宋慧 作品数:68 被引量:268 H指数:10 供职机构: 广西医科大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 广西壮族自治区自然科学基金 广西科技厅资助项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 理学 轻工技术与工程 文化科学 更多>>
广西眼镜蛇蛇毒神经生长因子在大肠杆菌中的表达 被引量:7 2007年 目的采用基因工程技术,在大肠杆菌(E.coli)中表达广西眼镜蛇(黑眼镜蛇)蛇毒神经生长因子(NGF)成熟蛋白并检测其生物活性。方法将天然广西眼镜蛇蛇毒的NGF蛋白基因克隆至融合表达载体pET-40b(+)中,以C端融合了6个组氨酸的形式在E.coli BL21(DE3)通过异丙基硫代半乳糖苷诱导表达NGF蛋白。超声破菌后,将上清液经Ni^(2+)-NTA柱纯化,收集并冻干NGF融合蛋白,用蛋白印迹法分析其NGF抗原活性,并通过促PC12细胞生长法观察其生物活性。结果经蛋白印迹分析可知在38 ku处的条带具有NGF抗原活性。加入天然蛇毒NGF,生长轴突的PC12细胞为(83±3)%,重组品为(21±3)%,表明经纯化的融合蛋白具有NGF生物活力,但活性弱于天然蛇毒NGF。结论在大肠杆菌中可以表达出有活性的蛇毒NGF蛋白。 宋慧 张学荣 周元聪 江涛 舒雨雁关键词:眼镜蛇 蛇毒 神经生长因子 蛋白表达 三七总皂苷对海马CA1区长时程增强效应的影响 被引量:12 2007年 三七总皂苷(Panaxnotoginsengsaponins,PNS)是从传统中药三七的根中提取的主要有效成分,具有改善血液循环、耐缺氧、改善记忆力、抗衰老等多方面的生理活性。本研究采用“盲法”全细胞膜片钳技术观察PNS对大鼠海马CA1区锥体神经元长时程增强效应(LTP)的影响,以分析其增强学习记忆功能的神经电生理机制。以断头法分离Wistar大鼠(3-4周)海马半脑,用切片机切出400μm厚度的海马脑片,以全细胞电压钳制方式记录CA1区锥体细胞的兴奋性突触后电流(EPSCs),给予高频刺激HFS(100 Hz)诱导LTP,分析PNS对大鼠海马CA1区EPSCs和LTP的影响。结果表明,PNS(0.1-0.4 g·L^-1)能显著抑制EPSCs(P〈0.05),且对海马CA1区LTP无易化作用;但PNS(0.04-0.05 g·L^-1)不影响CA1区的EPSCs基础突触传递(P〉0.05),却可以增强HFS诱发的LTP(P〈0.05)。上述结果提示,PNS(0.04-0.05 g·L^-1)能易化海马CA1区锥体神经元的长时程增强效应,该作用应是其增进学习记忆力的神经电生理机制。 周燕 宋慧 宁宗 田磊 徐林 莫宁关键词:兴奋性突触后电流 突触可塑性 长时程增强 海马 睾丸组织中ACRBP的表达及启动子CpG位点的甲基化分析 2011年 目的了解人睾丸组织中ACRBP的表达及其启动子CpG位点的甲基化状态,为探讨该基因表达机制奠定基础。方法运用免疫组化法研究睾丸组织中目的蛋白定位;结合生物信息学分析该基因启动子CpG位点序列;通过Bisulfite PCR测序法(BSP)分析目的基因CpG位点的甲基化状态。结果免疫组化显示精子与精子细胞及部分的精原细胞和精母细胞表达目的蛋白。对ACRBP启动子序列(转录起始点-127~+110 bp)进行BSP扩增测序,发现该区域共有24个CpG位点,其中仅有3个出现甲基化,其甲基化频率为1.67%。