GSK2126458组细胞48 h、72 h OD值、侵袭细胞数低于sh-CLCA4组,迁移率高于sh-CLCA4组(P<0.05)。结论CLCA4在结直肠癌组织中低表达,与肿瘤临床病理特征、预后有关,CLCA4通过PI3K/AKT/mTOR信号通路抑制结直肠癌细胞的增殖、侵袭、迁移及上皮-间质转化。
目的:探讨膜联蛋白A6(AnnexinA6,ANXA6)基因单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)及其表达水平与慢性牙周炎的相关性。方法:选择2022年1月~2022年12月于新疆医科大学第二附属医院口腔科就诊的142例慢性牙周炎患者作为研究对象,并选择同期于我院进行健康体检的150名牙周健康者作为健康对照组。对ANXA6基因的2个SNP位点rs11960458(C>T)、rs4958897(C>T)进行基因分型。采用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)对ANXA6基因mRNA相对表达水平进行测定。结果:慢性牙周炎患者和健康对照组的性别、年龄、BMI、吸烟史和饮酒史比较差异均无统计学意义(P>0.05)。对于rs11960458位点,慢性牙周炎组和健康对照组CC、CT和TT基因型分布比较有统计学差异(P=0.002);两组相加模型和显性模型比较有统计学意义(P<0.05)。对于rs4958897位点,两组CC、CT和TT基因型分布和遗传模型分布均无统计学差异(P>0.05)。两组rs11960458位点C、T基因等位基因频率比较差异有统计学意义(P=0.005),而rs4958897位点C、T基因等位基因频率比较差异无统计学意义(P=0.089)。慢性牙周炎患者ANXA6基因mRNA相对表达水平显著高于健康对照组(P<0.05)。应用ANXA6基因mRNA相对表达水平区分慢性牙周炎患者和健康对照人群曲线下面积(area under the curve,AUC)为0.876(95%CI 0.835~0.916,P<0.001),灵敏度和特异度分别为72.5%和89.3%。rs11960458位点CT、TT基因型的患者ANXA6基因mRNA相对表达水平均显著高于CC基因型(P<0.05),但CT、TT基因型ANXA6基因mRNA相对表达水平比较无统计学差异(P>0.05)。结论:ANXA6基因rs11960458变异及其基因表达水平与慢性牙周炎的发生有关。
