张爱芹
- 作品数：12 被引量：35H指数：3
- 供职机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划黑龙江省科技攻关计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 鸭疫里默氏菌的分离鉴定及其对SPF鸭的致病性研究被引量：2
- 2013年
- 为研究鸭疫里默氏菌(RA)对SPF鸭的致病性,本实验室从不同省份疑似RA感染鸭场分离到4株细菌,经菌落形态观察、染色镜检、生化鉴定确定为RA。药敏试验表明这4个分离株对嗯诺沙星、氧氟沙星和先锋霉素V相对敏感,但对卡那霉素和庆大霉素均耐药。外膜蛋白A(OmpA)基因的克隆测序结果显示,4个RA分离株的ompA基因全长均为1 164 bp,编码387个氨基酸;核苷酸同源性为89%～100%。将5×108cfu的HLG1分离株经颈部皮下接种SPF鸭,病死SPF鸭的心、肝、脾、肺、脑和肾具有典型的病变。RA的分离鉴定技术为SPF鸭群RA的检测和监测以及为培育和净化SPF鸭作为RA的致病机理和疫苗研究中的实验动物模型奠定了基础。
- 帕提古丽.吾马尔郭东春张爱芹刘家森原冬伟姜骞林欢曲连东
- 关键词：鸭疫里默氏杆菌
- 抗鸭多杀性巴氏杆菌外膜蛋白H单克隆抗体的制备及鉴定被引量：1
- 2012年
- 为制备抗鸭多杀性巴氏杆菌(P.multocida)外膜蛋白H(OmpH)单克隆抗体(MAb),本研究以原核表达并纯化的OmpH重组蛋白免疫BALB/c小鼠,将其脾淋巴细胞与SP2/0进行融合,并以重组OmpH蛋白为抗原,通过间接ELISA方法筛选出3株能够稳定分泌抗OmpH的杂交瘤细胞株(1A9、1E9、3G7)。MAb亚类鉴定表明,1A9、1E9和3G7均为IgG1亚类,轻链均为κ链。经western blot和间接免疫荧光检测证明3株MAb均具有良好的特异性。这些抗OmpH MAb的获得,为鸭P.multocida病的快速、有效、敏感的诊断方法建立奠定了基础。
- 卢艳郭东春张爱芹刘家森原冬伟姜骞林欢崔玉东曲连东
- 关键词：多杀性巴氏杆菌单克隆抗体
- 产肠毒素大肠杆菌多重PCR检测方法的建立被引量：11
- 2012年
- 为快速检测和鉴定产肠毒素大肠杆菌(ETEC)菌毛(K88和K99)和毒素(STa)基因,本研究设计合成了针对K88、K99和STa基因的3对特异性引物,对K88、K99和STa基因扩增条件进行优化,建立了检测K88、K99和STa的多重PCR方法。该方法对K88、K99和STa基因的扩增产物分别为237 bp,314 bp和166 bp;此外,该方法具有良好的灵敏性和特异性。本实验建立的多重PCR方法为致幼畜腹泻ETEC的检测提供了快速准确方法。用所建立的多重PCR方法对实验室分离的23株大肠杆菌进行检测,结果 2株为K99/STa阳性,1株为STa阳性。
- 曲泽慧陈佩佩张爱芹郭东春师东方曲连东
- 关键词：产肠毒素大肠杆菌多重PCRK88菌毛
- 多杀性巴氏杆菌prfA基因的序列分析与原核表达被引量：1
- 2014年
- 为探索多杀性巴氏杆菌的致病机理，采用PCR方法分别扩增了家兔源和禽源多杀性巴氏杆菌C51—17、Pm898、Pm8916、Pm901、Pr09616、PmZM、PmQin菌株的prfA基因，并对其进行序列分析。将C51—17株的prfA基因克隆到质粒pET30a中，将重组表达载体pET30a—prfA转化到大肠杆菌BL21（DE3）pLysS感受态细胞中，经IPTG诱导表达，进行SDS—PAGE分析和Western—blot分析。结果显示，这7株菌株与GenBank登录的3株多杀性巴氏杆菌之间prfA基因在核苷酸水平上的同源性为95．6％～100％，在氨基酸水平上的同源性为98．9％～100％。诱导表达的重组蛋白PrfA的分子质量约为45．6ku，与预期的大小一致，以可溶性形式表达。重组蛋白PrfA可与家兔抗多杀性巴氏杆菌阳性血清反应，具有良好的反应原性。
- 李影郭东春王淑亚张爱芹胡晓亮王雅静刘家森姜骞曲娟娟曲连东
- 关键词：多杀性巴氏杆菌原核表达
- 多杀性巴氏杆菌△purF突变株的构建及其生物学特性的研究
- 多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida,P.multocida)作为巴氏杆菌属最主要的代表菌,能够引起多种动物和人感染的人兽共患细菌传染病,其毒力因子主要有荚膜、脂多糖、鞭毛和粘附素、毒素、铁调蛋白、...
