任增亮
- 作品数：3 被引量：62H指数：2
- 供职机构：江南大学食品学院更多>>
- 发文基金：教育部“新世纪优秀人才支持计划”江苏省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学经济管理更多>>
- Streptomyces hygroscopicus谷氨酰胺转胺酶酶原基因的鉴定及在大肠杆菌中的表达被引量：10
- 2008年
- 【目的】鉴定来源于吸水链霉菌的谷氨酰胺转胺酶基因;研究其在大肠杆菌系统的克隆与表达;分析该酶与其同源酶的活性中心氨基酸序列。【方法】从本实验室筛选的吸水链霉菌(Streptomyces hygroscopicus;CCTCC M203062)发酵液中,分离纯化得到谷氨酰胺转胺酶酶原(pro-MTGase),测得N-端前十个氨基酸序列并与其它链霉菌来源的相应基因序列比较设计引物,扩增得到pro-MTGase基因,将该基因插入到表达载体pET-20b(+)信号肽pelB下游,构建分泌型表达载体pET/pro-MTG,并转化不同的大肠杆菌宿主BL21(DE3)和Rosetta(DE3)pLysS。【结果】获得了pro-MTGase的完整基因序列,多重碱基序列比对表明其与S.platensis和S.caniferus的pro-MTGase基因同源性高达92%。利用Rosetta(DE3)pLysS通过降温至24℃诱导策略,获得部分胞外表达的酶原。SDS-PAGE显示,胞外表达重组蛋白的分子量约为44kDa,与吸水链霉菌表达的天然酶原相符。诱导4h后发酵液中的重组酶原经胰蛋白酶活化为成熟酶后测得最高酶活为0.24U/mL。【结论】该研究是对吸水链霉菌的谷氨酰胺转胺酶基因的首次报道,也是国内首次利用大肠杆菌实现pro-MTGase的胞外可溶性表达。
- 任增亮张东旭俞梅英赵庆新堵国成陈坚吴敬
- 关键词：吸水链霉菌谷氨酰胺转胺酶大肠杆菌克隆
- 砥砺前行深根沃土赋新章——记江南大学食品学院的发展模式
- 2015年
- “民以食为天”,食品工业关系国计民生,发展食品工业对我国国民经济的持续发展有重要的战略意义。近年来,随着社会经济的发展,中国食品产业及食品科技取得了长足进步。而中国食品工业发展在很大程度上归功于我国近年来在食品科学技术领域人才培养和研究水平的迅猛发展。江南大学食品学院是我国食品工业最著名的学府之一,从成立以来,为我国食品行业培育大批人才,在食品科技领域作出重要贡献。
- 王雯慧任增亮
- 关键词：食品科学技术食品科技
- 大肠杆菌高效表达重组蛋白策略被引量：52
- 2007年
- 大肠杆菌表达系统是基因表达技术中发展最早和目前应用最广的经典表达系统。利用该系统表达重组蛋白具有许多优越性,但其表达效率受诸多因素的影响。综述了国内外利用大肠杆菌表达系统高效表达外源蛋白的策略,主要包括选择合适的启动子、改变信号肽结构、提高 mRNA稳定性、提高翻译效率、表达稀有密码子、降低包涵体形成及蛋白降解,利用融合蛋白与分子伴侣、调控发酵条件实现高密度培养等。
- 任增亮堵国成陈坚吴敬
- 关键词：大肠杆菌基因工程重组蛋白克隆
