于萌 作品数:14 被引量:13 H指数:3 供职机构: 中国医科大学实验动物部 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 辽宁省科学技术计划项目 辽宁省教育厅高等学校科学研究项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 农业科学 更多>>
p63与UNC5D在冬凌草甲素诱导的膀胱癌细胞凋亡中的表达 被引量:1 2011年 目的探讨p63与UNC5D在冬凌草甲素(oridonin)诱导的p53突变型膀胱癌细胞系5637凋亡过程中的表达。方法应用MTT比色法检测oridonin对5637细胞存活的影响,TUNEL法检测细胞凋亡,RT-PCR检测凋亡相关基因mRNA表达,Western blot法检测p63、UNC5D蛋白表达。结果浓度为5,10,20μmol/L的oridonin以剂量依赖方式有效抑制5637细胞的存活并诱导凋亡(P<0.05)。oridonin处理可明显诱导p63和UNC5D的共同表达,而p53及UNC5家族其他成员的表达无明显变化。结论 oridonin能以剂量依赖的方式有效诱导p53突变型膀胱癌细胞5637的凋亡,其作用机制可能与上调促凋亡基因p63、UNC5D的表达有关。 朱育焱 于萌 孔垂泽 李振华 杨春明关键词:冬凌草甲素 P63 P53 膀胱癌 hsa-miR-138的生物信息学分析及分子调控通路预测 被引量:3 2016年 目的对hsa-miR-138进行靶基因、功能富集分析(GO分析)、信号通路富集分析及转录因子预测等生物信息学分析,为后续深入研究hsa-miR-138功能提供实验验证的理论基础。方法通过UCSC基因组浏览器、Target Scan、starbase、DAVID及KEGG公共数据库、Chipbase等在线工具分析hsa-miR-138序列,预测hsa-miR-138-1的靶基因,对预测的靶基因进行GO分析和信号通路富集分析,预测hsa-miR-138的可能转录调控因子。结果 hsa-miR-138序列在各物种间具有高度保守性。通过对目前文献的检索,发现hsa-miR-138-1的靶基因中既有抑癌基因,也有癌基因。GO分析发现hsa-miR-138-1靶基因主要富集在转录调控、转录、RNA代谢过程的调节、基因表达、生物大分子的合成等方面(P<0.01),KEGG通路分析提示相关信号通路主要涉及癌症通路、轴突导向、细胞内噬作用、Wnt信号转导、神经营养因子信号转导等重要生理病理过程。应用Chipbase预测出hsamiR-138的19个调控转录因子。结论 hsa-miR-138可能参与多种重要的生物学过程,并作为双向调节因子调控肿瘤的生物学行为。 孙丹 于萌 郑明星 高营 朱育焱关键词:生物信息学 靶基因 信号通路 miR-489在肿瘤中作用的研究进展 被引量:1 2017年 mi RNA是一类长度约为22 nt的内源性小分子非编码RNA,几乎参与了机体生命活动的所有过程。近年来研究发现,多种肿瘤组织中mi R-489表达下调,其通过转录后抑制靶基因,如HER2、AKT3、SPIN1等的表达,参与肿瘤细胞的增殖、凋亡、侵袭和转移等多种病理过程,并与肿瘤的耐药及发生、发展密切相关。因此,了解mi R-489的表达、调控及其在肿瘤等疾病中的作用及机制,可为其进一步的临床应用奠定基础。本文就mi R-489与恶性肿瘤关系的研究进展进行综述。 孙丹 于萌 黄志弘 朱育焱关键词:MIRNA 肿瘤 定位于人类17号染色体上新发现的非编码RNA-ncRNA基因的鉴定及其在神经母细胞瘤中作用研究 神经母细胞瘤的发病多是由于基因缺陷引起,包括MYCN基因的扩增,1号染色体短臂的缺失,11号染色体长臂的缺失和17号染色体长臂的增添(gain)。其中,以17号染色体长臂的增添在高风险神经母细胞瘤中最为常见,然而有关候选... 于萌关键词:神经母细胞瘤 17号染色体 文献传递 神经母细胞瘤恶性进展相关基因初步筛选及验证 被引量:3 2012年 目的利用神经母细胞瘤(NB)临床标本筛选与恶性进展相关的基因。