李三红
- 作品数：3 被引量：7H指数：2
- 供职机构：蚌埠医学院第二附属医院更多>>
- 发文基金：安徽省高校省级自然科学研究项目安徽高等学校省级自然科学研究项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 共干扰Hpa、EP-CAM对人胆囊癌细胞株裸鼠模型的实验研究被引量：3
- 2012年
- 目的:研究miRNA转染乙酰肝素酶(heparanase,Hpa)和上皮细胞黏附分子(epithelial cell adhesion molecule,EP-CAM)对胆囊癌裸鼠移植瘤的体内抑瘤作用。方法:通过脂质体转染法将含Hpa、EP-CAM的真核表达质粒分别及共同转染至人胆囊癌细胞株GBC-SD,MTT法检测体外细胞增殖情况,筛选出干扰稳定表达细胞株后,采用裸鼠腋外侧皮下注射方法进行裸鼠体内成瘤实验,连续40 d观察裸鼠体表胆囊癌移植瘤生长情况。结果:单独及共同干扰组细胞生长受到明显抑制,而共同干扰组作用尤为突出。裸鼠体内实验提示Hpa miRNA组、EP-CAM miRNA组、共干扰组抑瘤率分别为69.06%、64.94%、85.67%。Hpa、EP-CAM基因蛋白在干扰组表达均明显低于正常胆囊癌细胞接种组(P<0.01)。结论:采用RNAi法沉默Hpa和EP-CAM在胆囊癌细胞中的表达可有效抑制其在体内外的生长,并且以共同干扰效果尤为突出。
- 刘铮刘会春李三红
- 关键词：胆囊肿瘤乙酰肝素酶上皮细胞黏附分子裸鼠
- miRNA干扰乙酰肝素酶基因对胆囊癌细胞侵袭、迁移的影响被引量：2
- 2011年
- 目的观察miRNA干扰沉默乙酰肝素酶（HPA）基因表达对人胆囊癌GBC—SD细胞侵袭和迁移的影响。方法根据人HPA基因序列设计并合成4对miRNA寡聚单链DNA，同时合成1对阴性对照质粒表达载体。采用阳离子脂质体转染法将以上质粒转染人人胆囊癌GBC—SD细胞，采用逆转录一聚合酶链反应（RT—PCR）检测转染前后HPAmRNA表达的变化，选出对HPA沉默效果最佳的质粒，使用抗生素Blasticidin2ms／L加压筛选阳性克隆并扩增培养传代，获得稳定表达细胞株，供下一步实验。通过划痕损伤实验和Transwell小室细胞侵袭、迁移实验检测干扰沉默HPA表达后对人胆囊癌GBC．SD细胞侵袭和迁移能力的影响。结果质粒pcDNA6．2-GW／EmGFP—miR-HPA-2沉默人胆囊癌GBC—SD细胞HPAmRNA表达的效果最好。pcDNA6．2-GW／EmGFP-miR-HPA-2组中穿过Transwell小室基质的胆囊癌GBC—SD细胞数明显低于阴性对照组（P〈0．05）和空白对照组。胆囊癌GBC—SD细胞的迁移距离在0、12、24hpcDNA6．2-GW／EmGFP—miR—HPA-2组明显低于阴性对照组和空白对照组（P〈0．05）。结论miRNA干扰沉默人胆囊癌GBC—SD细胞中HPAmRNA表达，从而抑制人胆囊癌GBC-SD细胞的侵袭和迁移能力。
- 李三红刘会春周少波
- 关键词：胆囊癌基因沉默乙酰肝素酶肿瘤侵袭
- RNA干扰Heparanase基因表达对胆囊癌侵袭性影响的体外研究被引量：2
- 2011年
- 目的:利用RNA干扰技术沉默人胆囊癌GBC-SD细胞中乙酰肝素酶(heparanase,HPA)基因的表达,探讨抑制HPA基因后对GBC-SD细胞侵袭性的影响。方法:构建靶向人HPA基因miRNA重组质粒,采用脂质体转染法将质粒转染入人胆囊癌GBC-SD细胞,RT-PCR检测转染前后HPA mRNA表达情况,选出对HPA基因沉默效果最佳的质粒。通过划痕损伤试验和Transwell侵袭试验检测干扰沉默HPA表达后对人胆囊癌GBC-SD细胞侵袭性的影响。结果:质粒pcDNA6.2-GW/EmGFP-miR-HPA-2沉默人胆囊癌GBC-SD细胞HPA mRNA表达的效果最好。划痕损伤试验中胆囊癌GBC-SD细胞的迁移距离在12 h、24 h pcDNA6.2-GW/EmGFP-miR-HPA-2组均低于阴性对照组和空白组(P<0.05～P<0.01)。pcDNA6.2-GW/EmGFP-miR-HPA-2组中穿过Transwell小室基质的胆囊癌GBC-SD细胞数均明显低于阴性对照组和空白组(P<0.01)。结论:靶向人HPA基因miRNA重组质粒能有效抑制HPA基因的表达,抑制人胆囊癌GBC-SD细胞的侵袭能力。
- 李三红刘会春周少波金浩
- 关键词：胆囊肿瘤RNA干扰乙酰肝素酶肿瘤侵袭
