韩俊峰 作品数:25 被引量:70 H指数:4 供职机构: 第三军医大学基础部全军免疫学研究所 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 重庆市自然科学基金 长江学者和创新团队发展计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 文化科学 农业科学 更多>>
HBV整合引起HepG2细胞microRNA表达谱变化分析 被引量:1 2007年 目的分析HBV整合后引起的肝细胞microRNA表达谱的变化情况。方法利用microRNA芯片,以稳定表达HBV的HepG2.2.15细胞为HBV感染模型,以HepG2细胞为对照,分析二者microRNA表达谱的异同,得到因HBV感染而产生变化的microRNA;并用定量PCR技术来验证结果的可靠性。结果通过microRNA芯片分析和定量PCR验证,HBV感染后可使hsa-miR-30a-5p、hsa-miR-24、hsa-let-7a、hsa-let-7c、hsa-let-7f和hsa-miR-23b6种microRNA下调,使hsa-miR-194、hsa-miR-200a和hsa-miR-3453种microRNA上调。结论HBV整合后,可引起肝脏细胞microRNA表达谱变化。 韩俊峰 阮志华 张蓓 吴玉章关键词:HBV MICRORNA 医学微生物学多媒体教学的几点体会 被引量:3 2009年 多媒体教学作为一种新型的教学手段有传统教学手段不可比拟的优越性,对提高医学微生物学课堂教学质量与教师备课效率起着积极作用。但在教学过程中,必须遵循教学规律,充分发挥教师的主导作用和学生的主体作用,使多媒体更好地为教学服务。 张俊磊 韩俊峰 蹇锐 陈炜关键词:医学微生物学 多媒体教学 多媒体课件 慢性乙型病毒性肝炎患者外周血T淋巴细胞亚群CD27和CD28的表达 被引量:5 2006年 目的分析慢性乙型病毒性肝炎患者外周血T淋巴细胞亚群CD27和CD28的表达,初步探讨其分化表型。方法采集分离健康人和慢性乙型病毒性肝炎患者外周血单个核细胞(PBMC),利用多种荧光标记抗体标记细胞表面分子,再用流式细胞仪检测CD8+和CD4+T淋巴细胞表面CD27和CD28分子的表达。结果31例慢性乙型病毒性肝炎患者CD8+CD27+CD28+T细胞占CD8+T细胞(41.13±24.89)%,低于28例健康对照组的(71.93±14.47)%(P<0.05)。而CD8+CD27-CD28-T细胞占CD8+T细胞(42.16±10.98)%,显著高于健康对照组的(9.16±5.24)%(P<0.01)。慢性乙型病毒性肝炎患者CD4+CD27+CD28+T细胞(80.89±7.93)%和健康对照组(83.17±8.31)%比较,差异无统计学意义。结论健康人外周血T淋巴细胞以CD27+CD28+早期分化表型为主。而慢性乙型病毒性肝炎患者外周血中不同的亚群分化特征又有所不同,CD4+T淋巴细胞的分化表型仍然以CD27+CD28+早期分化表型为主,而CD8+T淋巴细胞中早期分化表型明显减少,晚期分化表型(CD27-CD28-)显著增加。 赵婷婷 杨智清 郭波 邹丽云 韩俊峰 吴玉章关键词:慢性乙型病毒性肝炎 T淋巴细胞 CD27 CD28 氢化可的松处理对于HBV感染成年树鼩的影响 目的:探讨隔日注射氢化可的松对于对HBV感染树鼩进程的影响.方法:将6个月龄成年雄性树鼩分为2组,每组5只;在HBV接种前1天,两组均给予腹腔氢化可的松注射,剂量为50mg/kg,然后腹腔接种含有108 GE (geno... 李军 韩超 蓝竹 韩俊峰 吴玉章关键词:HBV 树鼩 乙型肝炎病毒感染动物模型研究进展 被引量:1 2014年 乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染严重影响人类健康。稳定、可靠的HBV感染动物模型对于HBV感染致病机制的研究和干预措施的研发有重要意义。HBV有很强的宿主选择性,长期以来黑猩猩是唯一的HBV感染动物模型,但黑猩猩的使用受到严格的伦理限制。人们尝试了很多方法以建立HBV感染的小型动物模型。树鼩是唯一可被HBV感染的非灵长类动物。