房师松
- 作品数:186 被引量:692H指数:14
- 供职机构:深圳市疾病预防控制中心更多>>
- 发文基金:深圳市科技计划项目国家自然科学基金广东省医学科学技术研究基金更多>>
- 相关领域:医药卫生农业科学生物学轻工技术与工程更多>>
- 泛太平洋西岸地区部分H5N1亚型禽流感病毒毒株血凝素基因特性的研究被引量:1
- 2008年
- 目的了解泛太平洋西岸各个国家H5N1亚型人禽流感病毒血凝素(HA)基因分子特征,寻求HA基因变异规律。方法从Genebank中下载泛太平洋西岸国家或地区(包括泰国、越南、香港、印度尼西亚、中国大陆、蒙古、俄罗斯)50株H5N1亚型高致病性流感病毒(HAPI)毒株血凝素基因序列,利用生物信息学软件DNASTAR5.0进行核酸同源性分析,用MEGA3.1进行核酸和氨基酸序列比对和进化树分析。结果50株高致病性H5N1亚型流感病毒毒株可以分成3个相对独立的进化簇。第1簇为泰国越南簇;第2簇为中国印尼北亚簇(包含中国、印度尼西亚、蒙古以及俄罗斯);第3簇主要为1996~2001年期间分离的毒株,该簇毒株HA基因与Gs/Gdlike毒株核酸同源性更为接近,其基因亚型更多表现为Gs/Gdlike或其他基因亚型。HA基因分子特征分析表明在HA蛋白抗原性上,泰国越南分离株表现基本一致,而其他地域分离株存在表现各异,但也存在地域的一致性。结论泛太平洋西岸地区分离的H5N1亚型禽流感病毒血凝素蛋白在分子特征上表现出一定的地域特异性,在一定地域范围内保持一致性。
- 房师松何建凡程小雯吕星逯建华张顺祥
- 关键词:血凝素蛋白H5N1病毒毒株
- 2010年深圳市流感流行病学分析被引量:12
- 2011年
- 目的对2010年深圳市流感监测结果进行分析,了解流感的流行趋势,为流感防治提供科学依据。方法收集全市31家监测单位的流感样病例数据、病原学检测结果和暴发疫情资料进行分析。结果 2010年深圳市的流感样病例百分比(ILI%)为5.43%。2010年全市共采集日常监测ILI咽拭标本4031份,分离出445株流感病毒,阳性率为11.0%,其中14株季节性H1N1亚型(3.1%),42株季节性H3N2亚型(9.4%),171株甲型H1N1亚型(38.4%),213株B(Victoria,47.9%)亚型,5株B(Yamagata,1.1%)亚型。2010年全市报告了89起ILI暴发疫情,发病总人数741人,流感PCR检测阳性79起,其中季节性甲型6起(6.8%),乙型67起(75.3%),甲型H1N1流感6起(6.8%)。结论 2010年深圳市流感活动较低,未出现明显的高峰。
- 王昕程小雯房师松吴春利吕星张仁利马汉武
- 关键词:流感甲型H1N1
- H7N9禽流感病毒感染A549细胞生物标志物研究
- 2018年
- 目的通过建立H7N9禽流感病毒和H1N1pdm09流感病毒(对照病毒)感染A549细胞模型,分析H7N9禽流感病毒感染A549细胞的特征蛋白,筛选其生物标志物,初步揭示H7N9禽流感病毒致细胞病变的蛋白分子机制。方法感染复数为0.001的H7N9和对照病毒分别感染A549细胞24、48、72 h后提取细胞总蛋白进行荧光双向差异凝胶电泳(2D-DIGE),筛选H7N9禽流感病毒感染A549细胞的可能生物标志物并进行蛋白印迹(WB)验证。结果血小板活化因子乙酰水解酶Ⅰb亚基β(PAFAH1B2)蛋白在H7N9感染A549细胞72 h后表达量急剧下降,而在空白对照组和H1N1pdm09感染A549细胞组的表达量未出现明显变化。结论 PAFAH1B2可作为H7N9感染A549细胞后期的生物标志物,其表达量的变化可能与H7N9感染患者的症状相关。
- 丁小满王婷彭博胡鹏威段永翔房师松俞慕华
