兰德松
- 作品数:38 被引量:87H指数:5
- 供职机构:辽宁省动物疫病预防控制中心更多>>
- 发文基金:国家重点实验室开放基金国家高技术研究发展计划辽宁省科学事业公益研究基金更多>>
- 相关领域:农业科学医药卫生生物学更多>>
- 猪裂头蚴病检疫、诊断要点
- 2015年
- 猪裂头蚴病是一种人畜共患病,能够引起严重的后果。本文简述了裂头蚴病的发病原因、症状、检疫方法,对于如何进行诊断提出了自己的见解。
- 赵培高志峰谷志大王竹杨作丰孙世宇兰德松刘洋
- 关键词:症状检疫
- 伪狂犬病病毒野毒株与gE基因缺失疫苗株TaqMan实时荧光定量PCR鉴别方法的建立被引量:5
- 2018年
- 为实现对伪狂犬病病毒(pseudorabies virus,PRV)野毒株与gE基因缺失疫苗株的快速、敏感、特异的鉴别诊断,本试验针对PRVgD和gE基因设计了2套特异性引物和TaqMan探针,建立了PRV野毒株与gE基因缺失疫苗株的TaqMan实时荧光定量PCR鉴别方法,对引物和探针浓度、退火温度等进行了优化,对方法进行敏感性、特异性、重复性试验,并进行临床样品检测。结果显示,建立的针对gD、gE基因的TaqMan实时荧光定量PCR方法线性相关系数(R2)分别为0.996和0.980,均呈良好的线性关系;检测限分别为39.4和12.1拷贝/μL;与圆环病毒2型、猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒均无交叉反应;重复性试验结果显示,针对gD基因的批内和批间变异系数分别为1.43%~1.86%、1.10%~2.07%,针对gE基因的批内和批间变异系数分别为0.98%~1.41%、1.12%~1.86%。应用建立的TaqMan实时荧光定量PCR与普通PCR分别对11份临床疑似感染样品进行检测,阳性率分别为36.4%和27.3%。结果表明,该方法敏感性高、特异性强、重复性好,可作为伪狂犬病病毒野毒株与gE基因缺失疫苗株的早期鉴别诊断和定量检测的有效手段。
- 兰德松兰德松顾贵波
- 关键词:野毒株
- 猪瘟病毒通用型RT-LAMP方法的建立与应用被引量:2
- 2013年
- 本研究根据猪瘟病毒(CSFV)基因组的NS5B基因片段,设计了4条针对NS5B基因6个位点的RT-LAMP扩增引物,建立的方法能特异性地检测出CSFV,而PRV、PPV、PRRSV、PCV、FMDV等病毒扩增结果均为阴性;该方法与猪瘟荧光RT-PCR方法相比,特异性无明显差异,敏感性高10倍;另外,该方法耗时短,只需1h,操作简单,不需要PCR仪等特殊仪器,扩增产物可通过肉眼观察、或加入荧光染料在紫外灯下观察特异性荧光、也可通过凝胶电泳检测,因此适合从临床病料中快速准确检测出猪瘟病毒感染情况,适合推广应用于基层和野外现场。
- 兰德松闫明媚赵凤菊顾贵波
- 关键词:猪瘟病毒RT-LAMP
- 猪病毒性腹泻
- 2013年
- 近年来,猪病毒性腹泻病在欧洲和亚洲的多个国家呈现流行态势,在我国该病也呈现从南到北大流行的态势。
- 赵晓彤兰德松陈瑶魏澍
- 关键词:病毒性腹泻病
- 鸡马立克氏病病毒814株细菌人工染色体的构建
- 本研究通过构建表达 Eco-gpt(Xanthine-guanine phosphoribosyl transferase,XGPRT,gpt)的哺乳动物细胞基因转移遗传选择标记(1.3kb)和带有细菌人工染色体(Bac...
- 崔红玉王云峰石星明童光志兰德松何来仇华吉刘长军王玫
- 关键词:鸡马立克氏病病毒细菌人工染色体感染性分子克隆
- 文献传递
- 猪链球菌病及其防控对策被引量:3
- 2011年
- 猪链球菌病是由C、D、E及L群链球菌引起的猪的多种疾病的总称,表现为急性出血性败血症、心内膜炎、脑膜炎、关节炎、哺乳仔猪下痢和孕猪流产等。本病流行无明显季节性,但夏、秋季多发,潮湿闷热的天气多发。有时甚至可呈地方性爆发,发病率和死亡率都很高,
- 闫明媚兰德松
- 关键词:猪链球菌病防控对策出血性败血症心内膜炎仔猪下痢脑膜炎
- 辽宁省H1N1亚型猪流感病毒的分离鉴定与遗传演化分析
- 12年辽宁省某屠宰场猪鼻咽拭子样品中分离到一株流感病毒,经HA-HI试验和RT-PCR鉴定为H1N1亚型猪流感病毒株,通过对病毒的八个基因片段克隆并测序,并利用分子生物学软件进行遗传演化分析.结果表明,分离株HA基因裂解...
