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何苹萍: 作品数：17 被引量：27H指数：3; 供职机构：广西大学更多>>; 发文基金：广西壮族自治区自然科学基金广西壮族自治区科学研究与技术开发计划中央级公益性科研院所基本科研业务费专项更多>>; 相关领域：农业科学更多>>

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猪圆环病毒2型广西流行株序列比较分析被引量：1: 2009年; 参考GenBank发表的猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV-2)全基因组序列,设计引物,通过反向PCR技术,从广西部分市区疑似"高热病"病猪的组织中,扩增9株PCV-2流行株的全基因,并进行了序列测定分析。结果表明,9个PCV-2分离株基因组全长为1767bp或1768bp。同源性比较发现,9个分离株之间的核苷酸同源性为94.6%～99.9%,与GenBank上已发表的国外分离株比较,同源性为94.4%～100%;9个分离株ORF2之间的核苷酸及其所推导的氨基酸序列同源性分别为93.7%～99.4%和93.6%～99.1%;系统发育树显示,其中7个分离株与法国株、新西兰株关系较近,与美国株和加拿大株关系较远;另外2个分离株与澳大利亚株、美国株亲缘关系较近。; 张宁谢丽华何苹萍秦毅斌陈云霞兰家暖廖承球黄伟坚; 关键词：猪圆环病毒2型基因克隆

猪圆环病毒2型ORF2基因片段的原核表达及间接ELISA诊断方法的初步建立被引量：1: 2008年; 根据猪圆环病毒2型(PCV2)LC株序列,设计合成3对引物,通过PCR扩增PCV2的3个不同ORF2基因片段,分别将其克隆到pET-32a载体中,将重组表达质粒转化大肠杆菌BL21,表达并纯化了重组蛋白。Western-blot分析表明,重组蛋白可以与PCV2阳性血清反应,表明该蛋白具有良好的抗原性。以纯化的重组蛋白初步建立了间接酶联免疫吸附实验(ELISA)方法,经方阵滴定确定最佳包被浓度为0.24μg/mL,血清最佳的稀释度为1∶40。; 屈素洁何苹萍秦毅斌朱芸陈琼黄伟坚; 关键词：原核表达间接ELISA方法

猪细小病毒自然弱毒N株VP2基因的克隆及原核表达被引量：1: 2011年; 为了进一步研究猪细小病毒自然弱毒株(PPV-N株)的自然弱毒分子生物学机理,对PPV-N株VP2基因进行克隆、测序和原核表达研究。结果表明,成功构建PPV-N株VP2基因的克隆重组质粒pMD18-T-VP2及表达重组质粒pET32a-VP2,经SDS-PAGE及Western blotting鉴定,PPV-N株VP2基因在BL21(DE3)plysS菌中成功进行融合表达,表达出约85.4 KDa的VP2融合蛋白,且表达的VP2融合蛋白能与PPV阳性血清发生特异性反应。PPV-N株VP2基因的成功克隆及原核表达为今后研究PPV-N株的自然弱毒的分子生物学机理和研制PPV诊断抗原奠定了基础。; 李斌苏乾莲赵武梁家幸梁保忠何颖秦毅斌何苹萍; 关键词：VP2基因原核表达

广西猪圆环病毒2型ORF2基因的克隆与序列分析及基因分型分析: PCV是一种小的、二十面体对称、无囊膜、共价闭合、单股环状DNA病毒。病毒粒子直径为17nm，是目前发现的最小的动物病毒。根据PCV的致病性、抗原性及核酸序列，将PCV分为PCV1和PCV2两个血清型，将无致病性的PCV...; 何苹萍秦毅斌兰家暖陈云霞黄伟坚刘芳韦英益; 关键词：猪圆环病毒2型 ORF2基因基因分型; 文献传递

广西猪圆环病毒2型的遗传进化分析: 2011年; 【目的】了解广西各地当前流行的猪圆环病毒2型(PCV2)基因型差异、出现的时间、致病性及其今后流行趋势。【方法】根据GenBank中已发表的PCV2核苷酸全序列设计1对引物,从广西不同市(县)采集的猪组织样本(脾脏、肺脏、淋巴结、流产胎儿)中成功克隆获得34株PCV2 ORF2基因序列,并对其进行遗传进化分析。【结果】获得的34株PCV2中有9株ORF2基因全长为705bp,1株为696bp,其余的为702bp;经遗传进化分析,发现PCV2可以分为PCV2a、PCV2b、PCV2c、PCV2d、PCV2e5个基因型,在34株PCV2ORF2基因中,有7株属于PCV2d型,1株属于PCV2e型,25株属于PCV2b型,未发现PCV2a和PCV2c型,而新发现的GXHP-2不归属于任何一个基因型。【结论】广西目前流行的PCV2有PCV2b、PCV2d、PCV2e3个基因型,其中以PCV2b为主。; 廖承球何苹萍郭旋兰家暖张民秀黄福标卢冰霞刘磊刘芳黄伟坚; 关键词：猪圆环病毒2型 ORF2基因基因型遗传进化分析

