徐赫 作品数:12 被引量:11 H指数:2 供职机构: 中国医科大学公共基础学院组织工程学教研室 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 辽宁省科学技术计划项目 教育部“新世纪优秀人才支持计划” 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 文化科学 更多>>
DMT1在APP/PS1转基因小鼠大脑皮层老年斑内的定位研究 被引量:3 2008年 目的研究二价金属离子转运体1(divalent metal transporter 1,DMT1)在APP/PS1转基因小鼠大脑皮层内的定位分布,探讨DMT1异常表达影响脑铁代谢平衡从而参与AD发病的可能机制。方法应用免疫组织化学方法观察DMT1在9月龄APPsw/PS1小鼠大脑皮层的阳性分布;应用免疫荧光双标技术和共聚焦激光扫描显微镜观察DMT1蛋白和β淀粉样蛋白(β-amyloid peptide,Aβ)在APP/PS1转基因小鼠大脑皮层老年斑内的一致性分布和位置关系。结果APP/PS1转基因小鼠大脑皮层老年斑内均有DMT1阳性表达;DMT1和Aβ免疫双标发现DMT1免疫阳性产物与Aβ共存于老年斑,二者分布具有一致性。结论DMT1在APP/PS1转基因小鼠大脑皮层老年斑内大量表达,其分布与Aβ具有一致性,提示DMT1可能参与AD脑内Aβ沉积和老年斑形成。 郑玮 徐赫 高慧玲 王占友关键词:Β淀粉样蛋白 老年斑 哺乳期CD-1 母鼠锌缺乏导致仔鼠海马神经元凋亡及其机制 前言
锌是机体内的重要微量元素,在基因表达、DNA合成、酶催化反应、组织修复、神经信号传导以及记忆形成中发挥作用。脑中所含有的大部分锌离子/(大约85/%/)与蛋白质等大分子相结合,如锌指蛋白和金属硫蛋白等;... 徐赫关键词:锌缺乏 海马 神经元凋亡 TUNEL染色 文献传递 哺乳期锌缺乏对小鼠海马锌离子含量影响的研究 被引量:1 2011年 目的检测哺乳期母鼠锌缺乏对其仔鼠大脑海马内锌离子含量的影响.方法 CD-1母鼠产后即喂以缺锌饲料(锌含量为0.85μg/g)以及去离子水,它们未断乳的仔鼠即作为锌缺乏组模型,在小鼠生后7、14、21 d,应用金属自显影技术检测海马中游离锌离子含量变化.结果与对照组相比,锌缺乏组未断乳仔鼠海马中的锌离子含量明显减少.结论哺乳期母鼠锌缺乏会导致仔鼠海马中游离锌离子含量显著减少. 李成 姚品 徐赫关键词:锌缺乏 海马 小鼠 XAV939抑制人神经母细胞瘤细胞的增殖 2014年 目的探讨小分子抑制剂XAV939对人神经母细胞瘤(NB)细胞系SH-SY5Y细胞的抗增殖和诱导凋亡的作用,及其可能机制。方法采用MTT法检测XAV939对SH-SY5Y细胞活力的抑制作用,并确定最佳作用浓度。然后采用Annexin V-FITC法检测XAV939处理后早期凋亡细胞百分比,Hoechst33342染色法观察凋亡细胞核形态,克隆形成实验检测细胞体外增殖能力的变化。Western blotting检测Wnt/β-连环蛋白(β-catenin信号通路的关键蛋白和抗凋亡蛋白Bcl-2的变化。结果 MTT结果显示,1μmol/L XAV939作用24h后,SH-SY5Y细胞增殖的抑制率有明显上升。XAV939处理后48h及72h,凋亡细胞百分比显著高于对照组,且细胞呈现出不同程度的凋亡形态。此外,XAV939可显著降低SH-SY5Y细胞的体外克隆形成率,降低Wnt/β-catenin信号通路关键蛋白β-catenin,Cyclin D1和c-Myc及抗凋亡蛋白Bcl-2的表达。结论 XAV939可能部分通过抑制Wnt/β-catenin信号通路而抑制SH-SY5Y细胞的增殖。 田晓红 侯伟健 柏树令 范军 佟浩 徐赫关键词:神经母细胞瘤 WNT Β-CATENIN信号通路 免疫印迹法 RNA干扰介导的端锚聚合酶1表达下调诱导人神经母细胞瘤细胞的凋亡 被引量:1 2014年 目的探讨RNA干扰(RNAi)介导的端锚聚合酶1(TNKS1)的表达下调对人神经母细胞瘤(NB)细胞SH-SY5Y体外增殖能力和凋亡的影响及机制,为开发治疗NB的新靶点提供一定的实验基础。方法根据TNKS1基因序列,设计合成3个TNKS1基因的特异性短发夹环(shRNA)干扰片段,利用慢病毒作为载体,构建目的基因的RNAi序列。慢病毒感染SH-SY5Y细胞,实时定量PCR(Real-time PCR)法检测TNKS1基因的表达,筛选出最佳干扰序列进行后续实验。然后进行克隆形成实验,检测RNAi-TNKS1后细胞增殖能力的改变。