- 郭东春张爱芹王淑亚刘培欣刘家森姜骞李影曲连东
- 关键词：动物医学多杀性巴氏杆菌生物学特性
- 文献传递
- 多杀性巴氏杆菌Δhfq突变株的构建及转录组分析
- 本研究利用KanR表达盒的正向筛选突变体技术构建了dhfq突变株，突变株对小鼠的致病性降低;转录组测序表明:Hfq在多杀性巴氏杆菌中起调控作用。本研究为下一步验证Hfq蛋白对其他蛋白的调控作用机制奠定基础。
- 郭东春李影张爱芹刘培欣王淑亚刘家森姜骞曲连东
- 关键词：多杀性巴氏杆菌突变株转录因子
- 文献传递
- 多杀性巴氏杆菌PurF蛋白的原核表达及多克隆抗体制备被引量：2
- 2013年
- 为了获得多杀性巴氏杆菌PurF蛋白及其多克隆抗体,通过PCR扩增了多杀性巴氏杆菌C51-17株purF基因,将其克隆到表达载体pPROEX-HTa中,构建重组表达质粒pHT-PurF,转化至大肠埃希菌BL21(DE3)感受态细胞中,经IPTG诱导表达。SDS-PAGE检测表明,获得重组蛋白分子质量约56.5ku,主要以包涵体形式存在;Western blot检测表明,表达的蛋白可与多杀性巴氏杆菌制备的高免血清发生特异性反应。将制备的重组蛋白免疫Balb/c小鼠制备多克隆抗体,ELISA检测血清抗体效价,结果显示制备的多克隆抗体滴度达到1∶128 000,Western blot表明可与多杀性巴氏杆菌PurF蛋白发生反应。本研究制备了多杀性巴氏杆菌的PurF蛋白及其多克隆抗体,为进一步研究PurF蛋白在多杀性巴氏杆菌致病中的作用奠定了基础。
- 张爱芹郭东春刘家森原冬伟姜骞林欢崔玉东曲连东
- 关键词：多杀性巴氏杆菌原核表达多克隆抗体
- 多杀性巴氏杆菌aroA基因缺失突变株的构建及鉴定被引量：10
- 2012年
- 【目的】构建多杀性巴氏杆菌aroA基因缺失突变株,并验证其致病性。【方法】采用正向筛选同源重组技术构建多杀性巴氏杆菌aroA基因缺失突变株,利用PCR对突变株进行鉴定,分析其遗传稳定性、生长特性和致病性。【结果】成功构建多杀性巴氏杆菌aroA基因缺失突变株,连续传代20代,遗传稳定;突变株体外生长曲线表明,在前6h生长速度稍慢于亲本菌,随后两者生长速度一致。对小鼠的致病性试验表明:经腹腔注射aroA基因缺失突变株在1.0×106 CFU对小鼠无致死性,而亲本菌株在1.0×102 CFU对小鼠是致死性的。【结论】本研究获得多杀性巴氏杆菌aroA基因缺失突变株,对小鼠的致病性是减弱的。多杀性巴氏杆菌突变株的构建有助于研究其致病机理。
- 郭东春卢艳刘家森原冬伟张爱芹姜骞林欢司昌德曲连东
- 关键词：多杀性巴氏杆菌基因缺失株毒力
- 鸭疫里氏杆菌外膜脂蛋白的表达及其免疫原性的分析被引量：1
- 2013年
- 为掌握鸭疫里氏杆菌Riean1110基因表达产物的免疫原性,根据GenBank上公布的鸭疫里氏杆菌DSM15868株(登录号为NC014738)的基因序列设计1对特异性引物,扩增了血清1型鸭疫里氏杆菌HLG1株的Riean1110基因。将其克隆到表达载体pPRO-EX-Htb中,构建重组表达质粒pHtb-RA1110,转化大肠杆菌BL21(DE3)pLysS,用IPTG诱导重组蛋白的表达。SDS-PAGE分析表明,诱导表达的目的蛋白的分子质量大约为56ku,与预期大小相符,以包涵体形式存在。Western-blot分析表明,诱导的重组蛋白能特异性地识别鸭疫里氏杆菌阳性血清,具有良好的抗原性。用纯化的Riean1110蛋白免疫SPF鸭,经ELISA检测,可产生高水平的抗体。结果表明,制备的重组Riean1110蛋白为建立鸭疫里氏杆菌的血清学检测方法奠定了基础。
- 帕提古丽.吾马尔郭东春张爱芹刘家森原冬伟姜骞林欢司昌德曲连东
- 关键词：鸭疫里氏杆菌原核表达免疫原性
- 多杀性巴氏杆菌△purF构建及致病性和免疫原性的研究
- <正>多杀性巴氏杆菌(Pasteurellarnultocida,P.multocida)作为巴氏杆菌属最主要的代表菌,能够引起多种动物和人感染,主要引起的动物疾病包括禽霍乱、猪肺疫、猪萎缩性鼻炎等。利用转录序列选择性捕...
- 郭东春王林柏张爱芹刘家森姜骞曲连东
- 关键词：多杀性巴氏杆菌免疫原性
- 文献传递