结论生精小管中ACRBP蛋白呈区域性的阳性反应,可能与生精小管内精子发生的不同步性有关;ACRBP启动子CpG位点低甲基化可能与该基因表达的机制有关。 黄巍 范蓉 李希圣 郭文文 罗彬 宋慧 肖绍文 谢小薰关键词:睾丸 甲基化 广西中华眼镜蛇的蛇毒蛋白natrin对过氧化氢损伤乳大鼠原代心肌细胞钙超载及相关基因表达的影响 2016年 目的观察广西中华眼镜蛇(Naja naja atra)的蛇毒蛋白(natrin)对SD大鼠原代心肌细胞钙超载的影响,并探讨natrin对心肌的保护作用及对心肌钙、钾离子通道影响的可能作用机制。方法分别用natrin 5,25和125 mg·L^-1预处理原代SD乳大鼠心肌细胞24 h后,再以H2O20.3 mmol·L^-1诱导损伤,以Fluo-3为Ca^2+荧光探针,应用激光共聚焦显微镜动态检测细胞内游离钙离子浓度变化;另外用natrin 5,25和125 mg·L^-1及维拉帕米(Ver)5 nmol·L^-1预处理24 h后,再以H2O20.3 mmol·L^-1诱导损伤15 min,FQPCR法检测心肌细胞钙离子通道Cav1.2,Calm,Ry R2和钾离子通道Kir6.2的m RNA表达情况。结果激光共聚焦显微镜检测结果发现,与正常对照组比较,H2O2作用3-15 min心肌细胞内钙荧光平均峰值增强49.37%(P〈0.01);而给予natrin 5,25,125 mg·L^-1预处理24 h组该平均峰值分别增强27.52%,12.71%和5.15%,显著低于H2O2组(P〈0.01)。PCR结果表明,H2O2损伤组其心肌细胞Cav1.2,Calm,Ry R2及Kir6.2的m RNA表达分别为正常对照组的1.78倍,1.26倍,4.34倍和0.79倍(P〈0.01);而给予natrin及维拉帕米干预组,细胞Cav1.2,Calm和Ry R2的m RNA表达较H2O2损伤组均显著降低(P〈0.01),而Kir6.2的m RNA表达较H2O2损伤组显著升高(P〈0.05)。结论广西中华眼镜蛇natrin可明显减轻H2O2所致的心肌细胞钙超载,对心肌细胞过氧化损伤有良好的保护作用,其作用机制可能与降低H2O2损伤的心肌细胞的Cav1.2,Calm和Ry R2的m RNA表达及增加Kir6.2的m RNA表达有关。 梁永红 苏延旭 马兴才 张洪也 蒋兴明 陆世银 苏志恒 郑华 宋慧关键词:钙超载 肌细胞 药学专业有机化学实验课的一些心得 2002年 宋慧 李福森关键词:有机化学实验课 药学专业 化学实验能力 教师 计算机辅助教学 乙酰苯胺 广西眼镜蛇毒中Natrin的克隆及在E.coli中的表达 2012年 目的采用基因工程技术,在大肠杆菌中表达广西眼镜蛇毒中Natrin成熟蛋白。方法将来源于广西眼镜蛇毒的Natrin蛋白的基因克隆至融合表达载体pMAL-c2x中,以N端融合了麦芽糖结合蛋白的形式在大肠杆菌BL21(DE3)通过异丙基硫代半乳糖苷诱导表达Natrin蛋白。超声破菌后,将上清液经Amylose树脂柱上纯化后,收集并冻干Natrin融合蛋白,利用蛋白印迹分析其是否有Natrin抗原活性。结果经蛋白印迹分析可知在50 kD处的条带具有Natrin抗原活性。结论在大肠杆菌中可以表达出Natrin蛋白。 