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张艳玲
作品数:
4
被引量:16
H指数:2
供职机构:
上海医科大学上海医学院
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发文基金:
国家高技术研究发展计划
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相关领域:
医药卫生
生物学
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合作作者
宋后燕
上海医科大学上海医学院
陈幼妹
上海医科大学上海医学院
官孝群
上海医科大学上海医学院
朱运松
上海医科大学上海医学院
顾银良
上海医科大学上海医学院
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生物学
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克隆
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T-PA
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单抗
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单克隆
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卵巢细胞
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基因合成
机构
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上海医科大学
作者
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张艳玲
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宋后燕
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朱运松
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陈幼妹
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官孝群
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李群
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涂宣林
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丁皓
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彭鲁英
1篇
顾银良
传媒
3篇
上海医科大学...
1篇
生物化学与生...
年份
4篇
1996
共
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抗D-双聚体单抗轻链可变区基因的克隆
1996年
以分泌小鼠抗人纤维蛋白降解产物D-双聚体单克隆抗体杂交瘤细胞株的mRNA为模板,用小鼠免疫球蛋白轻链可变区基因的通用引物,通过RT-PCR扩增基因,与载体重组后,经酶切鉴定和核苷酸序列分析,证明克隆含抗D-双聚体单抗的轻链可变区基因,长度为330bp.
官孝群
张艳玲
李勇
丁皓
朱运松
宋后燕
关键词:
单克隆抗体
轻链可变区
基因克隆
t-PA指形区、上皮生长因子样区缺失突变体cDNA克隆的构建及其在哺乳动物细胞中的表达
1996年
研究t-PAF区和EGF区在t-PA廓清中的作用。利用本室构建的t-PAcDNA克隆,采用片段重组技术缺失突变指形区(F)、上皮生长因子样区(EGF)和部分三角区(K1)(包括2-106氨基酸),组装了由逆转录病毒长末端重复顺序(LTR)启动和终止的pMDB△FE表达质粒。该质粒转染CHO-dhfr-细胞,阳性克隆的培液中测得纤溶活性,大量培养阳性克隆细胞,从培液中初步纯化了表达产物。结果:以小白鼠为动物模型,测定突变体的血浆半衰期。与天然t-PA相比,△FEt-PA的半衰期延长6倍。结果表明t-PAF区和EGF区在体内t-PA廓清中有显著作用。
李群
官孝群
陈幼妹
张艳玲
朱运松
宋后燕
关键词:
T-PA
EGF
突变体
克隆
水蛭素衍生物基因的克隆及其在哺乳类细胞中的表达
被引量:14
1996年
设计特异性更高的水蛭素新突变体。化学合成编码水蛭素基因,并融会了RGD3肽编码序列,通过连接、克隆、酶切筛选、DNA序列分析,得到真核表达质粒pAPR-HD,表达质粒转染CHL细胞,经G418筛选,获得表达克隆。结果:细胞培液中,重组水蛭素衍生物的活性达到10ATU/ml,并有抗血小板凝集作用。结论:水蛭素新突变体具有预防血栓性疾病的应用前景,但其表达水平和稳定性有待于进一步提高。
顾银良
罗春贞
李凌
张艳玲
宋后燕
关键词:
基因合成
克隆
t-PA cDNA基因在CHO细胞中的稳定表达
被引量:2
1996年
建立稳定表达人组织型纤溶酶原激活剂(tissue-typeplasminogenactivator,t-PA)的细胞株。将t-pAcDNA连接在真核表达载体pcDNA3的HindⅢ位点,构建成重组质粒pcDNA3tPA,用磷酸钙介导的贴壁细胞转染法导入哺乳动物中国仓鼠卵巢(CHO)细胞中,G418筛选培养后形成阳性克隆。结果:培养液中重组t-pA(Recombinantt-pA,rt-pA)活性>6000IU/106细胞d-1.Northern杂交证实t-PAcDNA基因的转录。高表达细胞连续传代10次后,培液中rt-pA活性未见明显变化。结论:转染t-PAcDNA基因的CHO细胞已形成稳定的工程细胞。
彭鲁英
涂宣林
朱慧
张艳玲
陈幼妹
宋后燕
关键词:
T-PA
卵巢细胞
CHO
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