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杀鱼爱德华氏菌新型毒力因子研究进展: 2024年; 杀鱼爱德华氏菌(Edwardsiella piscicida,又称迟缓爱德华氏菌),可感染多种重要水产养殖动物,对全球水产养殖业造成巨大经济损失。杀鱼爱德华氏菌具有很强的环境适应性与抗逆性,通过典型的胞内寄生引发严重感染,为研究水产致病菌毒力机制的模型菌株。除T3SS/T6SS系统等典型毒力因子外,近年来又在杀鱼爱德华氏菌中鉴定出众多新型毒力因子。本文主要综述了杀鱼爱德华氏菌一些新型毒力因子(如逃逸宿主免疫杀伤因子、毒素-抗毒素、硫氧还蛋白和蛋白酶类等)以及新型毒力调控因子的研究进展,可为研究该菌致病性提供参考。; 李静林宫春光舒艾梅张杉杉高博高博; 关键词：毒素-抗毒素系统

罗非鱼格氏乳球菌的分离鉴定、致病性及耐药性: 2024年; 【目的】探究海南文昌罗非鱼大规模持续性发病、死亡的原因。【方法】使用营养琼脂、胰蛋白胨大豆琼脂等培养基从患病肝、脾、肾组织中均分离到单一优势菌。对分离株进行形态特征、生理生化鉴定及16SrRNA基因序列分析确定其生物学地位,通过人工回归感染确定其致病性,利用纸片扩散法进行药物敏感性试验。【结果】分离菌与格氏乳球菌(Lactococcusgarvieae)同源性最高并且聚合为一支,结合形态学特征和生理生化特征,鉴定为格氏乳球菌。血清杀菌实验表明,格氏乳球菌具有较强的抗宿主血清杀菌能力。回归感染实验表明,格氏乳球菌是致病菌,其感染罗非鱼的半致死剂量LD_(50)为2.433×10^(3)CFU/g(标准差为77.249CFU/g)。药敏实验表明,格氏乳球菌具有广谱抗药性。【结论】新型病原格氏乳球菌对罗非鱼具有高感染性和致死率,研究结果可为罗非鱼格氏乳球菌病防治提供参考依据。; 张杉杉莫坤联李静林高博冼健安高博; 关键词：罗非鱼耐药性

昆虫杆状病毒杀虫剂研究与应用综述被引量：6: 2008年; 综述了对野生型昆虫杆状病毒和重组昆虫杆状病毒杀虫剂的研究进展,以及我国昆虫杆状病毒杀虫剂的应用研究现状。; 高博邓柳红易小平肖苏生张春发; 关键词：昆虫杆状病毒

AcNPV polyhedrin与cry3Aa基因的重组与重组融合蛋白在大肠菌中的表达: 2008年; 目的:将cry3Aa基因与斜纹夜蛾多角体蛋白(AcNPV Polyhedrin)基因重组,构建重组蛋白原核表达载体并在大肠杆菌中表达。方法:首先以PHT305a载体质粒DNA为模板,PCR扩增cry3Aa基因。再以PET30a-ph-1a载体质粒DNA为模板,PCR扩增多角体蛋白基因。将两基因片段分别连入PMD18-T克隆载体,测序鉴定。表达载体的构建分为两步,先将SacI和XhoI双酶切下来的cry3Aa基因连入表达载体pET30a,再将PMD18T-Ph经BglⅡ和SacI双酶切,所获得的ph基因片段与具有BglⅡ/SacI末端的pET30a-cry3Aa相连接,构建表达载体pET30a-cry3Aa-ph,表达载体转化进入大肠杆菌BL21(DE3)。IPTG诱导蛋白表达并纯化,SDS-PAGE分析结果。结果:cry3Aa和AcNPV Polyhedrin基因序列与报道完全一致。1mmol/LIPTG诱导4h表达的外源蛋白,经SDS-PAGE分析显示在大约103kDa处有表达产物特异条带。结论:获得cry3Aa与polyhedrine基因的重组蛋白工程菌株,为此基因应用于杀虫剂奠定了基础。; 高博邓柳红易小平张春发; 关键词：BT ACNPV POLYHEDRIN

杀鱼爱德华氏菌新型抗酸系统GadBCD的抗酸作用与致病作用被引量：1: 2024年; 本研究鉴定了鱼类重要致病菌杀鱼爱德华氏菌(Edwardsiella piscicida)抗强酸系统GadBCD及其功能。通过序列分析和共转录实验表明:GadBCD系统由1个谷氨酸脱羧酶、1个谷氨酰胺酶和3个转运体组成,它们组成1个操纵子。qRT-PCR发现强酸和高温刺激细菌时gadBCD表达基本不变,但过氧化氢和宿主血清刺激时gadBCD表达显著上调。利用同源重组构建了GadBCD系统缺失突变株ΔgadP,通过比较野生株和ΔgadP的生长曲线以及酸性压力下存活率等实验,发现GadBCD系统不仅是杀鱼爱德华氏菌抗中强酸的重要参与者,也是抗强酸所必需的;通过比较野生株和ΔgadP在生物膜形成、运动性、抗宿主血清杀伤、感染细胞等方面的差异,发现GadBCD参与了细菌的毒力。综上所述,GadBCD系统是杀鱼爱德华氏菌重要的抗强酸系统,并参与了细菌的致病作用。; 高博高博宫春光张杉杉李静林胡永华; 关键词：抗酸性致病作用

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高博