- 关键词:血小板活化因子乙酰水解酶生物标志物
- 稳定表达H1N1流感病毒核糖核蛋白的Hela细胞株的建立被引量:1
- 2016年
- 目的构建稳定表达H1N1流感病毒核糖核蛋白的Hela细胞株,为抗病毒药物筛选提供细胞模型。方法利用基因重组技术构建四种重组真核表达载体pc DNA3.1/Zeo-PB1、pc DNA3.1/Hygro-PB2、pc DNA3.1/Neo-PA、p EF6/V5-His A-NP,进行PCR和DNA测序鉴定;使用Hela细胞依次进行四种抗生素Zeocin、Hygromycin B、Geneticin(G418)、Blasticidin S HCl最小致死浓度实验,获得其最佳筛选浓度;利用Lipofectamine 2000将四种重组真核表达载体依次转染Hela细胞,并添加相应抗生素筛选稳定表达核糖核蛋白细胞株;RT-PCR以及POL I系统鉴定Hela细胞株是否稳定表达H1N1流感病毒核糖核蛋白。结果 RT-PCR初步鉴定流感病毒核糖核蛋白基因片段稳定整合在宿主基因组中,POL I系统证实核糖核蛋白在Hela细胞中已经获得了功能性表达。结论成功构建了Hela-核糖核蛋白细胞株,为以流感病毒RNA聚合酶复合体为靶点的抗流感病毒药物的研究提供了细胞模型。
- 丁小满王昕俞若曦彭博武伟华刘慧耿一介董方圆俞慕华房师松
- 关键词:HELA细胞甲型流感病毒核糖核蛋白细胞模型
- 抗菌肽D基因在毕赤酵母中的表达及鉴定被引量:5
- 2004年
- 目的 将抗菌肽D基因克隆至甲醇营养型酵母表达载体pPICZα A中 ,并与α factor信号肽相连接 ,经EcoRⅠ酶切分析和PCR扩增鉴定 ,获得阳性重组子。方法 用锂盐法将重组表达载体转化巴斯德毕赤酵母 (Pichiapastoris)受体菌GS115 ,筛选获得阳性克隆。结果 将阳性菌落发酵产物进行抑菌试验 ,表达产物有较强的杀菌作用 ,表达产物杀菌活性达到5 6 5 6U ml。结论 抗菌肽D基因已经导入酵母细胞并整合在其基因组中 ,表达产物均具有高效的杀菌作用 ,有希望开发成为一种新型的抗菌消毒药物。
- 房师松刘涛邓平建赵树进
- 关键词:抗菌肽基因毕赤酵母
- 深圳市活禽市场活禽经营人员H7N9禽流感病毒抗体水平及感染危险因素调查被引量:7
- 2015年
- 目的调查深圳市活禽市场活禽经营人员H7N9禽流感病毒抗体水平,探讨感染危险因素。方法在对活禽市场活禽经营人员问卷调查的基础上,采集血样,用血凝抑制试验检测H7N9禽流感病毒抗体,采用单因素分析和多因素Logistic回归对H7N9病毒感染的危险因素进行分析。结果 250名活禽市场活禽经营中,男性141人,女性109人,年龄中位数为41岁,38人(15.2%)H7N9病毒抗体阳性(滴度≥1:160),男、女各19人。问卷调查发现,236人(94.4%)主要接触鸡,169人(67.6%)接触过鸭,120人(48.0%)接触过鹅,105人(34.1%)接触过鸽子,单因素分析显示接触鸭子、鹅和鸽子为H7N9病毒感染的高危因素,进一步多因素Logistic回归分析结果显示,接触鸭子为H7N9病毒感染的高危因素(OR=3.85,95%CI:1.44-10.35,P=0.007),活禽暴露时间、暴露方式和流感疫苗接种等因素对H7N9病毒感染的影响无显著性(P〉0.05)。结论活禽市场活禽经营人员中存在着一定数量的隐性感染者,接触鸭子为H7N9病毒感染的危险因素。
- 唐秀娟房师松吕星武伟华彭博王昕
- 关键词:抗体水平活禽市场
- 深圳市2008--2009年A型H1N1季节性流感病毒神经氨酸酶抑制剂耐药性监测被引量:5
- 2011年
