徐晶晶 作品数:18 被引量:45 H指数:4 供职机构: 苏州大学附属第一医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 江苏省自然科学基金 苏州市科技发展计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
CMTM5表达对多发性骨髓瘤细胞增殖的影响及其机制研究 被引量:4 2019年 目的探索趋化素样因子超家族成员CMTM5表达对多发性骨髓瘤(MM)细胞增殖活性的影响及其机制。方法去甲基化药物地西他滨处理MM细胞系U266细胞,采用实时荧光定量PCR法检测处理前后U266细胞CMTM5、caspase3、caspase9的表达水平并分析其相关性;pcDNA3.1质粒转染U266细胞使CMTM5过表达后,采用CCK-8法检测细胞增殖活性变化。结果①与对照组相比,U266细胞中CMTM5、caspase3和caspase9的mRNA表达水平与地西他滨呈浓度和时间依赖性,随浓度加大和时间延长表达水平增高更加显著(P值均<0.01);U266细胞中CMTM5表达水平与caspase3(r=0.937)、caspase9(r=0.945)呈正相关(P值均<0.001)。②过表达质粒转染的U266细胞,其CMTM5表达水平为133.10±10.35,较空白对照组(0.63±0.14)和质粒对照组(0.64±0.11)显著增高,差异有统计学意义(P值均<0.001);CMTM5过表达U266细胞组72 h细胞增殖活性为0.89±0.08,较对照组(1.32±0.02,t=5.005,P=0.008)和空载质粒组(1.30±0.03,t=4.700,P=0.009)显著降低,差异有统计学意义。结论MM细胞中CMTM5的缺失能够被去甲基化药物地西他滨逆转,其变化水平与caspase3、caspase9呈正相关。过表达CMTM5能够抑制U266细胞增殖。 马媛 史进方 仇惠英 袁靖 章扬 周鹏 徐晶晶 韩清珍关键词:多发性骨髓瘤 DNA甲基化 细胞凋亡 过表达miR-17—92基因簇对前列腺癌细胞生物学特性的影响及机制 被引量:3 2017年 目的探讨过表达miR-17-92基因簇对前列腺癌细胞生物学特性的影响及潜在机制。方法采用过表达miR-17-92基因的质粒转染包装细胞,并构建过表达miR-17-92基因簇的前列腺癌DU145-17-92细胞。采用xCelligence系统实时动态监测DU145-control和DU145-17-92细胞的生长能力,采用Ki-67抗原检测技术和原位末端转移酶标记技术(TUNEL)分别检测DU145-control和DU145-17-92细胞中细胞增殖和凋亡情况,采用流式细胞术分析DU145-control和DU145-17-92细胞的细胞周期,采用Western blot检测DU145-control和DU145-17-92细胞中凋亡相关蛋白和增殖相关蛋白的表达。结果xCelligence系统监测显示,从接种24 h后,DU145-17-92细胞的生长速度显著高于DU145-control细胞(P〈0.01)。细胞培养24、48、72 h后,DU145-control组的Ki-67阳性细胞率分别为(56.57±1.68)%、(85.48±0.26)%和(90.85±2.08)%,DU145-17-92组的Ki-67阳性细胞率分别为(73.64±0.68)%、(93.43±1.23)%和(97.36±0.86)%,两组仅在培养24 h时差异有统计学意义(P〈0.01)。细胞培养24、48、72 h后,DU145-control组的细胞凋亡率分别为(6.76±0.09)%、(14.51±0.86)%和(20.73±1.64)%,DU145-17-92组的细胞凋亡率分别为(1.86±0.15)%、(7.90±0.40)%和(4.92±0.48)%,差异均有统计学意义(均P〈0.01)。Western blot检测显示,DU145-control和DU145-17-92细胞中,Bcl-2家族促凋亡蛋白(BIM)的表达水平分别为0.83±0.00和0.16±0.00, 人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源物(PTEN)蛋白的表达水平分别为0.91±0.00和0.13±0.00,差异均有统计学意义(均P〈0.01)。