宋慧 马兴才 周燕 焦杨 周元聪 舒雨雁关键词:蛇毒 蛋白表达 基于代谢组学建立阿莫西林浓度对嗜酸乳杆菌影响的方法 本发明公开了一种基于代谢组学建立阿莫西林浓度对嗜酸乳杆菌影响的方法,包括:以不同浓度阿莫西林给药后的嗜酸乳杆菌胞内代谢物进行液质联用分析,得到代谢物的碎片信息;通过建立正交偏最小二乘法判别分析模型对代谢物的碎片信息进行筛... 苏志恒 郭玥 刘西 黄慧敏 宋慧 郑华 梁永红 冯氏岁 蒙明薇文献传递 基于组效关系的壮药岩黄连提取物抑制人肝癌细胞SMMC-7721活性成分辨识研究 被引量:8 2016年 目的基于高效液相色谱(HPLC)分析方法,结合人肝癌SMMC-7721细胞模型,通过组效关系研究,寻找与药效活性相关的成分。方法通过分析岩黄连正交9个提取物样品,以HPLC对岩黄连提取物进行成分表征,确定了20个共有峰。采用MTT法检测岩黄连提取物抑制人肝癌细胞SMMC-7721活性,以抑制率为评价指标,将其与HPLC图共有色谱峰的相对峰面积进行正交投影的偏最小二乘法(orthogonal partial least squares,OPLS)分析,根据变异权重系数(variable importance in the projection,VIP)辨识显著活性成分。结果结果表明,岩黄连提取物中11个共有峰与其抑制SMMC-7721细胞活性显著相关,贡献较大的共有峰依次为15>12>20>1>17>10>4>2>5>11>3,其中15号与17号共有峰分别为脱氢卡维丁与巴马汀。经细胞试验验证,发现0.20,0.25,0.30mg·ml-1脱氢卡维丁组细胞增殖抑制率分别为(69.67±1.0)%,(72.47±0.3)%,(73.08±1.1)%,0.20,0.30,0.40mg·ml-1巴马汀组细胞增殖抑制率分别为(36.14±2.8)%,(66.03±0.7)%,(70.66±0.6)%。结论通过组效关系研究发现岩黄连提取物中脱氢卡维丁和巴马汀对肝癌SMMC-7721细胞的增殖具有抑制作用,提示这两个化学物质可能是岩黄连抗肝癌作用的潜在活性成分。 唐超玲 郑华 王捷 宋慧 陆世银 程邦 吴方 张洪也 阮俊翔 梁永红 苏志恒关键词:人肝癌细胞SMMC-7721 脱氢卡维丁 浅谈多媒体在大学化学教学中的作用 被引量:9 2005年 宋慧关键词:大学化学 个性心理特征 多媒体技术 多媒体教学手段 班级授课制 教学方式 选择性识别平行性G-四联体的方酸类近红外荧光探针的研究 2019年 G-四联体是抗肿瘤药物筛选的一个重要靶点.开发针对某些拓扑结构的G-四联体荧光探针对于研究其结构和生物学功能具有十分重要的意义.设计、合成了四个方酸类花菁荧光染料即CSTS,CSBE,CSEM和CSBM,并检测了其对不同类型DNA的选择性识别作用.结果表明,所合成的四个化合物在缓冲溶液中几乎没有荧光发射,加入正平行G-四联体之后荧光增强大约1000倍;而加入反平行G-四链体或单双链DNA荧光仅仅增强几十倍,说明其可以特异性识别平行G-四联体.但流式实验结果显示,CSTS不能透过细胞膜,同时存在高荧光背景的缺点,因此无法应用于活体分析.而另外三个不带阴离子侧链的衍生物则容易进入细胞,进入细胞的难易顺序为CSBE>CSEM>CSBM>CSTS.高选择性、低背景荧光和易进入细胞等优点使CSBE具有作为近红外荧光探针检测生物样品中正平行G-四联体的潜力. 王雅萱 宋慧 罗金荣 李玮 张玲玲 魏涌标关键词:方酸衍生物 近红外 荧光探针