刘佩娜
- 作品数：43 被引量：61H指数：4
- 供职机构：四川大学华西基础医学与法医学院人体寄生虫学教研室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金World Health Organization国家卫生部科学研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学生物学更多>>
- 非传统的镜检技术在疟疾诊断中的应用
- 2002年
- 姜素华刘佩娜朱声华张辉
- 关键词：疟疾诊断
- 套式PCR扩增特定SSU rRNA基因片段检测四川疟原虫感染的研究被引量：4
- 2001年
- 目的用套式 PCR系统诊断、鉴别人体疟原虫感染。方法以疟原虫小亚单位核糖体核糖核酸 (SSUr RNA)基因为靶基因 ,选用 1对疟原虫属特异性引物和 4对种特异性引物 ,建立套式 PCR扩增系统并用于四川省疟疾病人血样的检测。结果从间日疟原虫、恶性疟原虫和三日疟原虫感染血样中分别扩增出 1 0 4 bp、1 0 2 bp和 1 1 5bp预期大小的特定扩增带。61份血样检测结果与镜检的间日疟阳性符合率为 1 0 0 %。并查出镜检漏诊的 2例 P.v.和 P.m.的混合感染及 1例 P.v.、P.f.和 P.m.的混合感染病例。结论本系统特异、灵敏、稳定、简便 ,可在诊断疟疾的同时判定混合感染 ,故对疟疾的诊断、大规模流行病学研究及疫情监控有实际应用价值。
- 姜素华刘佩娜朱声华刘庆陈建平
- 关键词：间日疟原虫恶性疟原虫疟疾套式聚合酶链反应
- 新型荧光光源吖啶橙梯度染色法检测伯氏疟原虫的研究
- 2008年
- 探讨新型荧光光源吖啶橙(AO)梯度染色法检测伯氏疟原虫的效率和实用性。对经血液腹腔接种传代感染5d的伯氏疟昆明小鼠(60只)以红细胞的疟原虫寄生率计算法计算原虫密度,并用正常小鼠新鲜血10倍倍比稀释其尾血或眼球血,同时推制薄血片。用新型荧光光源AO法和瑞氏法染色后高倍镜检,记录每片发现三次原虫的平均时间,5min观察300个视野未发现疟原虫者为阴性。本AO染色法、瑞氏染色法能检出的伯氏疟原虫的最低原虫密度分别为11虫/μL、19虫/μL。当原虫密度在一定范围内时,两法检测发现疟原虫的时间有差别,前者比后者快。原虫密度适中的稀释倍数组原虫密度与各法检出的时间为负相关。不同稀释倍数组两法检出时间均为正相关。新型荧光光源AO梯度染色法是检测人体疟原虫的一种简便、快速、敏感、实用的方法,可推广作为疟疾流行病学调查及后期监测的手段。
- 姜素华刘佩娜付云朝廖琳刘庆
- 关键词：伯氏疟原虫
- 套式PCR技术检测西南部分疟区疟原虫感染的研究
- 目的应用套式PCR技术诊断,鉴别我国西南部分疟区人体四种疟原虫感染情况,为建立准确而完备的流行病学资料、制定防治措施提供可靠的实验依据。方法采集四川名山县、筠连县及云南金平县疟区1996-2000年间共106份现症病人和...