过表达miR-17-92基因簇促进了蛋白激酶B(Akt)中丝氨酸473位点(p-Akt-473)的磷酸化,但对308位点(p-Akt-308)的磷酸化无明显影响。DU145-control和DU145-17-92细胞中磷酸化细胞外信号调节激酶(p-ERK)蛋白的表达水平分别为0.21±0.01和0.72±0.01,� 周鹏 马亮 周珺 徐晶晶 刘菲 国风关键词:细胞外调节蛋白激酶 荧光原位杂交和免疫组织化学法检测乳腺浸润性导管癌中HER-2基因状态的研究 被引量:6 2017年 目的比较荧光原位杂交(FISH)和免疫组织化学(IHC)两种方法检测乳腺浸润性导管癌人类表皮生长因子受体2(HER-2)基因扩增及与C-erb B-2蛋白表达结果的一致性。方法分别采用FISH和IHC法检测346例乳腺浸润性导管癌组织HER-2基因扩增和C-erb B-2蛋白表达,并对两种方法的结果进行统计学分析。结果 346例乳腺浸润性导管癌中,FISH检测HER-2基因扩增145例(41.9%),无扩增201例(58.1%)。IHC检测显示,C-erb B-2蛋白(-)7例,(+)30例,(++)227例,(+++)82例。按乳腺癌HER-2检测指南,(-)和(+)为阴性结果,(+++)为阳性结果,(++)为不确定病例。全组IHC检测C-erb B-2蛋白阳性表达率为23.7%(82/346)。IHC检测C-erb B-2蛋白(-)的7例患者经FISH检测无HER-2基因扩增,一致率为100.0%。IHC检测C-erb B-2蛋白(+)的30例经FISH检测25例无基因扩增,一致率为83.3%;227例(++)中有65例基因扩增,一致率为28.6%;82例(+++)中有基因扩增75例,一致率为91.5%。IHC和FISH检测HER-2状态的一致率为89.9%,具有高度一致性(Kappa值=0.768,P<0.001)。HER-2基因扩增与年龄、肿瘤大小、组织学分级及淋巴结转移均无关(P>0.05)。结论 IHC和FISH法检测乳腺浸润性导管癌HER-2表达状态有高度一致性。IHC可以作为初步筛查乳腺浸润性导管癌HER-2基因状态的首选检测方法,对于IHC检测结果为(++)的标本建议采用FISH法进一步明确HER-2基因扩增状态。 戴菡珏 陈昊 朱卫东 徐晶晶 郭凌川 国风关键词:乳腺浸润性导管癌 C-ERBB-2蛋白 简易手助器行腹腔镜脾切除加贲门周围血管离断术治疗肝硬化门脉高压症的临床疗效 被引量:4 2018年 目的比较开放、完全腹腔镜和简易手助器腹腔镜脾切除术加贲门周围血管离断术治疗肝硬化门脉高压症伴胃底食管静脉曲张的临床疗效。方法回顾性分析2014年1月至2016年12月苏州大学附属第一医院施行的22例开放脾切除加贲门周围血管离断术(开放组)、18例完全腹腔镜脾切除加贲门周围血管离断术(完全腹腔镜组)和15例简易手助器腹腔镜脾切除加贲门周围血管离断术(简易手助器组)患者的临床资料,比较三组的手术时间、术中出血量、术后住院时间、引流管拔除时间、术后镇痛时间和术后并发症等资料。结果开放组、完全腹腔镜组和简易手助器组平均手术时间分别为(147±36)min、(236±57)min和(157±30)min(F=24.601,P<0.01),中位术中出血量分别为115 m L、212 m L和128 m L(H=8.622,P<0.05);组间比较显示,简易手助器组手术平均时间和中位术中出血量均少于完全腹腔镜组(均数差78.87 min,P<0.01;Bonferroni校正,P<0.05)。三组术后引流管拔除时间分别为(9.1±5.0)d、(6.4±5.2)d和(5.3±1.9)d(F=3.645,P<0.05),术后镇痛时间分别为(4.2±0.9)d、(2.8±1.7)d和(2.8±1.1)d(F=8.739,P<0.01),简易手助器组引流管拔除时间和术后镇痛时间均少于开放组(均数差分别为3.80 d和1.43 d,P<0.05)。简易手助器组无中转开腹,完全腹腔镜组有5例中转开腹(Fisher确切概率法,P<0.05)。三组均无围手术期死亡病例,其术后住院时间及脾脏长径、术后并发症发生率差异均无统计学意义(P>0.05)。结论简易手助器行腹腔镜脾切除术加贲门周围血管离断术具有完全腹腔镜手术的微创性,且兼具术中出血少、手术时间短、中转开腹率低等优势,降低了手术风险和难度;且此手助器制作简易,利于该术式在基层医院中推广应用。 