与HBV相关的鸭肝炎病毒和土拨鼠肝炎病毒感染模型的应用推动了对HBV复制机制的认识和治疗方法的评价。近年来发展的人-鼠嵌合体模型则使得人们得以利用常规的实验动物开展HBV研究。这些模型存在各自的优缺点,在某些方面可以互补。本文就目前常用的HBV感染动物模型作一概述。 李军 刘宏利 韩超 熊传奇 曾兴光 韩俊峰 吴玉章关键词:乙型肝炎病毒 动物模型 树鼩 嵌合体小鼠 HBV颗粒的纯化及生物学活性鉴定 被引量:2 2010年 目的优化纯化HBV患者血清中HBV颗粒的技术方法。方法在蔗糖介质中,分别以100 000 g和70 000 g进行不连续蔗糖梯度(60%,45%,35%,25%,15%)离心5 h,离心后,分段吸取6份收集液,PCR荧光定量检测各组分HBV滴度;收集前5份收集液进行超滤,去蔗糖,PCR荧光定量检测HBV超滤液;电镜观察70 000g纯化后的HBV超微形态;70000 g纯化后的HBV颗粒感染树鼩肝细胞,检验70 000 g纯化后的HBV感染活性。结果100 000 g离心造成大量HBV在离心过程中损失,收获率只有21%,70 000g离心不仅降低了离心中的病毒损失,而且可有效对HBV和血清进行分离,收获率达到78%以上,较100 000g还提高3.7倍多。电镜可观察到纯化后病毒液中有大量的病毒颗粒;纯化后的HBV颗粒感染活性良好,可有效感染原代树鼩肝细胞。结论70 000 g不连续蔗糖梯度离心可有效分离纯化HBV病毒,较100 000 g收获率明显提高,纯化后的HBV不但具有典型的HBV特征,还具有良好的生物学感染活性。 曾兴光 石统东 韩俊峰 邹丽云 谢谆怡 刘宏利 吴玉章关键词:乙型肝炎病毒 纯化 重组MHCⅠ类分子K^b-EGFP分子的构建及表达 被引量:1 2004年 目的 构建绿色荧光蛋白标记的MHCⅠ类分子Kb(Kb EGFP融合蛋白 ) ,并在哺乳动物细胞中获得功能性表达。方法 RT PCR的方法获得小鼠MHCⅠ类分子KbcDNA ,克隆入真核表达载体pEGFP N1中EGFP分子的上游 ,脂质体转染COS 7细胞 ,G4 18加压筛选获得抗性重组细胞。荧光显微镜下观测重组分子的表达及胞内定位情况。结果 分子克隆的方法获得了预期的重组质粒 ,质粒经DNA序列测定证实阅读框无误 ,转染COS 7细胞后的抗性克隆胞浆内可以观察到明亮的绿色荧光 ,特征性地分布于细胞质膜 ,及核周、膜下的囊泡结构中。结论 所构建的Kb EGFP融合蛋白在细胞内表达后具有MHCⅠ类分子的特征性分布 ,提示该重组分子具有野生型MHCⅠ类分子的生物学特性和胞内分布特征 。 姜曼 万瑛 周镜然 邹丽云 韩俊峰 吴玉章关键词:绿色荧光蛋白 融合蛋白 HBV源性MicroRNA前体分子预测 被引量:2 2007年 目的:预测HBV基因编码的microRNA分子前体.方法:采用VMir软件,对HBV全基因进行扫描,通过对所得序列的评分及结构分析,得到HBV编码的microRNA的候选前体分子;通过Northern blot实验,对预测结果进行初步验证.结果:通过VMir的预测,得到3个HBV可能编码的microR-NA分子前体,即MD6,MD20,MR31;通过Northern blot实验,只有针对于MD17的探针杂交后出现特异性条带.结论:MD17可能为HBV基因组编码的microRNA前体分子. 韩俊峰 阮志华 张蓓 吴玉章关键词:乙型 微RNAS 浅谈免疫学专业研究生基础科研能力培养 被引量:1 2012年 我国研究生教育是导师负责制,以培养学生的科研思维为主要目标,并且在科研工作开展时系统地对相关实验能力进行培养。但目前很多高校都在进行研究生扩招的情况下,导师很难"手把手"的培养众多的研究生,科研一线的青年工作者,就担负起了研究团队中培养研究生基础科研能力的责任,本文主要结合笔者自身的经验,探讨如何有效地做好研究生基础科研能力的培养工作。 韩俊峰 周振华 张俊磊 吴玉章关键词:免疫学 简易树鼩饲养笼具 本实用新型公开了一种简易树鼩饲养笼具,包括主笼,所述主笼的一端设有门,还包括将所述主笼分割为活动间和休息间两部分并与所述门相对设置的隔板,所述主笼上设有用于固定料盒的料盒栓和料盒口、以及用于固定水瓶的水瓶固定环和水瓶口,... 李军 韩俊峰 周振华 韩超 吴玉章文献传递