伍展红
- 作品数：7 被引量：10H指数：2
- 供职机构：华南理工大学生物科学与工程学院更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划中央高校基本科研业务费专项资金广东省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程化学工程生物学农业科学更多>>
- 谷氨酸棒杆菌产L-色氨酸重组菌株的构建及发酵初步研究
- L-色氨酸是人和动物体内重要的必需氨基酸，在医药、食品和饲料添加剂等方面有广泛的用途。谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)SPT9(4-FP、6-FT`r、Phe、Tyr)是一株通过传统诱...
- 伍展红
- 关键词：谷氨酸棒杆菌L-色氨酸基因敲除实时荧光定量PCR
- 文献传递
- DNFB柱前衍生法测定发酵液中苏氨酸的含量
- 采用2,4-二硝基氟苯作为衍生化试剂,Agilent 20RBAX SB-C18 (4.6nm×l50nm,5μm)色谱柱,以乙酸钠缓冲溶液(pH6.5,含10mL/LN,N-二甲基甲酰胺)和60％乙腈为流动相梯度洗脱,...
- 吕扬勇伍展红郑穗平
- 关键词：苏氨酸发酵液高效液相色谱
- 文献传递
- 谷氨酸棒杆菌ldh基因的敲除被引量：2
- 2012年
- 谷氨酸棒杆菌中ldh基因编码乳酸脱氢酶,可催化丙酮酸转化生成乳酸。利用重叠延伸PCR的方法,获得中间缺失部分序列的dldh基因片段,将其与载体pk18mobsacB连接,转化大肠杆菌感受态,筛选出阳性转化子后,转化谷氨酸棒杆菌ATCC 13032感受态细胞。分别在卡那霉素抗性平板及10%蔗糖平板上进行两次筛选,利用PCR方法鉴定,成功获得ldh基因缺失的谷氨酸棒杆菌突变株ATCC 13032-Δldh。应用荧光定量PCR检测,ATCC 13032-Δldh中的ldh基因在转录水平与野生型菌株ATCC 13032相比,相对表达量为0。ldh基因的敲除对菌株的生长造成了一定的影响。
- 伍展红郑穗平
- 关键词：基因敲除谷氨酸棒杆菌荧光定量PCR
- 重组谷氨酸棒杆菌产苏氨酸发酵培养基的优化被引量：1
- 2010年
- 通过基因敲除构建了蛋氨酸合成途径关键酶基因metX缺失的重组谷氨酸棒杆菌R102ΔmetX。采用部分因子实验设计考察发酵培养基中各组分对重组菌产苏氨酸的影响。结果表明,葡萄糖、酵母粉和酶解酪素对产苏氨酸影响显著。继而采用最陡爬坡路径逼近最大响应区域,并结合中心组合实验和响应面对3个显著性因素进行分析,得到优化的发酵培养基组成:葡萄糖50.78 g/L,酵母粉6 g/L,酶解酪素0.99g/L,生物素80μg/L,VB1 2mg/L,CaCO3 20 g/L,(NH4)2SO4 15.15 g/L,MgSO4.7H2O 0.5 g/L,KH2PO4 0.5g/L,K2HPO4 0.5g/L,Fe-SO4.7H2O 0.02g/L,MnSO4.7H2O 0.02g/L,接种量8%。采用该优化培养基,供试菌株的胞外苏氨酸浓度为3.35g/L,较优化前提高了30%。
- 吕扬勇伍展红郑穗平
- 关键词：谷氨酸棒杆菌L-苏氨酸响应面培养基优化
- 尾穗苋子叶节离体再生体系的建立被引量：2
- 2010年
- 以尾穗苋为试验材料,取其无菌苗子叶节为外植体,对苗龄为3d、5d、7d的不同子叶节苗态、切割方式以及激素配比等分化再生因素进行优化筛选。结果表明:不同子叶节苗态及切割方式对不定茅分化影响不大,其中子叶刚平展开的子叶节,采用子叶全留的切割方式有利于不定茅的生长;培养基激素配比对不定茅的诱导影响显著,单独使用6-BA能诱导子叶节产生不定芽,但芽生长较慢且弱小,NAA和6-BA配合使用能促进不定芽的生长和伸长,生长健壮,其中1.0mg/L 6-BA+0.2mg/L NAA组合对不定芽的诱导与生长效果最佳。MS培养基中添加0.2mg/L IBA诱导生根的效果最好,生根率可达97.8%。
- 伍展红刘南波郑穗平
- 关键词：尾穗苋子叶节不定芽
- 谷氨酸棒杆菌aroⅡ、trpEGD基因的过量表达及其对色氨酸合成的影响被引量：1
- 2011年
- 以谷氨酸棒杆菌SPT9(Phe-、Tyr-、4-FPr、6-FTr)为出发菌株,采用PCR方法扩增色氨酸合成途径中解除了反馈抑制的关键酶aroⅡ和trpEGD基因,应用大肠杆菌-谷氨酸棒杆菌穿梭表达载体pEC-XK99E在谷氨酸棒杆菌SPT9中对其进行了分别过量表达和串联过量表达。首先对aroⅡ和trpEGD基因分别进行过量表达,得到菌株SPT9-aroⅡ、SPT9-trpEGD,摇瓶发酵试验表明,菌株SPT9-aroⅡ、SPT9-trpEGD的色氨酸产量相对于出发菌株SPT9分别提高了30%、23%;进一步对aroⅡ和trpEGD进行了串联过量表达,得到菌株SPT9-trpEGD-TP-aroⅡ,摇瓶发酵试验表明,该菌株色氨酸产量相对于出发菌株SPT9提高了84%。荧光定量PCR检测表明,菌株SPT9-trpEGD-TP-aroⅡ中aroⅡ、trpEGD基因的表达量分别为出发菌株SPT9的4.0倍和1.3倍。
- 李智涛伍展红郑穗平
- 关键词：谷氨酸棒杆菌L-色氨酸关键酶
- 谷氨酸棒杆菌metX、dapA基因敲除对苏氨酸合成的影响被引量：3
- 2011年
- 谷氨酸棒杆菌中metX基因编码蛋氨酸合成途径关键酶高丝氨酸乙酰转移酶,dapA基因编码赖氨酸合成途径关键酶二氢吡啶二羧酸合成酶。为研究这两个基因缺失对苏氨酸积累的影响,以谷氨酸棒杆菌R102(AHVr)为出发菌株,通过重叠延伸PCR及同源重组技术分别构建了metX、dapA单基因缺失突变株R102ΔmetX、R102ΔdapA以及双基因缺失的突变株R102ΔmetXΔdapA。对出发菌以及上述3株重组菌进行初步摇瓶发酵试验,用HPLC法测定发酵液中苏氨酸含量。结果表明,发酵72 h后,3株重组菌的苏氨酸产量分别为2.58、2.38和3.01 g/L,比原始菌株分别提高了42.5%、31.5%和66.3%。
- 吕扬勇伍展红郑穗平
- 关键词：L-苏氨酸蛋氨酸赖氨酸基因敲除谷氨酸棒杆菌
