张梅
- 作品数:49 被引量:110H指数:6
- 供职机构:安徽医科大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金安徽省自然科学基金安徽省高校省级自然科学研究项目更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学经济管理文化科学更多>>
- 广深铁路股份有限公司货币资金内部控制研究——以《萨班斯—奥克斯利法案》404条款为视角
- 货币资金由于其可直接用于个人消费,因此它成为不法分子贪污、挪用和盗窃的对象。近年来,非法挪用资金、设立小金库的案例时有发生,其金额之巨大、涉及人数之多,令人瞠目。此类案件产生的重要原因是在于货币资金内控无力,故建立健全的...
- 张梅
- 关键词:货币资金管理内部控制《萨班斯-奥克斯利法案》
- 文献传递
- 华蟾素调控PI3K/AKT通路逆转卵巢癌A2780/DDP细胞顺铂耐药的作用机制
- 2024年
- 目的研究华蟾素(CBG)对人卵巢癌细胞顺铂耐药的逆转作用和机制。方法A2780细胞株及其顺铂耐药细胞株A2780/DDP是临床常见的卵巢癌细胞,故选择这两种细胞株作为研究对象。通过CCK-8法检测细胞活力,平板克隆和5-乙炔基-2′脱氧尿嘧啶核苷(EdU)实验检测细胞的增殖能力,赫斯特染色(Hoechst)法观察细胞凋亡情况,细胞划痕实验和Transwell实验评估细胞的迁移和侵袭能力,Western blot和定量逆转录PCR(RT-qPCR)法检测磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶(PI3K/AKT)信号通路和上皮-间质转化(EMT)的相关蛋白和mRNA的表达差异。结果与A2780细胞相比,A2780/DDP细胞的耐药指数分别约为5.636、5.864、5.695,采用CBG(2、4、6 mg/ml)处理A2780/DDP耐药细胞后,逆转耐药指数分别为1.617、2.570、3.461。CBG呈浓度依赖性地上调细胞凋亡水平、抑制细胞的增殖、迁移和侵袭能力(P<0.05)。Western blot结果显示:与A2780细胞相比,对照组(A2780/DDP)细胞中P-PI3K/PI3K和P-AKT/AKT的蛋白水平相对比值以及N钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、蜗牛蛋白(Snail)的蛋白表达更高,E钙黏蛋白(E-cadherin)蛋白表达更低(t_(P-PI3K/PI3K)=8.115,t_(P-AKT/AKT)=17.62、t_(N-cadherin)=6.126、t_(Vimentin)=4.001、t_(Snail)=17.333、t_(E-cadherin)=4.620,P<0.01);随着CBG剂量升高,耐药细胞中的P-PI3K、P-AKT、N-cadherin、Vimentin、Snail的蛋白表达水平降低,而E-cadherin的蛋白表达量增加(F_(P-PI3K)=268.5、F P-AKT=190.5、F_(N-cadherin)=24.02、F_(Vimentin)=57.65、F_(Snail)=87.24、F_(E-cadherin)=135.8,P<0.05)。RT-qPCR结果显示:随着CBG浓度增加,PI3K、AKT、N-cadherin、Vimentin、Snail的mRNA表达水平随之降低,相反E-cadherin的mRNA表达水平逐渐升高(F PI3K=101.1、F_(AKT)=558.3、F_(N-cadherin)=86.97、F_(Vimentin)=105.9、F_(Snail)=85.71、F_(E-cadherin)=80.96,P<0.01)。结论CBG具有逆转卵巢癌A2780/DDP细胞株顺铂耐药的作用,其机制可能与CBG调控PI3K/AKT信号通路和
