曹颉
- 作品数：8 被引量：17H指数：2
- 供职机构：中国科学院发育生物学研究所遗传与发育生物学研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划广东省农科院院长基金广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- SMT非同位素标记探针的制备
- 1992年
- 本试验以一种核苷酸类似物Digoxigenin-11-dUTP(地高辛与dUTP的联接结构,地高辛只天然存在于毛地黄中,是理想的半抗原),用随机引物法掺入绵羊MT启动子(SMT),检测目的基因时再加入抗体一酶连接物(Anti-digoxigeninalkalinephosphatase)与地高辛发生免疫反应。
- 魏平华王建忠邱伦和彭国良陈清轩曹颉宋德秀
- 关键词：SMT非同位素探针
- 转猪生长激素基因家兔的研究
- 1992年
- 微注射法向家兔受精卵原核注入重组猪生长激素基因(pSMTPGH/BglI片段)。449枚注射卵经移植后共成胎和产仔56只。采集其中50只仔兔耳组织(约1克)提取总体DNA,用经Djgoxigenin-11-dUTP标记的3-5KbSMT-PGH探针对总体DNA斑点杂交,结果表明有15只仔兔为检测阳性。对上述阳性兔Southern印迹杂交进一步检测表明,有7只仔兔整合了导入的猪生长激素基因。出生仔兔中外源基因整合率为14％(7/50)。
- 魏平华王建忠邱伦和陈清轩曹颉宋德秀
- 关键词：猪生长激素基因
- 兔出血症病毒信使RNA的分离纯化及其生物活性的鉴定被引量：1
- 1995年
- 用液相免疫沉淀法从感染兔出血症病毒（ＲａｂｂｌｔＨａｅｍｏｒｒｈａｇｉｃＤｉｓｅａｓｅＶｉｒｕｓ，ＲＨＤＶ）８小时后的兔肝组织的多聚核糖体中，分离出ＲＨＤＶ特异性的多聚核糖体，并由此获得全核酸，经Ｏｌｉｇｏ（ｄＴ）－ｃｅｌｌｕｌｏｓｅ亲和层析，得到３．４Ａ＿（２６０）的ＲＨＤＶｐｏｌｙ（Ａ）￣＋ＲＮＡ占全核酸的３．５％。此Ｐｏｌｙ（Ａ）￣＋ＲＮＡ经甲醛变性琼脂糖电泳，得到６条单一的带，其大小分别为０．９５、１．２２、１．８２、２．４０、３．６３和５．０１ｋｂ。在兔网织红细胞体外翻译体系中，此Ｐｏｌｙ（Ａ）￣＋ＲＮＡ能促进￣３Ｈ－亮氨酸的掺入，其掺入量为对照组的６．３倍。翻译产物经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和免疫转印可得到６条带，分子量分别为６４．５６、５８．８８、５３．７０、５１．４０、２８．４４和２３．９８ｋＤ。
- 龚晓明杜念兴曹颉陈清轩宋德秀
- 关键词：兔出血症病毒信使RNA
- 转猪生长激素基因家兔获得成功被引量：3
- 1993年
- Palmiter等(1982)将大鼠生长激素基因注射到小鼠受精卵雄原核后移植,率先获得转外源基因动物。转基因并有表达的小鼠比一般小鼠生长快两倍。以后家兔(Brem等,1985),猪和绵羊(Hammer等,1986)等家畜都相继获得转基因后代。而且已有部分转基因家畜能不同程度地表达整合基因,表现出目的性状。仅就已获得的约80头转生长激素基因猪的饲养试验结果来看,有近半数的转基因且表达者提高了生长速度约10％(Pursel等,1987、Vize等,1988),胴体瘦肉率也得以显著提高(Brem等,1988)。
- 魏平华王建忠邱伦和陈清轩曹颉宋德秀
- 关键词：生长激素家兔转基因
- 猪生长激素基因表达质粒的构建及其转基因动物研究被引量：11
- 1997年
- 将猪生长激素基因（ＰＧＨ）克隆到质粒ｐＵＣ１９上，经酶切分析，确定其酶切图谱．把ＰＧＨ转录起始位点以前的序列切掉，换上羊ＭＴ－１ａ基因的启动子，构建成可以调控的表达载体ｐＳＭＴＰＧＨ，用于转基因动物的研究．采用微注射法将线状ｐＳＭＴＰＧＨ导入猪、鼠和金鱼的受精卵中，得到了相应的转基因动物．对这些动物鉴定分析表明，外源基因整合率因动物不同而异，但该基因在这３种动物中的整合率均在９％以上，其生长速度都高于对照组．
- 陈清轩曹颉宋德秀陈永福魏庆信
- 关键词：生长激素基因转基因动物质粒
- 带有猪生长激素基因的转基因鼠被引量：1
- 1992年
- 为研究外源基因在转基因动物中的整合及表达调控的机制,我们首先进行了转基因鼠的研究。(a)外源基因片段的制备:把羊金属硫蛋白启动基因(SMT)和猪生长激素基因(PGH)与载体质粒pUC19相连接,构建成psMTPGH表达质粒。
- 陈清轩刘雷曹颉宋德秀
- 关键词：PCR转基因鼠生长激素基因
- 转基因处理后代猪的整合检测
- 1992年
- 本研究对用猪精子电激转基因处理所获40头仔猪的总体DNA进行斑点杂交检测,结果如下:1 试验方法1.1 总体DNA的提取取0.5～1g猪尾部组织,在液氮中剪碎,加500ml消化液(10mM Tris·HCl、0.1mM EDTA,pH8.0,100μ g/ml蛋白酶K,0.5%SDS).在55℃水浴中保温消化3小时。
- 魏平华王建忠邱伦和彭国良陈清轩曹颉宋德秀
- 关键词：杂交DNA
- 猪基因组文库的构建及其生长激素基因的分离被引量：2
- 1991年
- 本工作以长白猪为材料,分别用Charon28及EMBL 3为载体,构建了猪的基因组文库。用牛生长激素基因为探针对基因文库进行筛选,由两个基因文库中各获得一个阳性克隆λPGH1,λPGH2。其后,以质粒pUC19为载体对λPGH1进行了亚克隆。通过对亚克隆pPGH的酶切图谱及其Southern杂交结果的分析表明,在pPGH中含有完整的猪生长激素基因。
- 寇寇曹颉宋德秀
- 关键词：基因文库生长激素基因