- 目的对深圳市2008--2009年分离到的H1N1季节性流感病毒神经氨酸酶(NA)抑制剂的耐药性进行监测。方法根据原始临床样本的采集时间,按周抽取了55株2008--2009年分离到的H1N1季节性流感病毒,对其NA片段进行全长测序,选取WHO推荐的疫苗株和部分国内外分离到的ⅢN1季节性流感病毒作为参考株,运用Mega3.1软件进行种系发生树的构建、耐药相关位点及糖基化位点的分析。结果对NA片段的序列分析发现2008年有2株(7.1%)出现了H275Y突变,但是2009年则有25株(92.6%)出现了该突变。提示H275Y达菲耐药突变株成为了2009年深圳市社区传播的优势株。同时还发现了一株Q136K变异株,显示对乐感清出现耐药。分子进化分析结果显示,H275Y变异成为了毒株在系统进化树上分布的主要依据。所有的深圳株NA片段上潜在的糖基化位点序列保守。结论大量H275Y达菲耐药株的出现提示在今后的工作中应当密切关注流感病毒的耐药进展,进一步加强其耐药机制的研究。
- 吕星吴春利阳帆王昕房师松程小雯
- 关键词:H1N1神经氨酸酶抑制剂耐药
- 丙型肝炎病毒Core基因重组表达载体Pet32a-Core的构建被引量:1
- 2008年
- 目的扩增丙型肝炎病毒核心区(HCV-Core)基因,并构建HCV-Core基因的重组表达载体。方法设计合成HCVCore基因全长引物,提取丙型肝炎患者血清中的HCV RNA,应用逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)扩增C区基因片段,用限制性内切酶BamH1和SaL1双酶切后,连接到Pet32a表达载体中,并转化到BL21大肠杆菌中;然后PCR和双酶切鉴定转化菌落。结果扩增得到目的基因长度约600bp,经测序证实为HCV-Core基因,表明HCV-Core基因重组表达载体Pet32a-Core构建成功。结论成功构建HCV-Core基因表达载体Pet32a-Core,为下一步Core蛋白的原核表达及单克隆抗体的制备奠定基础。
- 杨洪房师松何雅青姚相杰张海龙阳帆冼慧霞
- 关键词:丙型肝炎病毒核心基因
- 广东省深圳市流感流行特征分析被引量:8
- 2016年
- 目的掌握深圳市流感流行规律,了解甲流大流行以后流感的流行趋势。方法对深圳市流感样病例监测数据、病原学检测结果和暴发疫情资料进行分析。结果深圳市的流感样病例百分比(1LI%)为4.67%,呈逐年下降趋势,ILI年龄构成以0-4岁为主(占54.2%)。流感病毒分离平均阳性率为10.6%,按月分析流感病毒分离阳性率与ILI%变化趋势呈正相关(r=0.447,P=0.001)。全市报告了482起ILI暴发疫情,以乙型流感为主(占63.9%)。2010年深圳市季节性流感出现了春季和夏季流行高峰,分别以乙型Victoria系和甲型H1N1亚型为优势株;2011年为冬春季和秋季高峰,以甲型H1N1和季节性H3亚型为优势株;2012年出现了冬春季和夏季高峰,以乙型(Victoria系和Yamagata系)和季节性H3亚型为优势株;2013年出现了春、秋、冬季三个流行高峰,分别以甲型H1N1、季节性H3和乙型Yamagata系为优势株。结论深圳市季节性流感每年均出现2—3个流行高峰,分别在冬春季和夏秋季,每年流行高峰出现的时间不同,每年流行的型别不同。
- 王昕房师松吕星彭博武伟华张仁利
- 关键词:流感甲型H1N1流感
- 深圳市六株境外输入的SARS-CoV-2基因组特征分析
- 为了了解深圳境外输入的新型冠状病毒(SARS-CoV-2)的遗传特征,本研究对2021年2月六株境外输入的SARS-CoV-2毒株进行了高通量测序与基因组序列分析。测序获得的六株SARS-CoV-2毒株基因组长度分别为2...
- 陈龙房师松何雅青
- 关键词:基因组测序