张建华
- 作品数:4 被引量:3H指数:1
- 供职机构:华中师范大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家教育部博士点基金武汉市重点科技攻关计划项目更多>>
- 相关领域:农业科学生物学文化科学更多>>
- 柑橘绿霉菌CYP51定点突变分析及新型杀菌剂的筛选
- 柑橘是重要的经济作物,柑橘采后因病害损失巨大。柑橘青绿霉病是柑橘果实在贮运期间发生的最严重病害。据统计柑橘青绿霉病造成的损失一般为10%,严重的高达30%以上,对中国的柑橘产业造成重大的损失。甾醇14α-去甲基化酶(CY...
- 张建华
- 关键词:构效关系杀菌剂药剂筛选
- 高考英语对高中英语教学影响的研究——以龙山高级中学为例
- 考试对教学有着重大影响,语言考试对教学的影响,在应用语言学上被称为反拨作用,它被广泛地认为对语言教学具有很大的影响力。这种影响从效果上分为积极影响和消极影响。积极影响能够促进语言教学发展进步,而消极的影响则可能对教学的进...
- 张建华
- 关键词:高考英语高中英语教学质量语言应用能力
- 文献传递
- 昆明鼠乙酰胆碱酯酶基因克隆与表达被引量:1
- 2008年
- 乙酰胆碱酯酶(AChE)作为有机磷和氨基甲酸酯类农药的最适反应底物,在农药残留的快速检测中得到广泛应用,本实验根据家鼠AChE全基因序列设计并合成一对特异性引物,对昆明鼠脑组织AchE进行RT-PCR扩增,扩增产物经T-载体克隆、酶切鉴定和测序分析,结果表明:昆明鼠AChE编码序列长1 845 bp.经BLAST比对发现该序列与已报道序列(No.BC046327)的同源性为99.78%.构建原核重组表达质粒pET-AChE,并在E.coli中得到高效表达,表达蛋白的分子量约为68 000.运用改进的Ellman法成功检测到重组表达蛋白的活性.
- 张立媛李娜张建华杨俊忠张华杨雪婷袁永泽刘德立
- 关键词:乙酰胆碱酯酶RT-PCRCDNA克隆
- 基于柑橘绿霉菌CYP51同源模建的定点突变与抗性机制分析被引量:2
- 2012年
- 为阐明杀菌剂与PdCYP51的相互作用及其抗性机制,基于最新解析的真核生物人类的CYP51晶体结构,同源模建了PdCYP51的三维结构,并选取商品化的杀菌剂烯唑醇进行分子对接,预测影响PdCYP51与烯唑醇相互作用的关键氨基酸。采用定点突变技术获得了PdCYP51-Y112H、F120L、F120D和S309A 4种突变体(PdCYP51m)。结果表明,突变体蛋白PdCYP51-Y112H、F120L、F120D和S309A表达量均有不同程度的变化,PdCYP51-Y112H和F120L与未突变蛋白表达量相当,而PdCYP51-F120D和S309A表达量增加。4种突变体与杀菌剂的结合能力降低,其结合常数分别为1.28、0.18、1.03和1.31μmol/L,均大于未突变PdCYP51的0.12μmol/L。表明这些氨基酸是杀真菌剂烯唑醇与PdCYP51结合的关键氨基酸,PdCYP51与烯唑醇形成的疏水性空腔和稳定配体杀菌剂分子的作用力是酶蛋白与杀菌剂结合的重要因素。
- 张建华熊丽夏诗慧王金龙李倩刘德立
- 关键词:同源模建分子对接定点突变光谱分析