- 舒美玲吴悦叶映泉张爽爽张梅
- 关键词:华蟾素卵巢癌顺铂耐药逆转耐药PI3K/AKT
- 丹参联合骨髓间充质干细胞移植治疗新生鼠缺氧缺血性脑损伤的实验研究被引量:7
- 2011年
- 目的研究骨髓间充质干细胞(MSCs)植入缺氧缺血性脑损伤(HIBD)新生大鼠脑后,植入MSCs在脑组织中的迁移、神经细胞抗原分化率的变化,探讨丹参联合MSCs移植治疗新生儿HIE的可行性。方法将36只7日龄新生SD大鼠随机分为正常对照组(8只)、HIE组(8只)、MSCs移植组(10只)、MSCs移植+丹参组(10只)。在MSCs移植后18d取脑组织后做石蜡切片,免疫组织化学法检测并计数进入脑组织的MSCs,观察植入细胞在脑组织中的分布、迁移;免疫荧光双标记法检测植入细胞神经元巢蛋白(Nestin)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达,观察其向神经细胞的分化,并进行组间比较。结果植入MSCs主要分布于HIBD组左侧大脑皮质区,MSCs移植+丹参组标本中MSCs更多向右侧大脑半球迁移,且分布范围更广,与MSCs移植组比较,不同脑组织层面、两侧大脑半球MSCs计数均有统计学差异(Pa<0.05);免疫荧光双标记法观察MSCs主要在左侧大脑皮质、海马等部位分化为神经细胞,Nestin、NSE、GFAP均可表达。MSCs移植+丹参组植入MSCs的Nestin、NSE分化率更高,且有统计学意义;MSCs移植组和MSCs移植+丹参组GFAP分化率比较差异无统计学意义。结论 MSCs植入HIBD新生大鼠脑组织后能存活,并在脑组织中移行,植入MSCs主要在HIBD新生鼠左侧脑皮质、海马等部位分化为神经细胞,表达Nestin、NSE及GFAP,加用丹参后可促进植入MSCs表达Nestin及NSE,对GFAP表达无影响。
- 张德凤潘家华张梅黄大可
- 关键词:间充质干细胞缺氧缺血性脑病丹参
- 高迁移率族蛋白1对奥沙利铂诱导的SGC-7901胃癌细胞凋亡的影响被引量:1
- 2011年
- 目的构建pDsRED2-HMGB1重组质粒,探讨转染高迁移率族蛋白1(HMGB1)基因对奥沙利铂诱导的SGC-7901细胞凋亡的影响。方法用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)扩增HMGB1 mRNA全编码序列,将PCR产物插入到pD-sRED2-N1载体的Xho I和EcoR I位点,构建pDsRED2-HMGB1重组质粒;通过脂质体法转染SGC-7901胃癌细胞,荧光显微镜检测HMGB1红色荧光融合蛋白表达。Westernblot鉴定HMGB1蛋白表达。应用流式细胞仪(Annexin-V/PI标记)分析HMGB1过表达对奥沙利铂诱导胃癌细胞凋亡的影响。结果成功构建真核表达质粒pDsRED2-HMGB1,转染SGC-7901细胞后,荧光显微镜下可见细胞内有HMGB1红色荧光融合蛋白的表达;流式细胞术检测发现转染pD-sRED2-HMGB1后SGC-7901细胞凋亡水平较转染pDsRED2-N1组下降22.4%。结论 HMGB1过表达可抑制奥沙利铂诱导的SGC-7901胃癌细胞凋亡。
- 沈磊胡梅琮吴亚欧张梅李群桂丽胡春松张林杰黄保军
- 关键词:细胞凋亡质粒重组融合蛋白质类
- 间接免疫荧光法筛选抗呼吸道合胞病毒单克隆抗体及其性质的初步鉴定
- 目的:人呼吸道合胞病毒(Human Respiratory Syncytial Virus,RSV)是造成世界范围内婴幼儿严重下呼吸道感染最重要的病毒病原,同时也可导致老年人、免疫功能低下者严重的呼吸道感染。病毒感染机体...
