储海燕
- 作品数：34 被引量：273H指数：9
- 供职机构：上海交通大学医学院附属瑞金医院更多>>
- 发文基金：卫生部科学研究基金国家自然科学基金上海市科学技术委员会资助项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- α_2纤溶酶抑制物和PAP检测方法的建立被引量：1
- 1999年
- 储海燕王鸿利王学锋王振义
- 关键词：抑制物PAP
- 血友病A的产前诊断被引量：3
- 2001年
- 目的 建立简便、快速的血友病Ａ产前诊断体系。方法用ＰＣＲ方法直接检测ＦＶⅢ内含子２２倒位或对ＦＶⅢ基因内的ＢｃｌⅠ位点，内含子１３和２２中ＳＴＲ和ＦＶⅢ基因外的ＤＸＳ ５２（ＳＴ１４）位点的多态性进行遗传连锁分析。结果５例血友病Ａ携带者的男性胎儿有４例正常，１例为ＨＡ患者。结论 血友病Ａ的产前诊断可先进行内含子２２倒位的检测，阳性结果即可作出诊断；若内含子２２倒位的检测结果阴性，则可利用ＦＶⅢ基因内、外的多个位点多态性结果进行遗传连锁分析，以得出最终的诊断。
- 王学锋刘元肪刘明李志广储海燕桑晓洁樊绮诗王鸿利
- 关键词：血友病A携带者产前诊断PCR
- 血友病的携带者与产前分子诊断被引量：9
- 2003年
- 目的 建立一种简便、快速的血友病携带者检测与产前诊断体系。方法 用聚合酶链反应 (PCR)方法分别检测FⅧ内含子 2 2倒位及血友病A家系中FⅧ基因内的BclI位点、内含子 13和2 2中STR和FⅧ基因外的DXS 5 2 (ST14 )位点的多态性 ;对血友病B家系检测FⅨ基因外 6个STR位点(DXS1192、DXS12 11、DXS80 94、DXS80 13、DXS12 2 7、DXS10 2 )的多态性。结果 综合应用直接检测倒位和遗传连锁分析 ,2 1个血友病A家系的可诊断率为 94 7% ;联合FⅨ基因外 6个STR位点对血友病B家系进行遗传连锁分析 ,使 10个家系全部得到诊断。结论 FⅧ内含子 2 2倒位检测阳性 ,可以直接诊断血友病A的携带者及患儿 ;检测FⅧ基因内、外及FⅨ基因外多个位点的多态性并进行遗传连锁分析 ,是血友病携带者检测与产前诊断的简便、快速的方法。
- 王学锋刘元肪刘湘帆储海燕方怡樊绮诗王鸿利
- 关键词：血友病携带者产前分子诊断遗传性出血性疾病聚合酶链反应
- 逆转录病毒载体介导人凝血因子Ⅷ在哺乳细胞中的高效表达(英文)
- 2001年
- 目的 建立逆转录病毒载体介导的人凝血因子Ⅷ (FⅧ )体外高效表达体系。方法 将一B区缺失 (76 0aa～ 16 39aa)的人FⅧcDNA(FⅧcDNABD)克隆至逆转录病毒载体pLNCX ,构建了重组表达载体LNC ⅧBD。经PA317细胞包装后 ,感染多种靶细胞。分别采用一期法、ELISA法和RT PCR检测细胞培养上清中人FⅧ的凝血活性 (FⅧ∶C)和抗原含量 (FⅧ∶Ag)以及细胞中FⅧcDNABD的转录。结果 重组逆转录病毒载体LNC ⅧBD在四种靶细胞中有不同程度的表达。其中以NIH3T3细胞的表达最高 ,FⅧ∶C为 1.6U/ 10 6细胞·2 4hrs 1,FⅧ∶Ag为 5 0 0ng/ 10 6细胞·2 4hrs 1。CHO细胞表达的FⅧ∶C活性为 0 12U/ 10 6细胞·2 4hrs 1,FⅧ∶Ag为 6 2 4ng/10 6细胞·2 4hrs 1。FⅧ在Cos 7和一正常成人肝细胞系L 0 2中表达较低。RT PCR可检测到靶细胞中人FⅧcDNABD的转录的mRNA。结论 逆转录病毒载体能够介导人FⅧ的体外高效表达 。