- 兰德松魏澍顾贵波谷志大闫明媚赵凤菊
- 关键词:猪流感病毒H1N1亚型菌株分离病原鉴定
- H1N1亚型猪流感病毒3种谱系三重RT-PCR检测方法的建立与应用被引量:1
- 2018年
- 以H1N1亚型猪流感病毒(SIV)3种主要谱系2009甲型H1N1(pdm/09 H1N1)、古典型H1N1(CS H1N1)和类禽型H1N1(a H1N1)的血凝素(Hemagglution,HA)基因为靶基因,设计3对特异性引物,建立一种可以同时检测一个反应体系中H1N1亚型3种主要谱系SIV的三重RT-PCR方法,并将其应用于临床样品的检测,旨在为开展猪群中流行的H1N1亚型SIV感染及流行情况的调查研究提供有力技术支撑。结果显示,该方法可对pdm/09 H1N1、CS H1N1和a H1N1这3个不同谱系SIV特异性检出,扩增片段大小分别为476 bp、293 bp和997 bp,而与其他病毒无交叉反应;最低检测限分别为1 460拷贝/μL、1 700拷贝/μL和1 950拷贝/μL;应用到3 110份临床样品检测中,检测出10株pdm/09 H1N1和21株a H1N1 SIV,未检测到CS H1N1 SIV,与鸡胚分离病毒符合率达100%。综上,该方法敏感性和特异性良好,能快速、有效实现对临床样品中H1N1亚型3种谱系的检测。
- 兰德松兰德松魏澍
- 关键词:猪流感病毒
- IBRV重组gD蛋白的真核表达与间接ELISA检测方法的建立被引量:1
- 2023年
- 通过优化牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)gD基因序列为Sf9细胞偏好密码子,转座形成穿梭载体,将质粒瞬时转染Sf9昆虫细胞,利用昆虫杆状病毒表达系统表达纯化重组IBRV gD蛋白;以制备的重组IBRV gD蛋白为包被抗原,建立检测IBRV血清中和抗体的间接ELISA方法,并通过比对检测已知血清中和抗体效价的牛血清,验证所建立的间接ELISA方法的敏感性、特异性与重复性等指标。结果显示:本研究建立的间接ELISA方法对相关的牛病毒血清抗体无交叉反应,敏感性可达1:512,组内和组间变异系数均低于10%;使用建立的间接ELISA检测方法结合血清中和试验,对480份临床血清样品进行检测,发现两者敏感性符合率为98.18%,特异性符合率为93.33%,总符合率为96.67%。结果表明,本研究建立的检测IBRV血清中和抗体的间接ELISA方法具有良好的特异性、敏感性和重复性,可开发为临床适应的检测试剂盒。
- 郭宇杨波兰德松郁茵杨冬梅王旭红云涛牧仁李雷斌孙雨
- 关键词:杆状病毒真核表达蛋白纯化间接ELISA
- 伪狂犬病病毒野毒株与gE基因缺失疫苗株微滴数字PCR鉴别方法的建立被引量:12
- 2018年
- 为建立伪狂犬病病毒(PRV)野毒株与gE基因缺失疫苗株的鉴别诊断和准确定量的微滴数字PCR(ddPCR)方法,本研究以PRV gD和gE基因为靶基因,设计并合成了2套特异性引物和Taq Man探针,建立了分别针对PRV gD和gE基因的dd PCR方法。结果显示,本研究建立的dd PCR方法能够特异性地鉴别检测PRV野毒株和疫苗株,与圆环病毒2型、猪瘟病毒、猪流感病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒等均无交叉反应;该方法针对PRV gD、gE基因的检测限分别为3.9拷贝/μL、2.3拷贝/μL,分别比相应的荧光定量PCR (qPCR)方法敏感性高10倍和5倍;针对PRV gD、gE基因的批内和批间重复性试验结果变异系数(C.V)均小于4%;通过对45份临床样品的检测,结果显示,与病毒分离方法相比,dd PCR方法敏感性为91.7%,特异性为97.2%,符合率为97.8%;与dd PCR方法相比,q PCR的敏感性为83.3%,特异性为94.3%,符合率为95.6%。本研究建立的dd PCR方法在检测低拷贝临床样品时敏感性更高、特异性强、重复性好,可以作为PRV野毒株与疫苗株的鉴别、准确定量的有效检测手段。
- 兰德松兰德松魏澍侯振中
- 关键词:伪狂犬病病毒野毒株