时晓芳
- 作品数:5 被引量:3H指数:1
- 供职机构:郑州大学生物工程系更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金河南省高校杰出科研人才创新工程基金国家大学生创新性实验计划项目更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 蛋白4.1N在乳腺癌细胞迁移中的作用
- 研究背景
乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤,也是导致女性患者死亡的重要原因之一。尽管以手术和放化疗为主的综合治疗方式极大地提高了乳腺癌患者的生存质量,但仍有较高的复发和转移率。未发生转移的乳腺癌患者其治愈率可达98%,...
- 时晓芳
- 关键词:乳腺癌肿瘤转移
- 4.1R基因敲除小鼠胚胎成纤维细胞系的建立及应用
- :建立4.1R基因缺失的小鼠胚胎成纤维细胞系,为研究细胞骨架蛋白4.1对细胞迁移的调控提供实验模型。 方法:从C57BL/6J-4.1R-/--和C57BL/6J-4.1R+/+小鼠胚胎中分离培养胚胎成纤维细胞,...
- 康巧珍时晓芳郭欢闫红霞高艳锋祁元明安秀丽
- 关键词:细胞骨架蛋白基因敲除胚胎成纤维细胞细胞迁移
- 细胞骨架4.1蛋白在非小细胞肺癌中的表达及意义被引量:2
- 2009年
- 背景与目的:4.1蛋白是细胞膜骨架的一个基本成分,参与维持红细胞形状和机械特性。近来研究表明4.1蛋白可能与多种恶性肿瘤的发生有关。本研究旨在探讨细胞骨架4.1家族蛋白成员(4.1B、4.1R、4.1N、4.1G)在非小细胞肺癌组织中的表达和意义。方法:采用EnVision和免疫组织化学法检测147例非小细胞肺癌组织中4.1B、4.1R、4.1N、4.1G蛋白的表达,用Wilcoxon秩和检验及Spearman等级相关检验分析4.1蛋白与肺癌病理特征之间的相关性。结果:与癌旁组织相比,肺鳞癌组织中4.1B、4.1R、4.1N蛋白的表达明显减少,差异均有统计学意义(P<0.01);与癌旁组织相比,肺腺癌组织中4.1B、4.1R、4.1N、4.1G蛋白的表达明显减少,差异均有统计学意义(P<0.05)。4.1B、4.1G在鳞癌组织的表达均显著低于腺癌组织(P<0.05),而4.1R、4.1N在鳞癌组织和腺癌组织的表达差异没有统计学意义(P>0.05)。鳞癌组织中,4.1G的表达与分化程度成显著正相关(rs=0.386,P<0.01);腺癌组织中4.1B、4.1N、4.1G的表达与肿瘤分化程度呈显著正相关(rs=0.276,P<0.05;rs=0.248,P<0.05;rs=0.268,P<0.05)。肺鳞癌及肺腺癌中,4.1B、4.1R、4.1N、4.1G的表达与淋巴结转移与否、肿瘤大小、年龄和性别均无相关性(P>0.05)。结论:4.1蛋白在非小细胞肺癌组织中的表达明显低于癌旁组织,4.1B、4.1N、4.1G的表达与非小细胞肺癌的分化程度有关。
- 郑祥艳祁元明高艳锋王宪远祁敏现时晓芳安秀丽
- 关键词:非小细胞肺癌免疫组织化学
- 蛋白4.1家族在不同乳腺癌细胞株中的表达与定位被引量:1
- 2010年
- 背景与目的:目前,已在多种人类肿瘤中发现蛋白4.1家族成员表达异常。本研究旨在通过检测蛋白4.1家族成员(4.1R/B/G/N)在3株转移能力不同的人乳腺癌细胞株MCF-7、T-47D和MDA-MB-231中的表达和定位,探讨蛋白4.1家族成员与乳腺癌细胞转移能力之间的关系。方法:采用Westernblot检测蛋白4.1家族成员在MCF-7、T-47D和MDA-MB-231细胞中的表达;免疫荧光标记对蛋白4.1家族成员在3株细胞中的表达进行定位。结果:4.1R/B/G在3种细胞系中均有表达,在T-47D细胞中的表达量均明显高于在MCF-7细胞中的表达量(P<0.05);但在高转移性的MDA-MB-231细胞中它们的表达水平转而下降。4.1N在T-47D细胞中的表达量明显低于在MCF-7细胞中的表达量(P<0.01),而在MDA-MB-231细胞中的表达则几乎检测不到,提示4.1N表达下调或缺失与乳腺癌细胞转移能力密切相关。4.1R/B/G/N在MCF-7和T-47D细胞中均主要定位于细胞膜及胞间连接处,同时4.1B在细胞核中也有表达;而在高转移的MDA-MB-231细胞中蛋白4.1家族成员均定位于细胞质中,提示蛋白4.1家族成员亚细胞定位的改变可能是乳腺癌细胞转移过程中的重要事件。结论:4.1N表达缺失和蛋白4.1家族成员亚细胞定位的改变与乳腺癌细胞MDA-MB-231的高转移性密切相关。
- 闫红霞时晓芳孔超郭欢高艳锋祁元明汲振余陈鲤翔安秀丽康巧珍
- 关键词:MCF-7MDA-MB-231
- 稳定转染pEGFP-4.1N乳癌细胞系的筛选与鉴定被引量:1
- 2010年
- 目的:建立真核表达载体pEGFP-4.1N稳定转染的乳癌MDA-MB-231细胞系,观察4.1N在MDA-MB-231细胞中的表达和定位。方法:真核表达载体pEGFP-4.1N转化到大肠杆菌中进行扩增,酶切鉴定插入片段后进行测序。脂质体法将重组质粒转染至MDA-MB-231细胞中,经G418筛选抗性克隆,利用倒置荧光显微镜观察融合蛋白在细胞中的定位,并用Western blot检测融合蛋白的表达。结果:真核表达载体pEGFP-4.1N的酶切片段经琼脂糖电泳和测序鉴定结果正确。G418筛选14d后获得pEGFP-4.1N稳定转染的MDA-MB-231抗性克隆。荧光显微镜下观察到融合蛋白在MDA-MB-231阳性克隆的细胞质中表达,核内不表达。Western blot亦检测到4.1N融合蛋白的表达。结论:成功建立了pEGFP-4.1N稳定转染的乳癌细胞系MDA-MB-231阳性克隆。
- 时晓芳闫红霞宋安营高艳锋祁元明汲振余郭欢任岩康巧珍
- 关键词:乳癌增强型绿色荧光蛋白真核表达载体MDA-MB-231