- 郭雪梅王鸿利储海燕王学锋璩斌李志广戚正武王振义
- 关键词：逆转录病毒载体基因表达
- 维甲酸和三氧化二砷下调NB4细胞组织因子表达的作用机制被引量：4
- 2000年
- 目的 研究全反式维甲酸 (ATRA)和三氧化二砷 (As2 O3)下调NB4细胞组织因子 (TF)表达的作用机制。方法 用放线菌酮抑制蛋白合成和用放线菌素D阻断RNA合成后 ,用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)检测ATRA对NB4细胞TFmRNA转录的影响。将含有PML RARα融合蛋白全部编码序列的重组逆转录病毒质粒转染U937细胞 ,以转染空载体的U937细胞为对照 ,用ELISA方法检测ATRA和As2 O3处理的转染PML RARαU937细胞的TF抗原。结果 放线菌酮完全阻断了ATRA对NB4细胞TFmRNA的下调作用 ;ATRA使NB4细胞的TFmRNA的半寿期从正常对照的 6 0min缩短至 30min。转染PML RARα的U937细胞与转染逆转录病毒载体的U937细胞相比 ,其TF表达水平显著升高(P <0 .0 1) ;使用ATRA或As2 O3分别处理转染PML RARα的U937细胞和对照细胞 2 4h ,ATRA和As2 O3均可显著地降低这两个细胞株的TF抗原水平。结论 ATRA对NB4细胞TFmRNA的下调作用依赖于新的蛋白质合成 ,ATRA可能是以间接方式下调APL细胞TFmRNA的转录 ;ATRA处理的NB4细胞TFmRNA的稳定性也有所降低。APL细胞染色体易位产生的融合蛋白PML RARα可能对TF的异常表达有一定的影响。ATRA和As2 O3对TF的下调作用可能不依赖于融合蛋白PML
- 郭为民王鸿利赵维莅璩斌潘玲诸江储海燕王学锋
- 关键词：维甲酸APL三氧化二砷
- 血友病A携带者检测与产前诊断被引量：36
- 2001年
- 目的 建立简便、快速的血友病A携带者检测与产前诊断体系。方法 用PCR方法直接检测FⅧ内含子 2 2倒位或对FⅧ基因内的BclⅠ位点、内含子 13和 2 2中STR和FⅧ基因外的DXS5 2 (ST14)位点的多态性进行遗传连锁分析。结果 应用内含子 2 2倒位的直接诊断率为 47.6 % ;BclⅠ位点的可诊断率为 2 7.8% ;内含子 13和 2 2中STR的可诊断率分别为 2 8.6 %及 2 9.4% ;DXS 5 2的可诊断率为 81.3% ;综合应用直接诊断和间接遗传连锁分析 ,对 2 1个家系进行检测 ,可诊断率为 94.7%。结论 血友病A的携带者检测与产前诊断可先进行内含子 2 2倒位的检测 ,若结果为阳性即可作出诊断 ;若内含子 2 2倒位的检测结果为阴性 ,则可利用FⅧ基因内、外的多个位点多态性结果进行遗传连锁分析 。
- 王学锋刘元昉李志广储海燕桑晓洁樊绮诗王鸿利
- 关键词：产前诊断血友病A携带者遗传病聚合酶链反应
- 血友病A携带者检测与产前诊断(英文)被引量：2
- 2002年
