周琛 作品数:12 被引量:43 H指数:3 供职机构: 中山大学附属第一医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 广东省自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
小鼠骨髓间质干细胞的体外培养与多向分化潜能的鉴定 被引量:7 2008年 【目的】建立小鼠骨髓间质干细胞(MSC)体外培养、纯化、扩增方法,并进行体外定向诱导条件下的多向分化潜能鉴定。【方法】取3~18月雄性C57BL/6J小鼠(共48只)骨髓细胞,贴壁培养后,用免疫磁珠法纯化,观察纯化后的细胞形态,对3、10、20代的MSC进行细胞生长曲线绘制;并检测细胞在不同诱导条件下向成骨细胞、脂肪细胞、肌肉细胞的分化能力。【结果】小鼠MSC在体外可以诱导成成骨细胞、脂肪细胞、肌肉细胞。MSC连续传代培养达30代以上,细胞的形态、抗原表达无改变,并保持多向分化潜能。【结论】该方法获得的MSC具有高度增殖、多向分化潜能、生物学特性稳定的特点。 张为西 陈松林 姚晓黎 周琛 卢锡林 Xingming Shi关键词:小鼠 骨髓间质干细胞 体外培养 多向分化潜能 mdx小鼠与C57小鼠骨髓基质细胞体外分化能力的比较 被引量:3 2010年 背景:肌营养不良症是一种渐进性致死性X连锁隐性遗传性肌肉疾病,目前无特效治疗。肌营养不良症模型鼠(mdx小鼠)的骨髓基质细胞增殖及定向分化能力是否正常,自身骨髓移植是否合适还有待研究。目的:观察mdx小鼠骨髓基质细胞体外培养时的增殖及多向分化能力。方法:取mdx小鼠与C57小鼠胫股骨骨髓基质细胞体外培养,经吉姆萨染色后观察其形成成纤维细胞集落形成单位的能力;通过不同诱导液使骨髓基质细胞定向分化为成骨、成脂、成肌细胞,观察其形态学特性;并分别用Vonkossa染色、油红O染色、免疫荧光检测desmin阳性细胞对已分化细胞进行鉴定和分化率比较;培养1周时,提取分化细胞总RNA,反转录后,用real-time PCR检测各分化细胞相关基因表达。结果与结论:mdx小鼠骨髓基质细胞形成的成纤维细胞集落形成单位数目和体积均小于C57小鼠。其成骨、成肌分化的效率均明显低于C57小鼠(P<0.01),两种小鼠的骨髓基质细胞成脂分化效率差异无显著性(P>0.05)。real-time PCR检测结果显示,与C57小鼠相比,mdx小鼠的骨髓基质细胞成骨、成肌基因表达均有不同程度下降,而成脂基因表达无明显差异。结果提示,mdx小鼠的骨髓基质细胞体外培养时的增殖及定向分化能力较C57小鼠下降,与Dystrophin基因缺失有关,mdx小鼠自体骨髓移植将会受限。 冷雁 张为西 周琛 郑振扬 张成关键词:小鼠 骨髓基质细胞 分化 肌营养不良症 mdx小鼠与C57小鼠骨髓基质细胞体外分化能力的比较 目的探讨DMD模型鼠(mdx小鼠)骨髓基质细胞体外培养的增殖及多向分化能力。材料与方法3~12月雄性C57BL/6J小鼠及mdx小鼠各18只,用于提取骨髓基质细胞。无菌取mdx小鼠与C57小鼠胫股骨的骨髓基质细胞并进行体... 冷雁 张为西 周琛 郑振扬文献传递 右侧眶上裂综合征1例报告 被引量:2 2011年 眶上裂综合征(superior orbital fissure syndrome,SOFS),又称为Rochon-Duvigneaud综合征,他是1组以动眼神经、滑车神经、外展神经及三叉神经眼支受损症状为特征的临床症状群。Hir-schfeld于1858年首先描述了该症状群,但是直到1896年Rochon-Duvigneaud才把4例梅毒患者身上相似的症状群作为一个综合征正式进行报道, 郑振扬 张为西 姚晓黎 周琛 冷雁 马震宇关键词:眶上裂综合征 眼痛 动眼神经 滑车神经 外展神经 三叉神经 不同稀释度A型肉毒毒素局部注射对小鼠神经肌肉的影响 目的 探讨A型肉毒毒素(botulinum toxin type A,BTX-A)局部注射应用中合适的稀释度.方法 将25只小鼠随机分为5组,一组切断右侧坐骨神经作为阳性对照,余4组分别用不同稀释度BTX-A(1.25 ... 周琛 张为西 冷雁 郑振扬 马震宇 钟志刚mdx小鼠骨骼肌组织成肌、成脂、成骨基因的特异性表达 2011年 背景:干细胞移植是治疗肌营养不良症的有效方法之一,但移植的干细胞在病理骨骼肌中成肌表达较低。目的:通过比较mdx小鼠和C57小鼠的骨骼肌形态及成肌、成脂、成骨基因表达的差异,探讨mdx小鼠骨骼肌病理改变的可能机制。方法:取mdx小鼠与C57小鼠的骨骼肌组织行冰冻切片,苏木精-伊红染色和Vonkossa染色观察两种小鼠肌肉组织的形态特征;提取mdx小鼠和C57小鼠骨骼肌组织总RNA,real-timePCR检测成肌、成脂、成骨相关基因的表达。