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刘一飞
作品数:
5
被引量:24
H指数:4
供职机构:
北京大学生命科学学院
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发文基金:
国家自然科学基金
国家高技术研究发展计划
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相关领域:
农业科学
生物学
天文地球
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合作作者
陈章良
北京大学生命科学学院蛋白质工程...
李毅
北京大学生命科学学院蛋白质工程...
曲林
北京大学生命科学学院
薛志宏
北京大学生命科学学院
肖锦
北京大学生命科学学院
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聚合酶
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聚合酶链反应
机构
5篇
北京大学
作者
5篇
刘一飞
5篇
李毅
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陈章良
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曲林
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李玮
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徐洪
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瞿礼嘉
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朱玉贤
1篇
明小天
1篇
周曾铨
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张昀
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安利忻
1篇
肖锦
1篇
薛志宏
1篇
安成才
传媒
2篇
北京大学学报...
2篇
病毒学报
1篇
Acta B...
年份
1篇
2001
1篇
1998
1篇
1995
2篇
1994
共
5
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水稻矮缩病毒基因组第六号片段编码区的cDNA克隆及序列分析
被引量:12
1994年
从水稻矮缩病毒(RiceDwarfVirus,RDV)中国福建分离物的基因组中分离出第六号 片段的双链RNA,根据已发表的日本分离物第六号片段cDNA全序列合成了两个寡聚核苷酸引物,经过逆转录合成cDNA,应用PCR方法扩增了编码区的基因序列,并将扩增产物克隆到pGEM3Zf(一)载体上。对重组子进行的限制性酶切分析和DNA序列分析证明,得到的是RDV第六号片段完整的编码序列,进而构建了亚克隆并进行了全序列测定。结果表明,我们所扩增和克隆的片段长1579bp,包含了第六号片段的长153Obp的阅读框架部分,编码一个由509个氨基酸组成的蛋白质,与日本分离物相应序列相比较有较高的同源性,核苷酸序列及由此推算出的氨基酸序列的同源率分别为96.7%和98.8%。
刘一飞
李毅
潘乃
陈章良
关键词:
水稻矮缩病毒
聚合酶链反应
CDNA
水稻矮缩病毒第十二号基因组份的cDNA合成与分子克隆及全序列分析
被引量:11
1994年
应用聚合酶链式反应技术(PCR)扩增了水稻矮缩病毒(RDV)中国福建分离物基因组第12号片段(S12)的全基因序列,并对该基因进行了亚克隆和序列分析。结果表明克隆片段全长为1066bp,含有4个开放阅读框架(ORF),分别编码34kD、8kD、7kD和4kD的多肽。与日本RDVS12在核苷酸水平上的同源率为94.5%,与相应ORF(ORF1-4)编码多肽的同源率分别为91.3%、97.8%、97.6%和84.4%。此外,将这几个ORF编码的多肽与同组伤瘤病毒(WTV)、水稻瘿矮病毒(RGDV)相应ORF编码的多肽进行同源性比较发现,34kD多肽与WTV和RGDV相应多肽无显著的序列同源性,但ORF2和ORF3编码的多肽在同组中却有明显的保守性。由此说明这几种小的多肽在病毒侵染和复制中有着十分重要的作用。
李毅
薛志宏
刘一飞
全胜
潘乃
陈章良
关键词:
水稻矮缩病毒
CDNA
TMV 54K基因的3个突变体介导抗病性的研究
被引量:4
2001年
利用PCR方法分别构建了烟草花叶病毒 (TMV)中一个推测为复制酶的 5 4_kD蛋白基因 (5 4K)缺失N端、C端和仅余基因中部 2 6 1bp的 3个缺失突变体 ,与野生型 5 4K一起克隆入植物中间载体p2 0 8,并通过根癌土壤杆菌(Agrobacteriumtumefaciens (SmithetTownsend)Conn)介导的方法转化烟草 (NicotianatabacumL .)。用TMV侵染转基因植物的R0 代和R1代 ,结果显示这
安利忻
刘一飞
陈章良
李毅
关键词:
TMV
抗病性
烟草
水稻矮缩病毒基因组分析与部分基因片段的表达及功能研究
被引量:7
1998年
根据本实验室对水稻矮缩病毒(RiceDwarfVirus,RDV)中国福建分离株基因组全序列的测定,分析了其编码蛋白的功能,并将RDVS6,S9,S10,S11编码区cDNA分别克隆到表达载体pTrcHisA,pBV221,pTrcHisB和pBV221中,构建成表达质粒pTH-S6,pBVP9,pTH-S10,pB-VP11。分别用IPTG或温度诱导大肠杆菌DH5α,经SDS-PAGE及相应抗体的Westernbloting检测证明S6,S9,S10,S11编码蛋白在大肠杆菌中获得成功表达。另外,还将RDV外层外壳蛋白基因S8、微核心蛋白基因S7及编码非结构蛋白基因S9通过基因枪导入到水稻植株中,抗病性正在研究之中。
李毅
徐洪
程明非
郑宏红
冒志娟
肖锦
张福建
明小天
曲林
刘一飞
李玮
赵晓岚
陈章良
关键词:
基因组分析
原核表达
转基因水稻
水稻矮缩病毒
中国河南西峡晚白垩世恐龙蛋化石基因分离及序列分析
被引量:1
1995年
从河南省西峡晚白垩世一枚恐龙蛋化石内腔絮状内含物及外壳提取DNA样品,并用一段特异引物与6碱基随机引物进行PCR扩增、基因克隆和序列分析。结果表明用这对引物从蛋腔絮状内含物样品中扩增到一段150bp的DNA片段,推测氨基酸序列与EMBL库中已知蛋白质氨基酸序列进行了序列同源性分析,结果表明所克隆到的这段基因与非洲爪蟾表皮钙粘着蛋白(cad-herin)前体及脑细胞粘着蛋白、牛及人胎盘胞钙粘着蛋白在氨基酸水平有显著的序列同源性,分别为40.6%,37.5%,34.4%和36.4%。
李毅
安成才
朱玉贤
张昀
刘一飞
曲林
由凌涛梁晓文
李小华
瞿礼嘉
周曾铨
陈章良
关键词:
DNA
晚白垩世
基因
恐龙蛋
化石蛋
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