并进一步用Western blotting法检测抗凋亡蛋白Bcl-2、促凋亡蛋白Caspase-3、Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)通路的关键蛋白β-catenin及其下游靶蛋白Cyclin D1和c-Myc的表达,最后用透射电镜观察凋亡形态的改变,探讨RNAi-TNKS1对细胞凋亡的影响及其作用机制。结果慢病毒载体构建成功,病毒滴度为5×1011TU/L。Real-time PCR检测结果显示,#3 shRNA为最佳的有效靶点。克隆形成实验的结果显示,RNAi-TNKS1后SH-SY5Y细胞的克隆形成率较对照组明显下降。Western blotting结果显示,RNAi-TNKS1可显著抑制Bcl-2蛋白的表达,促进Caspase-3蛋白的表达。此外,Wnt/β-catenin通路的关键蛋白β-catenin及其下游靶蛋白Cyclin D1和c-Myc的表达也降低。透射电镜结果显示,RNAi-TNKS1后细胞呈现明显的凋亡结构和形态。结论 RNAi介导的TNKS1的表达下调可降低SH-SY5Y细胞的体外增殖能力,诱导其凋亡,可能部分是通过抑制Wnt/β-catenin通路发挥作用。 田晓红 柏树令 范军 侯伟健 佟浩 徐赫关键词:RNA干扰 神经母细胞瘤 WNT Β-CATENIN信号通路 免疫印迹法 中国医科大学组织工程学教学的回顾与展望 被引量:2 2016年 组织工程学作为一门新兴的边缘学科和交叉学科,从1987年美国国家科学基金会正式确立这一概念到现在已经有近30年的发展历程。这期间组织工程学的发展经历了量的积累到质的飞跃,相关的研究论文呈井喷之势增长,截止到2015年10月底,Pubmed上可检索到118000多篇研究报道。此外,组织工程皮肤、角膜等产品的获批和上市为成千上万的患者带来了希望和福音,并极大地鼓舞了研究者的信心。笔者就这些年本教研室的教学方式和方法改革进行了总结。 田晓红 柏树令 敖强 侯伟建 范军 佟浩 徐赫关键词:教学方式 PUBMED 组织工程皮肤 研究论文 骨髓间充质干细胞复合纳米相羟基磷灰石/胶原复合材料的体外相容性研究 研究大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)在纳米相羟基磷灰石/胶原(nano-HAp/Collagen,NHAC)复合材料上的生长、增殖情况,为组织工程学筛选出一种新型的适合细胞生长、增殖的生物材料。采用全骨髓培养法获得BM... 徐赫 柏树令人脂肪源性干细胞的分离及生物学性状的鉴定 被引量:2 2011年 目的建立从人脂肪抽吸物中分离培养脂肪来源干细胞(ASCs)的方法,并从形态学、生长动力学、表面标记物和分化能力等方面进行鉴定。方法从4例行腹部脂肪抽吸术的健康成年女性患者获得脂肪组织,通过酶消化法分离和培养脂肪干细胞,并传代培养至20代,观察细胞形态;四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定和比较第3、9、15和20代细胞生长活性并绘制细胞生长曲线;流式细胞仪测定细胞周期和表面抗原表达;成脂成骨诱导后分别行油红O和茜素红染色定性。结果人脂肪源性干细胞形态类似成纤维细胞,呈漩涡状生长;MTT结果显示,ASCs传至15代仍有较强的增殖活性,之后逐渐减慢,至20代时细胞增殖速度明显降低,统计学分析显示,与第3、9、15代细胞有差异(P<0.05);细胞周期分析发现,ASCs具有干细胞的特性;流式细胞仪检测结果显示,间充质干细胞标记CD90、CD44表达阳性,造血干细胞标记CD34、血细胞标记CD45、内皮细胞标记CD31表达均为阴性,另外,CD49d低表达,CD 106表达阴性;成脂诱导后细胞内可见大量脂滴形成,油红O染色阳性;成骨诱导后镜下可见钙结节形成,茜素红染色阳性。结论人脂肪抽吸物中含有大量干细胞,能保持稳定增殖和表达干细胞表面标志,在诱导剂的作用下能向成脂和成骨分化。 王洁晴 柏树令 侯伟健 佟浩 田晓红 徐赫关键词:脂肪来源干细胞 分化 哺乳期CD-1母鼠锌缺乏导致仔鼠海马神经元凋亡及其机制 徐赫 柏树令 王占友锌缺乏对海马锌离子及锌转运蛋白ZnT4表达的影响 被引量:1 2011年 目的探讨锌缺乏对小鼠大脑海马锌离子和锌转运蛋白4(Zinc Transporter 4,ZnT4)表达的影响.方法建立锌缺乏动物模型,给断乳后的CD-1小鼠分别喂养缺锌饲料和正常饲料,5周后取大脑海马组织,应用锌金属自显影技术、免疫组织化学技术和Western blotting技术分别进行两组海马锌离子含量和ZnT4表达的定性定量检测.结果锌缺乏5周后,海马各区锌离子含量减少,ZnT4蛋白表达下降.结论锌缺乏能够导致海马锌离子降低和ZnT4表达下调,从而影响细胞内锌稳态,最终影响小鼠的学习记忆能力. 高惠玲 徐赫 刘琰关键词:锌缺乏 锌离子 海马