- 张梅
- 关键词:人呼吸道合胞病毒间接免疫荧光单克隆抗体
- 文献传递
- 乳腺癌MCF-7细胞系中侧群细胞分选及其生物学特性被引量:1
- 2012年
- 目的分离乳腺癌MCF-7细胞系中的侧群细胞(sP)并观察其生物学特性。方法利用流式细胞荧光分选法将乳腺癌MCF-7细胞系分成SP和非SP细胞两个亚群。对两个亚群细胞采用软琼脂克隆形成实验观察其增殖能力。结果MCF-7细胞株中分选出SP细胞占(6.5±0.4)%;SP细胞的体外克隆形成率为(38.5±9.4)%,高于非sP细胞的(8.4±2.6)%(t=5.34,P〈0.05)。结论乳腺癌MCF-7细胞中的SP细胞富集了乳腺癌干细胞,其增殖能力强于非SP细胞,表明SP表型的肿瘤细胞在乳腺癌的生长中具有重要的地位。
- 孙鑫李平张梅陈娇
- 关键词:侧群细胞增殖
- 石斛酚对高糖诱导的人视网膜微血管内皮细胞的影响
- 目的:探讨石斛酚对高糖诱导的人视网膜微血管内皮细胞(Human retinal microvascular endothelial cells,HRMECs)中醛糖还原酶(Aldose reductase, AR)通路,...
- 张梅
- 关键词:糖尿病视网膜病变醛糖还原酶氧化应激
- 人呼吸道合胞病毒M蛋白非复制型重组腺病毒的构建和鉴定被引量:2
- 2008年
- 人呼吸道合胞病毒(human respiratory syncytial virus,RSV)基质蛋白(matrix protein,M)在RSV形态发生上具有重要作用,因含有CTL及CD4+T细胞抗原表位,在疫苗研究上具有一定意义。为此,应用RT-PCR方法从感染RSV的HEp-2细胞中扩增获得M蛋白基因,构建了含M基因的非复制型重组腺病毒并进行表达和鉴定。基因序列分析显示RSV M基因仅有一处碱基发生错义突变。获得的非复制型重组腺病毒FGAd/RSVM感染293细胞,观察到细胞出现CPE,RT-PCR发现M基因有转录,Western blotting及间接免疫荧光分析检测到M蛋白。成功克隆A亚型RSV Long株M基因,并获得一株可表达A亚型RSV M蛋白的非复制型重组腺病毒FGAd/RSVM,可用于体内研究观察其免疫效果及免疫保护作用。
- 尚智何金生张梅虞结梅陆燕燕谢灿唐倩魏薇
- 关键词:人呼吸道合胞病毒M蛋白
- 3-溴丙酮酸对人肺腺癌A549细胞迁移、侵袭能力及转移相关蛋白表达水平的影响
- 目的: 观察3-溴丙酮酸(3-Bromopyruvate ,3-BrPA)对肺腺癌A549细胞迁移、侵袭能力及转移相关蛋白波形蛋白(Vimentin)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达能力的影响。 方法: 设不...
- 张梅
- 关键词:肺腺癌
- 呼吸道合胞病毒分泌型融合蛋白的真核表达和纯化
- 2009年
- 目的研究人呼吸道合胞病毒(human respiratory syncytial viruse,RSV)分泌型融合蛋白(secreted fusion protein,sV)基因在杆状病毒中的表达及纯化。方法根据编码F蛋白的基因序列设计引物,以PCR方法将F蛋白基因的跨膜区和胞质区核酸序列替换为6×His核酸序列,获得COOH’端带有His标签的重组SF-His蛋白编码基因,利用Bac—to—Bac杆状病毒表达系统,构建可表达sF蛋白的重组杆状病毒,用脂质体Cellfeetine reagent转染sf9细胞,实现sF在sf9细胞中的表达,Ni柱亲和层析纯化sF蛋白。结果成功获得了sF-His编码基因,构建的重组杆状病毒可高效表达sF,Ni-柱纯化后sF的浓度为1.084mg/ml,纯度达90%以上。结论杆状病毒系统是制备sF的有效方法,纯化的sF蛋白为RSV新型疫苗及单克隆抗体和诊断试剂等研究奠定了基础。
- 付远辉魏薇何金生郑娴娴王小波唐倩张梅屈建国洪涛
- 关键词:糖蛋白类