戴保民 作品数:73 被引量:112 H指数:7 供职机构: 华西医科大学基础医学院 更多>> 发文基金: 卫生部科学研究基金 国家自然科学基金 国家教育部博士点基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 农业科学 更多>>
问号赖型钩端螺旋体23kDa蛋白的免疫原性研究 2000年 目的 探讨 p DL12 1的 1.0 kb0 17株问号赖型钩端螺旋体 DNA片段可否作为钩体重组疫苗广谱保护性抗原的候选。方法 采用 SDS- PAGE制备 2 3k Da蛋白 ,免疫日本大耳兔制备抗 2 3k Da抗血清 ,Western blot鉴定其免疫原性。结果 2 3k Da重组抗原兔抗血清可识别 p DL12 1体外表达 2 3k Da抗原产物和问号赖型钩端螺旋体 0 17株超声抗原成份 ;用 Westemblot鉴定抗血清效价 ,其抗体滴度为 1/ 12 80 0 ;用 p DL12 1重组质粒主动免疫豚鼠 ,可使豚鼠抵抗强毒力株钩端螺旋体攻击 ,表现出免疫保护作用。结论 该重组 2 3k Da抗原有良好的免疫原性 ,可能是赖型钩体 0 17株的保护性抗原。 刘洪斌 戴保民 章涛 李胜富 方之茂关键词:免疫印迹 抗原 DNA 致病性钩端螺旋体微量DNA的聚合酶链反应(PCR) 1990年 本研究首次通过对黄疸出血群钩端螺旋体 DNA 的分子克隆的反复筛选,获得了两个重组DNA片段,其中一个具有广泛针对各群致病性钩体的特性,另一个仅对黄疸出血群钩体起杂交反应。经 DNA 序列分析,分别合成两对 PCR 寡核苷酸引物——Primer B1.2和 Primer B3.4。本研究证明 PCR 是一种灵敏度极高,针对性很强的 DNA 检测技术,可用于钩体病早期诊断和流行病学分类鉴定。 鲍朗 戴保民关键词:钩端螺旋体 分子克隆 PCR 23SrRNA基因变异区扩增在钩端螺旋体分类鉴定和临床检测中的应用 戴保民 张燕华 唐红 刘丽 闫蓉华 该项目首次成功地设计并合成了钩端螺旋体犬群犬型MPULTPN株23SRRNA基因变异区273-396位点间的一对种特异性引物,进行PCR反应。该引物能使49型50株致病钩体发生特异性扩增,具有种特异性。在钩体病初筛、分类...关键词:关键词:钩端螺旋体 钩端螺旋体病患者血标本的快速处理及PCR检测 被引量:12 1996年 本文利用二氧化硅──高盐吸附法及16SrRNA基因特异性引物对钩端螺旋体病患者早期血标本进行了快速处理及检测,经反复试验表明,该方法简便、快速、稳定、敏感,对钩体病的流行病学研究及临床早期诊断有一定的价值。 伍卫华 李胜富 戴保民关键词:钩端螺旋体病 聚合酶链反应 血标本 我国莱姆病研究概况 1994年 我国莱姆病研究概况四川省犍为县卫生防疫站(614400)江正斌综述华西医科大学戴保民审阅莱姆病(Lymedisease)是一种由蜱传疏螺旋体引起的自然疫源性疾病,临床表现为多系统损害,呈多样性阶段性反复发作。在二十世纪初瑞典就有类似病人发生,当时称慢... 江正斌 戴保民关键词:莱姆病 螺旋体病 传染病 全文增补中 16S rRNA基因多变区序列对不同种属钩端螺旋体的PCR扩增 被引量:3 1993年 从问号状钩体16S rRNA基因多变区V2和V4序列中设计了一对引物:PⅠ 5’GGGAAC CTA ATA CTG GAT GG;PⅡ 5’ACA TAG TTT CAA GTG GAG GC,并对不同种属钩体DNA进行了扩增。在55℃退火条件下,问号状钩体各群型具有相同大小的扩增产物(473bp)和KpnⅠ酶谱,双曲钩体有约280bp的扩增带,但不被KpnⅠ酶消化,而细丝体属钩体和其它对照DNA未见扩增。以^(32)P标记的lai型Lai株(强毒)扩增产物作探针行Southern杂交发现,问号状钩体各株扩增带均可被杂交,而双曲钩体扩增物无杂交。研究表明,该对引物可用于钩体的分类和检测。 伍卫华 戴保民关键词:钩端螺旋体 聚合酶链反应 反向PCR扩增问号赖型钩体重组质粒pDJH_2插入片段 被引量:1 1999年 钩端螺旋体赖型赖株(L.interrogansSerovarlai)DNA分别经BamHI,HindⅢ和PstⅠ3种内切酶酶切完全消化,通过设计1对引物,反向PCR扩增问号赖型钩体重组质粒pDJH2插入片段两端的未知序列.结果显示不同酶切环化连接,经反向PCR扩增均可得2条大小相等的扩增带.结果提示反向PCR技术可以用于问号赖型钩体重组质粒插入片段两端的未知序列的研究,为获得钩体完整基因序列提供新的途径. 刘洪斌 戴保民关键词:钩端螺旋体 反向PCR 重组质粒 钩体病 赖型钩体pCX7探针Southern杂交分析不同血清群型钩体DNA 被引量:1 1994年 用赖型017株钩体DNA基因库中筛选出的重组克隆pCX7制备重组质粒,再以 ̄(32)P标记为探针,对11个血清群的18株问号钩体、双曲钩体PatocI株和细螺旋体illini3055株DNASouth-ern杂交。放射自显影结果显示:双曲钩体PatocI株和细螺旋体illini3055株DNA未获杂交阳性区带;javanica(爪哇)、manhao2(曼耗2)和ranarum(蛙)三个低毒力血清型的问号状钩体DNA亦为阴性;15株问号状钩体DNA均出现了杂交信号,而且不同群型钩体DNA杂交带型明显不同,赖型钩体017株(强毒株)与601株(弱毒株)杂交带型也有细微差别。作者认为,以pCX7探针进行Southern杂交可望作为钩体分类和鉴定的工具或参考。 沈成义 戴保民关键词:钩端螺旋体 杂交 酶谱 质粒 光敏生物素和^(32)P标记DNA打点杂交检测钩端螺旋体 1992年 应用光敏生物素和^(32)P标记黄疸出血群赖型017株钩端螺旋体DNA(简称017DNA)作为探针,打点杂交检测问号状钩体。结果表明:两种探针均能检测不同群、型的问号状钩体DNA,最小检测量分别为5pg和1pg;与双曲钩体patoc型PatocⅠ株、细螺旋体属illini型3055株及其他致病菌和正常人血清未发现明显杂交信号。提示光敏生物素制备的017DNA探针可以用于检测钩体,也可应用于钩体病的早期诊断和流行病学调查。 张燕华 戴保民关键词:光敏生物素 钩端螺旋体 探针杂交 钩端螺旋体基因组大小的初步研究 1990年 作者采用脉冲场凝胶电泳技术,对不同属、群(型)的5株钩端螺旋体基因组DNA分子量进行了研究,并用限制性内切酶Not I对基因组DNA进行分析。结果表明:钩端螺旋体基因组大小为2000kb;各株钩体基因组大小无明显差异;限制性内切酶Not I可将钩体基因组消化为11个大片段;钩体基因组DNA被Not I消化后电泳图谱与细菌基因组DNA图谱有很大差异。 肖建国 戴保民 柴建华 余龙关键词:钩端螺旋体 基因组 脱氧核糖核酸