方法利用比较基因组杂交技术和表达谱基因芯片技术筛选人类17号染色体上某些区域可能存在的与NB密切相关的候选基因,并结合生物信息学分析和RT-PCR检测结果对候选基因进行进一步鉴定。结果通过初步筛选,在人类17号染色体增添区域发现了与NB恶性进展相关的新基因(ncRAN),该基因包含2个剪切体,Nbla10727和Nbla12061。ncRAN在各组织中及MYCN单/多拷贝组细胞中呈现差异性表达,其高表达与不良预后密切相关(P=0.000 221)。结论在17号染色体增添区所鉴定的新基因很可能是1个与NB恶性进展密切相关的癌基因。 于萌 朱育焱 杨春明 王海波 李元元 中川原章 郑志红关键词:神经母细胞瘤 17号染色体 癌基因 CDNA芯片 肿瘤研究常用动物兔病原菌16s rDNA检测方法的建立 2015年 目的:建立肿瘤研究常用动物兔病原菌的快速检测方法。方法:提取经常规方法已被鉴定的兔李斯特氏菌、金黄色葡萄球菌和沙门氏菌DNA,利用PCR技术扩增病原菌16s r DNA全长,经纯化后直接测序。利用BLAST软件从Gen Bank数据库中搜索相关菌株的序列进行序列比对和同源性分析,确定病原菌的种属。结果:测序结果与数据库中搜索到的相关菌株的序列进行序列比对显示,3种病原菌测序序列分别与兔李斯特氏菌、金黄色葡萄球菌和沙门氏菌序列一致,证实了此种方法的可靠性。结论:16s r DNA PCR方法可准确地检测肿瘤研究常用动物兔病原李斯特氏菌、金黄色葡萄球菌和沙门氏菌感染,并且缩短了检测时间。 时伟红 董婉唯 杨葳 于萌 郑志红关键词:病原菌 RDNA 多聚酶链反应 定位于人类17号染色体上新发现的非编码RNA-ncRAN基因的鉴定及其在神经母细胞瘤中作用研究 神经母细胞瘤的发病多是由于基因缺陷引起,包括MYCN基因的扩增,1号染色体短臂的缺失,11号染色体长臂的缺失和17号染色体长臂的增添(gain)。其中,以17号染色体长臂的增添在高风险神经母细胞瘤中最为常见,然而有关候选... 于萌关键词:神经母细胞瘤 非编码RNA 预后 文献传递 pcDNA3.1/myc-His-DJ-1^(M26I)重组载体构建及其对NIH3T3细胞增殖和凋亡研究 被引量:3 2012年 目的构建pcDNA3.1/myc-His-DJ-1和pcDNA3.1/myc-His-DJ-1M26I重组表达载体,为研究DJ-1M26I突变与细胞增殖、凋亡的关系及建立转基因动物模型奠定基础。方法采用突变试剂盒将DJ-1蛋白第26位氨基酸进行突变,分别构建pcDNA3.1/myc-His-DJ-1和pcDNA3.1/myc-His-DJ-1M26I重组表达载体,并采用脂质体介导的方法分别将其转染入NIH3T3细胞,500μg/mL G418压力筛选稳定克隆,对2种转染细胞在DNA水平、RNA水平和蛋白质水平进行鉴定,采用MTT染色方法和AnnexinV-FITC试剂盒进行转染阳性克隆细胞的细胞活力与细胞凋亡检测。结果 pcDNA3.1/myc-His-DJ-1和pcDNA3.1/myc-His-DJ-1M26I重组质粒转染NIH3T3细胞经G418筛选后,PCR方法检测分别获得1个和3个阳性细胞克隆,RT-PCR及western blot方法进行DJ-1-His基因表达检测,结果均证明外源插入基因的表达,MTT实验结果初步证明转染DJ-1M26I基因的NIH3T3阳性细胞组细胞增殖速率低于正常NIH3T3细胞组(P<0.05),转染DJ-1基因的NIH3T3阳性细胞组细胞增殖速率与正常NIH3T3细胞相比无明显差别;细胞凋亡检测表明转染DJ-1M26I基因的NIH3T3阳性细胞组细胞凋亡率高于正常NIH3T3细胞,转染DJ-1基因的NIH3T3阳性细胞组细胞凋亡率低于正常NIH3T3细胞(P<0.05)。结论成功构建pcDNA3.1/myc-His-DJ-1和pcDNA3.1/myc-His-DJ-1 M26I重组表达载体,成功筛选出稳定表达人DJ-1及DJ-1 M26I的NIH3T3细胞。DJ-1 M26I基因突变更易导致NIH3T3细胞的凋亡。 