- 姜素华刘佩娜朱声华刘庆陈建平
- 文献传递
- 杜氏利什曼原虫表膜的制备及保护性McAb识别膜抗原的研究
- 1991年
- 本文用匀浆及超声波破碎杜氏利什曼原虫四川犬分离株前鞭毛体,蔗糖密度梯度离心分离其表膜,电镜观察见所得样品是单位膜和膜下微管组成的表膜,测得微管直径平均为23.3nm,微管间距巨平均为15.7nm,经SDS-PAGE分离显示1条主带,次带约15条,再转移到硝化纤维膜上,用单克隆抗体2H6-E3识别,仅见有一条区带,分子量为63kDa,该单克隆抗体是己经被证实定位于前鞭毛体表膜,并具有免疫保护性的。
- 刘佩娜胡孝素阚兵吕洪刚王远萍杨志梅
- 关键词：抗体
- 阴道毛滴虫氢化酶体腺苷酸激酶基因真核表达载体的构建与鉴定被引量：1
- 2008年
- 目的构建阴道毛滴虫氢化酶体腺苷酸激酶(adenynate kinase,AK)基因真核表达载体并予以鉴定。方法根据AK基因已知序列设计合成一对引物,应用PCR技术从阴道毛滴虫基因组DNA中扩增出AK基因,并将其克隆入pMD18-T Simple载体。阳性克隆的重组质粒经酶切及PCR鉴定后,用双脱氧链末端终止法进行基因序列测定。应用BLAST软件辅助分析所测基因与Genbank中阴道毛滴虫氢化酶体AK序列的同源性。克隆载体PMD-18T-AK经限制性内切酶BamHI和XbaI双酶切,得到含这2个酶切位点之AK DNA片段,T4连接酶连接到含有这2个酶切位点的真核表达载体pcDNA3.1(+),构建出重组真核表达载体pcDNA3.1(+)-AK,经凝胶电泳鉴定、酶切鉴定、PCR鉴定证实DNA片段大小的正确性。结果经凝胶电泳鉴定、酶切鉴定、PCR鉴定证实含大小正确的AK DNA片段。结论成功地构建了基因真核表达载体。
- 帖超男王雅静谢辉毕世樑刘佩娜廖琳
- 关键词：阴道毛滴虫腺苷酸激酶基因克隆真核表达载体
- 甘油冷冻保存阴道毛滴虫被引量：2
- 1998年
- 本文采用１０％甘油液氮保存阴道毛滴虫，连续分别观察１年、２年，３７℃解冻后，阴道毛滴虫培养４天后均已生长繁殖。用瑞氏姬氏混合染色，形态特征明显，标本结构清晰，甘油具有价廉、无毒、无味的优点，可替代二甲基亚砜作为常用保护剂。
- 廖琳刘佩娜陈盛文
- 关键词：阴道毛滴虫甘油液氮冷冻
- 建立计算机寄生虫标本图片库 提高实验教学质量被引量：5
- 2000年
- 人体寄生虫学传统直观教学的实验教具已不能满足２１世纪的教学要求，在实验课教学中利用现代化教学手段势在必行。为了提高实验教学质量，我室建立了计算机寄生虫标本图片库。本图片库使用方便，较标本录像的甭晰度高，制作费用较多媒体课件低廉，而且不需多煤体教学设备，便于推广应用。
- 廖琳王雅静刘佩娜朱声华陈建平
- 关键词：计算机实验教学质量
- 应用套式PCR技术检测我国西南部分疟区疟原虫的感染状况被引量：3
- 2002年
- 目的 建立鉴别人体四种疟原虫的套式 PCR技术 ,检测我国西南部分疟区疟原虫的感染情况。方法 选用两组疟原虫引物 ,扩增 SSU r DNA特定片段 ,经琼脂糖凝胶电泳、溴化乙锭染色 ,紫外检测凝胶分析仪观察并摄像。结果 采用上述方法扩增出间日疟、恶性疟和三日疟分别为 10 4bp、10 2 bp和 115 bp特异片段。所检测的 138份疟疾患者血样中 ,四川名山县 95份均为间日疟单纯感染 ,筠连县 37份中 10份为与间日疟和 /或恶性疟呈混合感染的三日疟 ,云南金平县的 6份均为合并恶性疟的两种或两种以上疟原虫混合感染。结论 所建立的套式PCR检测系统具有敏感性高、特异性好和稳定可靠等优点 ,在疟疾诊断、虫种鉴别、混合感染的判定、大规模流行病学研究和疫情监控预测等方面具有实际应用价值。
- 刘佩娜姜素华廖琳刘庆川本文彦
- 关键词：间日疟恶性疟三日疟套式PCR
- 阴道毛滴虫多克隆抗体的制备及Fd基因的原核表达
- 2006年
- 目的-将阴道毛滴虫铁氧还蛋白(ferredoxin,Fd)基因在大肠埃希菌中诱导表达。方法-制备阴道毛滴虫可溶性抗原,多点注射免疫家兔,获得的血清用ELISA测定其抗体效价。将原核表达重组质粒pET3C-Fd转化入大肠埃希菌BL21(DE3)感受态细胞中,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导蛋白质表达。结果-制备出抗阴道毛滴虫多克隆抗体,抗体效价在1∶8000以上,用于免疫印迹实验。经十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和免疫印迹(Western blot)分析,重组质粒在大肠埃希菌中表达出Fd。结论-在大肠埃希菌中表达出了Fd。
- 谢辉王雅静帖超男毕世樑刘佩娜廖琳
- 关键词：阴道毛滴虫铁氧还蛋白多克隆抗体基因表达
