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实时荧光定量PCR检测大鼠组织Angptl3表达的标准曲线构建: 2009年; 目的:采用实时荧光定量PCR(染料法)建立检测SD大鼠组织血管生成素样蛋白3(Angiopoietin-related protein3,Angptl3)表达量的标准曲线。方法:以SD大鼠肝组织总RNA为模板,通过RT-PCR获得目的DNA片段,用T-A克隆方法将其装载到质粒pUCm-T上,经过转化、质粒提取获得标准品,并以此为模板梯度稀释进行Real-time PCR反应,建立该方法的标准曲线。结果:Angptl3标准曲线相关系数为0.9976,相关性较好;斜率为0.8623,扩增效率适中。结论:成功构建了用Real-time PCR方法检测SD大鼠肝组织Angptl3表达量的标准曲线。; 王继红黄家利程梅曾建涛王欣; 关键词：荧光定量PCR SD大鼠

葡萄糖对L02细胞LXRα与ANGPTL3基因表达的影响被引量：6: 2008年; 目的:研究葡萄糖对L02细胞肝X受体(LXRα)与血管生成素样蛋白3(ANGPTL3)基因表达的影响,探讨LXRα在糖尿病和脂代谢联系中的作用.方法:用5.6,7.0,11.1,28.0和33.0 mmol/L的葡萄糖培养L02细胞,5.6 mmol/L组作为对照组.用胆固醇酶联法测定各组细胞内胆固醇含量,采用RT-PCR方法检测LXRα和ANGPTL3的mRNA表达量.结果:高浓度葡萄糖可促进L02细胞内胆固醇含量上调LXRα和ANGPTL3 mRNA表达,变化差异均有统计学意义(P<0.05).结论:高浓度葡萄糖增加ANGPTL3表达,可能是通过增加细胞内总胆固醇含量而激活LXRα,而LXRα的激活则引起ANGPTL3基因的高表达.; 曾建涛王继红黄家利程梅; 关键词：血管生成素样蛋白3 肝X受体Α 糖尿病

葡萄糖和胆固醇对人肝细胞ANGPTL3基因和蛋白质表达的影响被引量：2: 2008年; 目的观察葡萄糖和胆固醇对人肝细胞株(L02)血管生成素样蛋白3(angiopoietin-like pro-tein3,ANGPTL3)表达的影响,探讨其与糖尿病和高胆固醇血症的关系。方法以L02细胞为研究对象,将其分为葡萄糖组(G)和胆固醇组(CH)。分别在葡萄糖浓度为5.6mmol/L(G1)、7.0mmol/L(G2)、11.1mmol/L(G3)、28.0mmol/L(G4)、33.0mmol/L(G5)的培养液和含胆固醇10μmol/L、25μmol/L、50μmol/L、100μmol/L的培养液中培养。采用RT-PCR方法检测各组细胞ANGPTL3 mRNA表达量,用Western印迹方法检测其蛋白质表达水平。结果G3～G5组葡萄糖可剂量依赖性地增加ANGPTL3的mRNA表达(P<0.05);在蛋白质表达水平,G2～G5组与G1组比较差异均有统计学意义(P<0.05);G1～G5组各组间两两比较,除G4组与G5组呈现表达量虽升高,但差异无统计学意义(P>0.05)外,其它各组间差异均有统计学意义(P<0.05)。4种胆固醇浓度均可促进L02细胞ANGPTL3的mRNA和蛋白质表达(P<0.05)。结论在一定浓度范围内葡萄糖可剂量依赖性地促进ANGPTL3 mRNA和蛋白质表达;AN-GPTL3的mRNA和蛋白质表达量还受环境胆固醇浓度影响。ANGPTL3的表达可能与糖尿病、高胆固醇血症密切相关。; 程梅王继红李倩黄家利曾建涛; 关键词：血管生成素样蛋白3 糖尿病葡萄糖胆固醇

高脂、胰岛素抵抗合并高脂高糖对大鼠肝脏Angptl3和LPL基因mR-NA转录的影响被引量：1: 2009年; 目的探讨高脂、胰岛素抵抗合并高脂高糖对大鼠肝脏血管生成素样蛋白3(Angptl3)和脂蛋白脂肪酶(LPL)基因mRNA转录的影响。方法建立高脂(HL)、胰岛素抵抗合并高脂高糖(IR-HLG)大鼠模型,采用自动分析仪检测模型大鼠空腹血糖(BG)、总三酰甘油(TG)和胆固醇(TC)含量,采用Realtime PCR定量检测各组大鼠肝组织Angptl3和LPL基因的mRNA转录水平。结果模型组大鼠血清TG、TC含量及肝脏Angptl3和LPL基因mRNA转录水平均较对照组明显升高;IR-HLG组大鼠的BG水平和Angptl3水平较对照组和HL组均明显升高,LPL水平较HL组明显下降。结论随血脂的增高,Angptl3和LPL的表达均增强;在高糖、胰岛素抵抗状态下,Angptl3的表达增高,而LPL的表达则部分受到抑制。; 黄家利王继红程梅王欣曾建涛; 关键词：血管生成素样蛋白3 脂蛋白脂肪酶高脂

Angptl3基因在大鼠高脂模型中组织表达及其与血脂的关系被引量：3: 2008年; 目的探讨Angptl3基因在大鼠高脂模型中各组织表达及其与血脂的关系。方法将60只清洁型SD大鼠随机分为4组:正常对照组、高脂血症组、糖尿病并发高脂血症组、IgA肾病并发高脂血症组。采用定量PCR(SYBR G reenⅠ)方法,检测以上4组大鼠脑、肺、心、胃、肝、肾、脂肪等7种组织中Angptl3 mRNA的表达。结果Angptl3在4组大鼠的肝、肾组织中均有表达,其余5种组织中均未检测出有表达。其中肝表达量占总量的90%左右;并且随着表达总量的增加,肝表达量增加幅度较大。结论Angptl3在成年雄性SD大鼠肝、肾组织中特异表达,且此特异性不随血脂水平的改变而改变。; 王欣王继红黄家利李倩曾建涛商文静; 关键词：高脂血症定量PCR 动物模型

罗格列酮对胰岛素抵抗人肝细胞Angpil3和LXRα基因表达的影响: 2009年; 研究罗格列酮对胰岛素抵抗人肝L02细胞Angptl3基因及与脂代谢相关的LXRα基因的影响。采用高胰岛素诱导法建立胰岛素抵抗模型(IR-L02),分别加入含有和不含罗格列酮的不同葡萄糖浓度培养液培养,用葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法(GOD-POD法)检测培养液残存葡萄糖量,并用RT-PCR方法检测基因Angptl3、LXRα mRNA表达水平的变化。结果表明相同葡萄糖浓度下罗格列酮作用组(IR-R组)的培养液残存葡萄糖量比无罗格列酮作用组(IR组)减少;IR-R组的Angptl3、LXRα mRNA表达水平较IR组显著升高(P<0.05)。; 黄家利王继红程梅曾建涛; 关键词：LXRΑ

罗格列酮对胰岛素抵抗人肝细胞ANGPTL3及LXRα基因表达影响的研究: 目的：建立胰岛素抵抗L02细胞模型，观察罗格列酮对不同葡萄糖浓度下的正常和胰岛素抵抗人肝细胞（L02）内ANGPTL3和LXRα基因表达的影响，进一步探讨血管生成素样蛋白3（Angiopoietin-like prote...; 黄家利; 关键词：肝X受体胰岛素抵抗罗格列酮基因表达; 文献传递

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黄家利