韩玉珉
- 作品数：18 被引量：192H指数：9
- 供职机构：中国科学院生物物理研究所更多>>
- 发文基金：卫生部科学研究基金国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学化学工程更多>>
- 人工合成的水蛭素基因在酵母中的表达被引量：17
- 1991年
- 本文按水蛭素HV2的氨基酸序列,设计并合成了水蛭素基因,并在酵母α因子表达系统中表达。通过诱变得到的稳定携带水蛭素表达质粒的酵母菌株,在丰富培养基中培养36—48 h后,可在培养液中测得10—20 ATU/ml的分泌的水蛭素表达产物。经过较简单的纯化步骤,得到HPLC纯的水蛭素,其N-端氨基酸序列与天然产物完全相同,并有强烈的抗凝血和抑制凝血酶的活力。从500 ml培养液中可得到约3000 ATU的纯水蛭素,其比活力为6600 ATU/mg。
- 申同健葛庆远韩玉珉王增丰王启松
- 关键词：水蛭素基因合成酵母分泌
- 重组水蛭素与血栓前体关系的研究被引量：13
- 2000年
- 氯胺－Ｔ法碘标水蛭素，采用固相饱和法、固相竞争法分析水蛭素与凝血酶－纤维蛋白原复合物的亲和力及定量结合关系，并分析水蛭素－凝血酶－纤维蛋白原复合物形成的时间反应动力学。结果显示，水蛭素可特异地与凝血酶－纤维蛋白原复合物形成三元复合物，它们的分子配比为１４∶１４∶１（水蛭素：凝血酶：纤维蛋白原）。生理Ｃａ^（２＋）浓度是它们的最佳结合环境，水蛭素与凝血酶－纤维蛋白原复合物结合的亲和常数Ｋ_ａ为９．７２ ×１０~６Ｌ／ｍｏｌ；其结合反应可在３０－４５ｍｉｎ达到平衡，提示水蛭素有作为血栓显像配基的可能性。
- 谭成万卫星张荣军张莲芬韩玉珉金坚
- 关键词：水蛭素凝血酶血栓病
- 水蛭素的分子生物学研究被引量：18
- 1991年
- 本文从分子生物学的角度简述了蛋白酶抑制剂水蛭素的生物学和临床医学作用,结构特点,结构与功能关系,水蛭素与凝血酶之间的作用方式,以及水蛭素基因的克隆与表达。同时还指出了水蛭素基因的复杂性。水蛭素基因结构的阐明,基因的表达调控,将成为今后研究的重要方向之一。
- 韩玉珉申同健
- 关键词：水蛭分子生物学水蛭素
- 人U_1和U_2 snRNA基因5'端区域中SV_(40)T抗原结合位点的作用被引量：1
- 1990年
- 利用寡聚核苷酸指导的基因定位突变技术,从人U_1和U_2 snRNA基因5'端删去或取代能与SV_(40)T抗原结合的位点,构成基因的缺失和取代突变体。在HeLa细胞核抽提物体外转录系统中,U_1和U_2缺失及取代突变基因与野生型基因有相同的转录水平,而且RNA的合成都是从帽子位点的上游开始的。这意味着基因这一区域的突变不改变其体外转录性质。在人的HeLa和293细胞及蛙卵母细胞中,U_1和U_2缺失突变基因不被转录,而取代突变基因的转录却又恢复到野生型基因水平。这表明人的U_1和U_2基因在这三种细胞内的转录与SV_(40)T抗原结合位点的核苷酸排列顺序无关,而由于结合位点的缺失所造成的空间距离上的变化才是影响转录的主要因素。
- 韩玉珉
- 关键词：转录转染
- SV40 T抗原与人U_1和U_2 snRNA基因的特异结合
- 1991年
- 利用DNA结合免疫分析证明,编码人U_1和U_2 snRNA基因的5′端区域含有与SV40 T抗原特异结合的序列。SV40 T抗原与U_2基因的亲和力大于U_1基因。DNasel足印(footprinting)分析取得与DNA结合免疫分析一致的结果。U_1和U_2基因的5′端区域含有能被T抗原所保护的,免于DNasel降解的序列。这两个基因的两条链上都含有约30bp长的DNA被T抗原所保护。U_1基因被保护的区域在-11bp—-42bp之间,而U_2基因被保护区域是在-58bp—-90bp之间。
