房伟
- 作品数:97 被引量:96H指数:6
- 供职机构:安徽大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金安徽省优秀青年科技基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:生物学轻工技术与工程农业科学化学工程更多>>
- 一种高比活生淀粉水解酶突变体、其编码基因、表达菌株及其应用
- 本发明公开了一种高比活生淀粉水解酶突变体、其编码基因、表达菌株及其应用,本发明以稳定性欠佳的α‑淀粉酶Amy为出发酶,经过定点突变,获得了热稳定性提高的突变体Amy:ΔTG/W345A。以玉米生淀粉为底物时,突变体的比酶...
- 肖亚中何玉房伟张学成方泽民
- 长距离反向PCR技术高效扩增已知DNA片断的侧翼序列被引量:15
- 2006年
- 为解决传统反向PCR技术扩增片段短、假阳性多的不足,建立了长距离反向PCR(LD I-PCR)扩增技术:0.5μg DNA/mL的反应体系使DNA酶解片段充分自身环化连接,其产物用25 nt^30 nt的序列特异引物进行长距离PCR。结果表明该方法能特异地扩增出长达16 kb的序列,在已知DNA片段的侧翼序列克隆方面具有高效、简便、特异的优点。
- 洪宇植肖亚中房伟童品贵袁璟孙芹英
- 关键词:侧翼序列漆酶基因
- β-葡萄糖苷酶与透明颤菌血红蛋白在大肠杆菌中的共表达被引量:3
- 2018年
- 为解决大肠杆菌高密度发酵生产β-葡萄糖苷酶过程中溶氧不足的问题,分别采用双顺反子和T7启动子系统在Escherichia coli中引入透明颤菌血红蛋白(VHb)以改善溶氧的利用、提高菌体的生物量,进而增加β-葡萄糖苷酶的产量。以双顺反子形式诱导表达VHb时,在摇瓶低溶解氧条件下的最高生物量达到4.24±0.29(OD_(600)),与无VHb表达的对照组相比提高了35.03%,同时β-葡萄糖苷酶发酵酶活达到了(9.78±0.55)U/m L,比对照组提高了25.38%。在3 L发酵罐中使用双顺反子形式共表达VHb时,β-葡萄糖苷酶发酵总酶活达到141.23 U/m L,与无VHb表达的对照相比提高了35.57%。以T7启动子对VHb进行表达后,在摇瓶和发酵罐中β-葡萄糖苷酶的发酵酶活均低于对照组。这些结果表明,在大肠杆菌中以双顺反子形式共表达β-葡萄糖苷酶和VHb能够提升菌体对低溶氧的耐受能力,提高菌体生物量和β-葡萄糖苷酶的产量。
- 邓发军潘宇常飞房伟方泽民肖亚中
- 关键词:Β-葡萄糖苷酶大肠杆菌双顺反子
- 大熊猫肠道微生物参与木质素转化的初步研究
- 本文首先通过构建16S rRNA基因文库,对大熊猫肠道的微生物区系进行了考察,探究其中是否蕴含木质素降解相关的微生物。研究表明在大熊猫的肠道中可能存在潜在的木质素降解相关微生物。为了验证推测,进一步构建了元基因组文库,并...
- 房伟方泽民肖亚中
- 关键词:大熊猫肠道微生物木质素生物转化
- 文献传递
- 一种β-葡萄糖苷酶突变体、其重组表达质粒及转化的工程菌株
- 本发明通过基因定点突变的方法获得葡萄糖耐受浓度提高的β-葡萄糖苷酶的基因、突变质粒、工程菌,并可在将工程菌诱导表达后,获得葡萄糖耐受浓度提高的β-葡萄糖苷酶。本发明以来自海洋未培养微生物来源的β-葡萄糖苷酶为基础,通过P...
- 肖亚中刘娟娟张学成方泽民房伟洪宇植
- 文献传递
- 一种具有低聚半乳糖合成能力的β-葡萄糖苷酶及其表达菌株和应用
- 本发明公开了一种具有低聚半乳糖合成能力的β‑葡萄糖苷酶及其表达菌株和应用,其中具有低聚半乳糖合成能力的β‑葡萄糖苷酶,名称为BglD1,其原始来源于中国南海西沙群岛海底沉积物,具有如下氨基酸序列之一:(1)序列表中的SE...
- 房伟肖亚中邓鹏军方泽民刘娟娟
- 文献传递
- 一种含有漆酶的角蛋白纤维染色组合物及其染色方法
- 本发明涉及一种来源于海洋微生物的细菌漆酶Lac15以及使角蛋白纤维具体为人发染色的组合物,该组合物含有细菌漆酶Lac15、至少一种氧化染料、至少一种表面活性剂。本发明也涉及它们在角蛋白纤维具体如人发染色中的应用方法。本发...
- 肖亚中尹强方泽民房伟张学成袁璟
- 文献传递
- 特殊生境微生物功能基因挖掘
- 本研究构建了来自于南海海洋表层海水、动物肠道等生境微生物的元基因组文库。通过功能和/或序列筛选策略,从构建文库筛选获得了多个新型p一葡萄糖昔酶和漆酶等功能基因。通过对部分功能基因的克隆、重组表达及酶学性质分析,获得了性质...
- 房伟方泽民袁璟张学成彭惠肖亚中
- 关键词:微生物功能基因酶制剂
- 文献传递
- 一种真菌漆酶突变体PIE5及其表达菌株和应用
- 本发明公开了一种真菌漆酶突变体PIE5及其表达菌株和应用,其中真菌漆酶突变体PIE5,是以定向进化手段对灰盖鬼伞漆酶Lcc9进行改造,构建突变文库,结合三轮筛选方法,获得的漆酶突变体,以提高漆酶的应用能力。本发明真菌漆酶...
- 肖亚中尹强方泽民张学成房伟
- 文献传递
- 生淀粉水解α-淀粉酶Amy486的重组表达和性质分析
- 2024年
- 为明晰生淀粉水解α-淀粉酶Amy486独特的催化特征,将克隆自Exiguobacterium sp.J84菌株的amy486进行重组表达,并研究重组酶的酶学性质、嗜盐特性和钙离子依赖性。Amy486最适催化pH为7.5,在pH 6.5~8.5范围内酶活力保持40%以上,最适温度为35℃,30℃半衰期为100 h。1.5 mol/L Na_(2)SO_(4)处理可将Amy486的比酶活由1.53 U/mg提升至2209 U/mg。添加1.0 mol/L Na_(2)SO_(4),Amy486在35℃放置500 h,酶活力可保持60%以上。2.5 mmol/L CaCl_(2)可提升酶活力至110%,添加超过5 mmol/L CaCl_(2),Amy486的相对酶活力降至100%以下,EDTA孵育对Amy486蛋白的酶活力和稳定性影响较小。Amy486与钙离子结合的关键位点为K_(3)0_(2),K_(3)0_(2)E与钙离子的结合能力增强,从而降低该酶对外源钙离子的依赖性。α-淀粉酶Amy486及其突变体酶K_(3)0_(2)E是具有较高比酶活的生淀粉水解酶,对外源钙离子的依赖性较低,其活力的发挥依赖于适合的盐浓度,可应用于某些高盐环境下的淀粉水解。
- 陈新高欢欢汪斌张学成方泽民肖亚中房伟
- 关键词:Α-淀粉酶生淀粉