猪胞内劳森氏菌PCR检测方法的优化及广西猪增生性肠炎流行情况的初步调查: 猪增生性肠炎(PPE),是由胞内劳森氏菌引起的接触性传染病,以来成熟肠细胞发生腺瘤样增生为特征.呈全球性流行,引起顽固性腹泻,严重降低饲料报酬率,时养猪业遣成巨大经济损失.本研究建立并优化了PCR诊断方法,能用于活体检测...; 谢丽华兰家暖黄伟坚肖爱欢张宁秦毅斌何苹萍侯韶毅李桂宣; 关键词：胞内劳森氏菌 PCR检测猪增生性肠炎

猪胞内劳森菌16SrRNA基因的克隆及序列分析被引量：3: 2009年; 胞内劳森菌（Lawsonia intracellularis,LI）是猪增生性肠炎的病原,本试验设计3条引物,采用半巢式PCR,从猪的回肠粘膜中扩增出长为1 457 bp的胞内劳森氏菌16SrRNA基因,并进行序列比较分析。结果表明,与不同动物源性（鼠、仓鼠、鹿、马、鸵鸟等）的增生性肠炎胞内菌核苷酸同源性在98.4%-100%之间,与脱硫弧菌同源性达到88.6%,与一般弯曲杆菌和螺旋体同源性较低（71.8%-73.9%）。; 谢丽华张宁何苹萍李茂宁尹业师韦英益肖爱欢黄伟坚; 关键词：胞内劳森氏菌

猪细小病毒自然弱毒N株非结构蛋白NS1基因原核表达被引量：5: 2010年; 为进一步探讨猪细小病毒自然弱毒N株(PPV-N株)的分子病原学机理,根据GenBank上已发表的PPV全基因组序列(登录号NC_001718)设计1对引物,通过PCR方法扩增获得PPV-N株NS1全长基因,将其克隆到pMD18-T载体上,进而构建原核表达重组质粒pET32a-NS1,并在BL21(DE3)pLysS中进行IPTG诱导表达。SDS-PAGE电泳显示NS1在大肠杆菌中得到成功表达,重组蛋白大小约为90.0 kDa;Western blotting分析表明,该蛋白能与PPV阳性血清发生特异性反应,证明该蛋白具有良好生物学活性。NS1在大肠杆菌中成功表达,且具有免疫原性,可作为PPV临床鉴别诊断抗原。; 苏乾莲李斌赵武梁家幸梁保忠何颖秦毅斌何苹萍; 关键词：猪细小病毒 NS1 原核表达

广西猪圆环病毒2型ORF2基因的克隆与序列分析及基因分型分析: PCV是一种小的、二十面体对称、无囊膜、共价闭合、单股环状DNA病毒。病毒粒子直径为17nm,是目前发现的最小的动物病毒。根据PCV的致病性、抗原性及核酸序列,将PCV分为PCV1和PCV2两个血清型,将无致病性的PCV...; 何苹萍秦毅斌兰家暖陈云霞黄伟坚刘芳韦英益; 文献传递

奥奶净对猪瘟疫苗免疫效果的影响: 2011年; 近年来,养猪业向着规模化和集约化的方向发展,猪场普遍采用高密度地接种猪瘟疫苗来预防猪瘟。但是,由于疫苗保护率低及免疫抑制等因素,猪瘟疫苗免疫失败时有发生,经常出现猪瘟散发病例甚至群发。研究证实,免疫增强剂可以有效解决畜禽免疫失败的问题,提高动物机体特异性和非特异性免疫。奥奶净（OmniGen-AF誖）是一种新型免疫增强剂,为美国俄勒冈州立大学的科学家Forsberg和Puntenney多年的研究成果。; 秦毅斌何苹萍黄伟坚赵武张宁文崇利宁军理; 关键词：猪瘟疫苗免疫效果非特异性免疫免疫增强剂免疫失败