- 韩玉珉
- 关键词：SV40T抗原免疫
- ^(99)Tc^m-重组水蛭素的制备及血栓动物模型显像研究
- 1999年
- 采用亚氨基噻吩盐酸盐修饰法制备９９ Ｔｃｍ 重组水蛭素（９９ Ｔｃｍ ｒ Ｈ），并进行小鼠体内分布及兔股动、静脉血栓模型显像分析。结果表明：９９ Ｔｃｍ ｒ Ｈ 的标记率为 ９０８％ ， Ｐ Ｄ１０ 过柱前后放化纯度分别为８８８％ 和９３９％ ，比活度为 ３２９２ Ｇ Ｂｑ／ｇ；，在小鼠心、脑、肝、脾、肺摄取低，肾浓聚高，１５ ｍ ｉｎ达到（６４７２±５．０４）％ Ｉ Ｄ，血清除迅速；兔股动、静脉血栓于 １ ｈ 可清晰显影， Ｔ／ Ｂ 分别为 ２２４ 和１９５。
- 万卫星张荣军季顺东谭成孙瑞辉王博诚韩玉珉金坚
- 关键词：重组水蛭素凝血酶显像血栓
- 人U_1和U_2snRNA基因定位缺失和取代突变
- 1990年
- 用寡聚核苷酸诱导的定位突变法,将人U_1和U_2snRNA基因的5'-端调控区域的一段能与SV_(40)T抗原相结合的DNA删去,造成缺失突变,改变这段DNA核苷酸的排列顺序,造成取代突变。突变株用原位杂交法筛选,由限制性内切酶电泳图谱分析和DNA顺序测定得到证实。突变率约为5％。
- 韩玉珉
- 关键词：定位突变
- 地衣芽孢杆菌2709碱性蛋白酶基因的克隆、序列测定及其表达被引量：11
- 1994年
- 以克隆的地衣芽孢杆菌2709碱性蛋白酶编码序列的PCR扩增片段为探针,通过原位杂交从2709基因文库中筛选出两个含有完整的2709碱性蛋白酶基因的阳性克隆:pSC1和pSC7。对pSC7中的插入片段构建若干亚克隆后测定了其全部DNA序列,结果显示该插入片段含2709碱性蛋白酶及其信号肽与导肽(Pro-peptide)在内的全部编码序列(1140碱基对)及长度分别为299和832碱基对的上、下游序列,该序列同M.Jacobs等克隆的地衣芽孢杆菌NCIB6816的Subtilisin Carlsberg基因序列显示了极高的同源性。通过枯草杆菌-大肠杆菌穿梭质粒pBE2将克隆的2709碱性蛋白酶基因转入到蛋白酶缺陷型的枯草芽孢杆菌DB104中,结果表明2709碱性蛋白酶基因在枯草芽孢杆菌中得到了明显的表达。
- 洪扬雷虹赵玉风韩玉珉申同健
- 关键词：地衣芽孢杆菌碱性蛋白酶基因
- 凝血酶介导肾小球系膜细胞细胞间粘附分子1表达上调及水蛭素的阻断作用被引量：49
- 1998年
- 目的为了阐明凝血酶对肾小球系膜细胞细胞间粘附分子１（ＩＣＡＭ－１）表达的影响。方法利用体外培养的人肾小球系膜细胞，分别采用噻唑蓝掺入法、流式细胞术、间接免疫荧光、Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交等方法分别观察了凝血酶对系膜细胞增殖和表达ＩＣＡＭ－１蛋白和ｍＲＮＡ的影响，并同时进行了人工重组水蛭素的阻断实验。结果凝血酶可以显著促进系膜细胞增殖以及系膜细胞ＩＣＡＭ－１蛋白和ｍＲＮＡ的表达，水蛭素可以特异地阻断凝血酶的这些作用。结论凝血酶不仅是肾小球内凝血过程的关键酶，而且具有促进系膜增殖和促进系膜细胞表达ＩＣＡＭ－１的作用。
- 陈香美傅博叶一舟田巍田巍王建中徐启河
- 关键词：凝血酶水蛭素系膜细胞
- 重组水蛭素十二指肠给药后的抗凝血和抗血栓作用实验研究被引量：6
- 1999年
- 韩玉珉鹿峪峰王朝晖吴淑荣周建萍李蜀平关健达
- 关键词：重组水蛭素抗凝血抗血栓