张梅英 徐影琪 王惟 赵越 杨葳 于萌 郭晓冲 秦英 郑志红关键词:DJ-1 NIH3T3细胞 凋亡 pcDNA3.1/myc-His-DJ-1^M26I真核表达载体构建及其在NIH3T3细胞中表达 2012年 目的构建pcDNA3.1/myc-his-DJ-1和pcDNA3.1/myc-his-DJ-1^M26I重组表达载体,为进一步研究DJ-1^M26I基因的功能及建立转基因动物模型奠定基础。方法采用突变试剂盒将第26位氨基酸进行突变,分别构建pcDNA3.1/myc-his—DJ-1和pcDNA3.1/myc-his-DJ-1^M26I重组表达载体,采用脂质体转染的方法分别将pcDNA3.1/myc-his-DJ-1和pcDNA3.1/myc—his-DJ-1^M26I质粒转染NIH3T3细胞并用G418压力筛选稳定克隆,对获得的2种转染细胞在DNA水平、转录水平和蛋白质水平鉴定。结果pcDNA3.1/myc-his-DJ-1和pcDNA3.1/myc-his—DJ-1^M26I质粒转染NIH3T3细胞经G418筛选后,经PCR检测分别获得1个和3个阳性细胞克隆,RT-PCR及western blot方法进行DJ-1-His基因表达检测,结果均证明外源插入基因的表达,MTT实验结果初步证明转染DJ-1^M26I基因的NIH3T3阳性细胞组增殖速率低于正常NIH3T3细胞组(P〈0.05)。结论成功构建pcDNA3.1/myc-his-DJ-1和pcDNA3.1/myc-his-DJ-1^M26I重组表达质载体。 张梅英 王惟 徐影琪 赵越 杨葳 于萌 郭晓冲 秦英 郑志红关键词:DJ-1 NIH3T3细胞 帕金森氏病 DJ-1^(L166P)与DJ-1^(M26I)基因对NIH3T3细胞增殖和凋亡的比较 2012年 目的在细胞学水平比较DJ、DJ-1M26 I、DJ-1L166 P基因对NIH 3T3细胞增殖速率与凋亡的关系,为建立转基因动物模型及帕金森疾病发病机制研究奠定基础。方法分别将pcDNA3.1/myc-His-DJ-1、pcDNA3.1/myc-His-DJ-1L166 P和pcDNA3.1/myc-His-DJ-1M26 I重组质粒脂质体方法转染NIH 3T3细胞,500μg/ml G418压力筛选稳定克隆,对3种转染细胞在DNA水平、RNA水平和蛋白质水平进行鉴定,采用MTT染色方法和Annexin V-FITC试剂盒进行转染阳性克隆细胞的细胞活力与细胞凋亡检测。结果 pcDNA3.1/myc-His-DJ-1、pcDNA3.1/myc-His-DJ-1L166 P和pcDNA3.1/myc-His-DJ-1M26 I重组质粒转染NIH 3T3细胞经G418筛选后,PCR方法检测分别获得1个、4个、3个阳性细胞克隆,RT-PCR及Western blot方法进行DJ-1-His基因表达检测,结果均证明外源插入基因的表达,Caspase-3 RNA水平检测DJ-1L166 P和DJ-1M26 I组表达高于正常NIH 3T3细胞组,而DJ-1组caspase-3转录水平相对最低,MTT实验结果初步证明转染DJ-1L166 P和DJ-1M26 I基因的NIH3T3阳性细胞组细胞增殖速率均低于DJ-1组和正常NIH 3T3细胞组(P<0.05),转染DJ-1基因的NIH 3T3阳性细胞增殖速率与正常NIH 3T3细胞相比无明显差别;细胞凋亡检测表明转染DJ-1L166 P和DJ-1M26 I基因的NIH3T3阳性细胞凋亡率均高于正常NIH 3T3细胞,转染DJ-1基因的NIH 3T3阳性细胞凋亡率低于正常NIH 3T3细胞(P<0.05)。结论 DJ-1L166 P和DJ-1M26 I基因突变均降低NIH3T3细胞增殖速率,DJ-1L166 P和DJ-1M26 I基因突变更易导致NIH 3T3细胞的凋亡,DJ-1L166 P和DJ-1M26 I基因突变对NIH3T3细胞增殖速率和细胞凋亡影响是相似的。 张梅英 任萍萍 徐影琪 王惟 赵越 杨葳 于萌 郭晓冲 秦英 郑志红关键词:DJ-1 NIH3T3细胞 帕金森 凋亡