- 目的 血友病A(HA)是FⅧ基因缺陷导致的X连锁隐性遗传性疾病。本研究尝试简单、快速并易于推广的基因诊断方法学 ,完善HA携带者检测和产前诊断体系。方法 应用长距离PCR进行内含子 2 2倒位检测 ,并对FⅧ基因内的BclⅠRFLP位点和两个STR位点 ,以及FⅧ基因外的St14VNTR位点进行连锁分析。结果 共对 2 1个家系进行内含子 2 2倒位检测 ,发现存在倒位的家系占 4 7 6 %。利用此分子缺陷进行 3例产前诊断。进一步联合 4个基因内和基因外多态性位点进行遗传连锁分析 ,总诊断率达 94 7%。结论 存在倒位的家系可依此进行直接诊断 ,长距离PCR使其更为快速简便。对于无倒位的家系 ,利用基因多态性进行遗传连锁分析较为有效可行。
- 刘元昉王学锋储海燕李志广璩斌王鸿利王振义
- 关键词：产前诊断血友病A多聚酶链反应
- 遗传性凝血因子ⅩⅢ缺乏症两种新基因突变的确定被引量：9
- 2002年
- 目的 探讨遗传性凝血因子 (F )缺乏症的基因缺陷。方法 采用PCR、核苷酸测序的方法对两个遗传性F缺乏症家系先证者及其亲属外周血白细胞基因组DNA的FA基因进行检测 ,并用RT PCR检测先证者外周血白细胞FA基因mRNA水平 ;ARMS PCR对 6 0名正常人外周血白细胞基因组DNA的FA基因进行检测。结果 ①发现两种新的基因突变 ,先证者 1在第 12 41位核苷酸由C突变为G ,位于外显子 10 ,导致Ser413Trp(TCGTGG) ,先证者 2及其妹妹在第 2 32位核苷酸由C突变为T ,位于外显子 3,导致Arg77Cys(CGCTGC) ,均为单碱基突变 ,无限制性内切酶酶切位点的改变 ;先证者 1的父母及先证者 2的父、母、舅则分别在DNA水平相同位点呈杂合状态。②采用ARMS PCR法分析正常人群未发现这两种突变的存在。③患者血浆存在少量FA ,而FA基因在mRNA水平几乎没有变化。结论 这两例F缺乏症患者均由于FA基因缺陷造成。患者的FA在细胞内不稳定、易降解可能是F缺乏的原因。家系 1的突变位点在F的核心区 ,对其结构功能的影响较为明显。而家系 2的突变位点位于F的表面 ,可能对蛋白的空间结构产生影响。
- 段宝华王鸿利储海燕王学锋璩斌李稻王红尹俊康文英王振义
- 关键词：基因突变分子机制
- 凝血因子Ⅹ基因外显子1 T58→G突变导致的因子Ⅹ缺陷症被引量：4
- 2001年
- 目的 检测 1例凝血因子Ⅹ缺陷患者的基因突变。方法 PCR对凝血因子Ⅹ基因进行扩增 ,扩增范围包括因子Ⅹ基因的所有外显子及其侧翼内含子序列 ,用DNA测序检测因子Ⅹ的基因突变。结果 因子Ⅹ基因外显子 1第 5 8位核苷酸存在T→G的突变 ,从而导致在外显子 1编码的信号肽中 11Ser(AGT)→Arg(AGG)的错义突变。结论 该基因突变可能是导致患者因子Ⅹ缺陷的原因。
- 尹俊王鸿利王学锋储海燕璩斌郭雪梅康文英段宝华王振义
- 关键词：凝血因子X聚合酶链反应基因突变G突变
- 血友病A基因治疗的临床前研究
- 王鸿利王学锋储海燕张宇舟胡翊群尹俊康文英段保华傅启华丁秋兰王振义
- 基因治疗是治疗遗传性疾病的根本措施。该研究以血友病A（遗传性凝血因子VⅢ缺陷症）为契口，在FVⅢcDNA克隆和去B区（BDD）FVⅢcDNA改造获得成功的基础上，又致力于研究安全有效的表达载体、适宜的基因特异靶细胞以及血...
- 关键词：
- 关键词：血友病A基因