结果与结论:mdx小鼠骨骼肌有肌纤维坏死和再生,伴有轻度脂肪、纤维结缔组织增生,Vonkossa染色可见钙结节沉积,而C57小鼠的骨骼肌细胞形态清晰,核位于细胞周边。与C57小鼠比较,mdx小鼠肌肉组织成骨、成脂基因表达有不同程度的上调(P<0.05),而成肌基因表达下调(P<0.05)。dystrophin基因缺失及成肌基因表达下调、成骨和成脂基因上调是造成mdx小鼠肌肉组织变性坏死的原因。 冷雁 张为西 周琛 郑振扬 张成 李秋玲关键词:肌营养不良症 DYSTROPHIN基因 骨骼肌 BMP-2和FGF-2对小鼠骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化的影响 被引量:25 2008年 目的:观察骨形成蛋白(BMP-2)和成纤维细胞生长因子2(FGF-2)对小鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)向成骨细胞分化的影响。方法:取3-18月雄性C57BL/6J小鼠(共50只)的骨髓细胞,分离贴壁培养后,用免疫磁珠法纯化,并鉴定为MSCs后,再进行贴壁培养24h后,分别在成骨细胞诱导培养液中加入100μg/LBMP-2和0.5nmol/LFGF-2持续诱导7、14、21d后,进行碱性磷酸酶染色、碱性磷酸酶活性检测,Vonkossa染色以及茜素红染色,并用递转录荧光定量PCR法检测向成骨细胞分化的标志性基因(Runx2/cbfa1、Alp、collagen-1、osteocalcin)的表达情况。结果:BMP-2刺激组的ALP活性以及钙化结节明显高于对照组,Runx2/cbfa1,ALP,collage-1,osteocalcin的mRNA呈高表达;FGF-2刺激组的ALP活性以及钙化结节也高于对照组,Runx2/cbfa1、Alp、collagen-1、osteocalcin的mRNA表达量也高于对照组,但不如BMP-2明显。结论:BMP-2和FGF-2在不同程度上促进体外培养的小鼠MSCs向成骨细胞方向分化。 张为西 陈松林 姚晓黎 卢锡林 周琛 冷雁 Xingming Shi关键词:小鼠 骨髓间质干细胞 BMP-2 FGF-2 肾上腺脑白质营养不良的临床特点 被引量:5 2008年 目的探讨肾上腺脑白质营养不良(ALD)的临床特点。方法回顾性分析14例ALD患者的临床资料。结果本组14例ALD患者均为男童,起病年龄1~13岁,缓慢起病,临床上均有不同程度的智力障碍和肢体活动障碍,其中9例视力下降,6例听力下降,13例言语不清,5例有抽搐发作,6例皮肤色素沉着;5例血浆极长链脂肪酸(VLCFA)不同程度增高,2例头颅CT、12例头颅MRI显示双侧脑室三角区周围白质对称分布的蝶形病灶,3例增强扫描示部分病灶周围花边样强化条带。结论ALD临床特点为进行性智力及肢体运动障碍、视力及听力下降、肾上腺皮质功能减低、血浆VLCFA水平增高及特征性的头颅影像学改变。 张为西 文秀雄 许多荣 周琛 冷雁关键词:肾上腺脑白质营养不良 不同稀释度A型肉毒毒素局部注射对小鼠神经肌肉的影响 目的:通过观察不同稀释度A型肉毒毒素(BTX-A)局部注射对小鼠神经肌肉的影响,明确BTX-A局部应用合适的稀释度.方法:将25只小鼠随机分为5组,其中4组分别用不同稀释度BTX-A(1.25U/0.1mL、2.5U/0... 周琛 张为西 冷雁 郑振扬 马震宇 钟志刚不同稀释度A型肉毒毒素局部注射对小鼠神经肌肉的影响 被引量:1 2013年 目的通过观察不同稀释度A型肉毒毒素(botulinum toxin type A,BTX-A)局部注射对小鼠神经肌肉的影响,明确BTX-A局部应用合适的稀释度。方法将25只小鼠随机分为5组,其中4组分别用不同稀释度BTX-A(1.25U/0.1mL、2.50U/0.1mL、5.00U/0.1mL、10.00U/0.1mL)在右侧腓肠肌局部注射,其余1组切断右侧坐骨神经作为阳性对照。左侧均注射生理盐水作为阴性对照。对小鼠进行趾运动评分,检测腓肠肌动作电位后,取腓肠肌称重并进行冰冻切片,行HE染色及免疫荧光检测神经细胞粘附分子(neural cell adhesion molecule,NCAM),电镜下观察腓肠肌肌肉及神经超微结构。结果2.50U/0.1mL及5.00U/0.1mL BTX-A处理组小鼠趾运动评分下降最快、恢复最慢;腓肠肌动作电位阈强度电位增加、最大刺激强度增大、潜伏期延长、动作电位峰值减小,与其他组差异有统计学意义(P<0.001);形态学检测示此2处理组较其他组肌细胞间隙增宽、N-CAM表达增强、肌肉及神经变性明显。结论 2.50U/0.1mL和5.00U/0.1mL BTX-A局部注射起效快、维持作用时间长且去神经支配作用强,它们可能是BTX-A局部注射合适的稀释度,这为BTX-A的临床合理应用提供实验依据。 周琛 张为西 冷雁 郑振扬 马震宇 钟志刚关键词:A型肉毒毒素 稀释度 腓肠肌