刘日勇
- 作品数：3 被引量：3H指数：1
- 供职机构：重庆理工大学更多>>
- 发文基金：重庆市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 融合表达人β干扰素-1b(17Ser-IFN-β)的制备及PEG修饰
- 目的:采用融合表达方式获得无需复性的点突变重组人β干扰素-1b(17Ser-IFN-β-1b),并通过PEG修饰制备PEG-β-IFN-1b。 方法:通过PCR技术获得含有不同蛋白酶酶切识别位点的基因序列,分别构建重组...
- 刘日勇
- 关键词：肠激酶纯化工艺
- 文献传递
- 不同叶型半夏蛋白质差异性初步分析(英文)被引量：2
- 2009年
- 采用紫外分光光度法、非变性和变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分析半夏总蛋白。结果显示:芍药叶叶型半夏和掌叶叶型半夏的总蛋白含量远高于竹叶叶型和桃叶叶型半夏。聚类分析结果显示:生长于南川县的四种叶型半夏样品,除芍药叶叶型半夏外,竹叶叶型、掌叶叶型和桃叶叶型显示相对较高的遗传相似性采自不同地区的芍药叶叶型半夏遗传相似性较高,表明芍药叶叶型半夏受环境影响相对较小。因此,在半夏生产中,可以根据不同的需要,规范半夏种子纯度。
- 温海霞蔡家利张明明兴加刘日勇唐偲雨周卿瑞
- 关键词：半夏叶型蛋白质紫外分光光度法聚丙烯酰胺凝胶电泳
- 重组人β干扰素-1b的融合表达及制备被引量：1
- 2010年
- 通过融合表达获得无需复性的重组人β干扰素-1b(17Ser-β-IFN)。运用PCR方法扩增带有EK(肠激酶)蛋白酶酶切位点的人β干扰素-1b基因,构建重组表达载体pET32-a-EK-β-IFN-1b,通过工程菌(pET32-a-EK-β-IFN-1b/Qrigami DE3)表达融合蛋白TRX-β-IFN-1b。经纯化的融合蛋白,在一定的酶切条件下用EK酶酶切后,通过反相C18柱纯化获得高纯度的重组人β-IFN-1b,再经细胞病变抑制法测定其抗病毒比活性。结果表明,TRX-β-IFN-1b融合蛋白表达量达到菌体总蛋白的30%以上,EK酶酶切效率不低于90%。制备的重组人β-IFN-1b的质谱分子量与理论值一致,抗病毒活性比国内外报道的相同蛋白高出2倍以上,达到4.5×107IU/mg。通过融合表达制备的重组人β-IFN-1b具有治疗多发性硬化症或肝炎的临床价值。
- 刘日勇罗岚范开
- 关键词：Β干扰素肠激酶抗病毒活性