单治理 杨恒颖 孙明浩 徐晶晶 周晓俊关键词:腹腔镜脾切除术 贲门周围血管离断术 肝硬化门脉高压 一例难治性急性T淋巴细胞白血病硼替佐米联合化疗治疗临床分析 被引量:1 2011年 近年来,对于急性T淋巴细胞白血病(T—ALL)的治疗取得了一定的进展,治愈率也有所提高,但是对于复发的T—ALL患者,其预后仍不乐观。蛋白酶体抑制剂硼替佐米通过抑制核因子KB(NF—KB)依赖性的基因转录,已经广泛应用于多发性骨髓瘤(MM)、套细胞淋巴瘤(MCL)以及急性髓系白血病患者(AML)的治疗。然而,蛋白酶体抑制剂是否对于T—ALL患者有疗效以及如何选择适宜的患者值得探讨。 徐晶晶 胡晓慧 沈雅颖 孙爱宁 国风 何广胜关键词:急性T淋巴细胞白血病 硼 联合化疗 慢性淋巴细胞性白血病骨髓基质细胞和正常骨髓基质细胞的比较性分析 被引量:2 2014年 本研究旨在对慢性淋巴细胞性白血病原代骨髓基质细胞(CLL-human bone marrow stromal cells,CLL-hBMSC)和正常原代骨髓基质细胞(normal hBMSC,N-hBMSC)进行比较性分析,为建立CLL-CLL-hBMSC相互作用模型,从而更好地模拟CLL体内环境提供理论依据。从CLL患者和正常供者骨髓中分离单个核细胞,进行原代骨髓基质细胞(hBMSC)培养;采用实时荧光定量PCR(real-time PCR)检测CLL-hBMSC和N-hBMSC表面粘附分子如血管细胞粘附分子1(vascular cell adhesion molecule 1,VCAM-1)和细胞间粘附分子1(intercellular adhesion molecule 1,ICAM-1)的mRNA水平;采用real-time PCR和Western blot法分别检测两类不同来源的hBMSC中淋巴毒素β受体(lymphotoxin beta receptor,LTβR)的mRNA和蛋白质表达水平;采用Western blot法检测NF-κB家族成员的表达并分析细胞因子LTα1β2对NF-κB家族成员表达的影响;建立hBMSC和CLL细胞共培养体系,利用碘化丙啶(PI)染色检测细胞死亡情况。结果表明:从CLL患者骨髓中能成功地培养出贴壁的成纤维样hBMSC。与N-hBMSC相似,表面粘附分子VCAM-1和ICAM-1在两类hBMSC中的mRNA表达一致;两类hBMSC中LTβR的mRNA和蛋白表达水平相似;各NF-κB家族成员在两类hBMSC中都有表达,且蛋白水平无显著性差异;细胞因子LTα1β2可诱导hBMSC中经典性和非经典性NF-κB信号通路的活化;体外实验表明,两类hBMSC都能够有效地支持CLL细胞的体外存活。结论:两类hBMSC培养效率以及细胞形态上无明显差异。LTβR-NF-κB信号分子在两类hBMSC的表达以及活化情况相似。 王欢 周珺 徐晶晶 国风关键词:CLL 骨髓基质细胞 外周血循环肿瘤细胞检测在前列腺癌转移诊断中的探讨 目的:探索运用细胞搜索系统(The CellSearch System,CSS)检测前列腺癌患者外周血循环肿瘤细胞(Circulating Tumor Cells,CTCs),并结合临床和病理资料分析CTCs检测对前列腺... 徐晶晶 金轶晨 王欢 张江磊 唐海英 臧晋 国风高通量测序技术在慢性肾病患者刚地弓形虫感染诊断中的价值 被引量:3 2021年 目的探讨高通量测序[又称下一代测序(NGS)]技术在临床疑难性病原体诊断中的应用价值。方法收集1例慢性肾脏病5期合并腹痛患者的2份腹水和4份腹膜透析液样本,取沉渣进行镜检,并进行常规细菌及真菌培养。采用化学发光法检测血清弓形虫抗体;采用NGS技术检测腹水和腹膜透析液样本中病原体的基因。结果腹水和腹膜透析液样本镜检发现疑似假包囊。常规细菌和真菌培养未见菌落生长,血清弓形虫IgG和IgM抗体均为阴性。通过NGS确证为刚地弓形虫感染。结论NGS技术对临床疑难性病原体感染的诊断具有显著的优势和极大的应用价值。 周毓菁 徐晶晶 徐杰 刘冬梅 何军关键词:刚地弓形虫 腹膜透析液 高通量测序 肿瘤坏死因子受体相关因子2对胃癌细胞生物学行为的影响及其机制 被引量:1 2019年 目的探讨肿瘤坏死因子受体相关因子2(TRAF2)对胃癌AGS细胞生长、迁移和侵袭等细胞生物学行为的影响及机制。方法构建低表达TRAF2的胃癌AGS细胞株(AGS-siTRAF2),采用xCELLigence系统和细胞活力实验检测细胞的生长和增殖情况。采用流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期,采用xCELLigence系统和Transwell实验检测细胞的迁移和侵袭能力。采用Western blot法和TransAM法检测低表达TRAF2对AGS细胞核转录因子κB(NF-κB)信号通路的影响。采用免疫组化法检测胃癌组织中TRAF2的表达,分析TRAF2表达与胃癌临床病理特征的关系和对患者生存的影响。结果xCELLigence系统动态检测结果显示,从8 h开始,AGS-siTRAF2细胞的生长速度明显慢于AGS-sictrl细胞。细胞活力实验显示,培养24、48和72 h时,AGS-siTRAF2细胞的吸光度(A)值分别为51296.00±2631.06、68389.25±6703.21和65559.50±6339.22,均显著低于AGS-sictrl细胞(均P<0.001)。流式细胞术检测结果显示,培养24、48和72 h时,AGS-siTRAF2细胞凋亡率分别为(1.42±0.07)%、(2.98±0.11)%和(1.56±0.03)%,均显著高于AGS-sictrl细胞(均P<0.05);AGS-siTRAF2细胞S期占(23.57±1.12)%,对照组为(19.49±1.19)%,差异有统计学意义(P=0.012)。xCELLigence系统检测显示,从3 h开始,AGS-siTRAF2细胞的迁移能力低于AGS-sictrl细胞。Transwell实验检测结果显示,培养24 h后,AGS-sictrl的细胞数为(121.7±6.7)个,AGS-siTRAF2的细胞数为(84.0±6.6)个,AGS-siTRAF2细胞的迁移细胞数明显少于AGS-sictrl细胞(P=0.002)。xCELLigence系统检测结果显示,从3 h开始,AGS-siTRAF2细胞的细胞指数低于AGS-sictrl细胞。Transwell实验检测结果显示,培养24 h,AGS-sictrl的细胞数为(109.3±3.1)个,AGS-siTRAF2的细胞数为(79.0±6.2)个,AGS-siTRAF2细胞的穿膜细胞数明显少于AGS-sictrl细胞(P=0.002)。Western blot检测结果显示,AGS-siTRAF2细胞中RelA、RelB、p50和p52表达水平均明显低于AGS-sictrl细胞。TransAM检测结果显示,AGS-si 戴菡珏 徐晶晶 李文静 国风关键词:胃肿瘤 细胞生长 迁移 核转录因子KB 右美托咪定对老年股骨头置换手术脑氧代谢和认知功能的影响分析 被引量:1 2024年 目的探讨行股骨头置换手术时,右美托咪定对老年患者认知功能和脑氧代谢率的影响。方法选择2019年9月—2021年9月在苏州大学附属第一医院住院治疗的106例择期拟在全麻下行股骨头置换手术的老年患者作为研究对象,随机数表法分为对照组和观察组两组,每组各53例。观察组麻醉诱导后静脉泵注右美托咪啶至手术结束,对照组相同时点输入等量的生理盐水。比较两组患者手术时间、术中输液量、术中出血量情况;比较两组患者围术期全麻诱导前(T0)、麻醉后10 min(T1)、手术开始后40 min时(T2)、手术结束时(T3)的心率(HR)、平均动脉压(MAP)、动脉血氧含量(CaO_(2))、颈内静脉血氧含量(CjvO_(2))、动-静脉血氧含量(Ca-jvO_(2))、脑氧摄取率(CERO_(2))指标,术前及术后1 d、3 d蒙特利尔认知功能评分量表(MoCA)评分、认知功能障碍(POCD)发生率以及其他不良反应情况。结果观察组患者围术期手术时间、术中输液量、术中出血量与对照组对比无差异(P>0.05);观察组患者HR、MAP指标T1、T2、T3时间点均低于对照组(P<0.05);观察组患者Ca-jvO_(2)、CERO_(2)指标T1、T2、T3时间点均低于对照组(P<0.05);两组患者术后MoCA较术前评分降低;与对照组比较,观察组术后MoCA评分均升高。两组POCD发生率比较,差异有统计学意义(P<0.05);对照组POCD发生率、其他不良事件发生率均高于观察组(P<0.05)。结论右美托咪定能降低股骨头置换术老年患者的脑氧代谢,有利于维持脑的氧供需平衡,对股骨头置换术老年患者有一定的脑保护作用,并能降低老年患者POCD发生率。 顾夏芳 徐晶晶 季君慧关键词:老年股骨头置换术 脑氧代谢