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郑倩

作品数:3 被引量:2H指数:1
供职机构:重庆医科大学附属第一医院更多>>
发文基金:重庆市自然科学基金重庆市卫生局医学科研项目国家临床重点专科建设项目更多>>
相关领域:医药卫生更多>>

文献类型

  • 3篇中文期刊文章

领域

  • 3篇医药卫生

主题

  • 2篇质粒
  • 2篇顺铂
  • 2篇耐受
  • 2篇肺癌
  • 1篇上调
  • 1篇逆转
  • 1篇重组质粒
  • 1篇细胞
  • 1篇细胞肺癌
  • 1篇细胞株
  • 1篇小细胞
  • 1篇小细胞肺癌
  • 1篇化疗
  • 1篇化疗耐受
  • 1篇非小细胞
  • 1篇非小细胞肺癌
  • 1篇肺癌A549
  • 1篇RASSF1...
  • 1篇RNA干扰
  • 1篇A549细胞

机构

  • 3篇重庆医科大学...

作者

  • 3篇吴艳凤
  • 3篇陈辉
  • 3篇郑倩
  • 3篇薛成军
  • 2篇李德涛
  • 2篇侯玉磊
  • 1篇李凤增
  • 1篇罗海霞
  • 1篇李雪

传媒

  • 2篇中国细胞生物...
  • 1篇中国老年学杂...

年份

  • 1篇2015
  • 2篇2013
3 条 记 录,以下是 1-3
排序方式:
DNMT3a基因shRNA质粒表达载体的构建及其沉默作用
2015年
目的以DNMT3a mRNA保守序列为靶基因设计针对DNMT3a mRNA的siRNA序列和无效干扰对照序列(HK),并利用基因重组技术将其克隆到真核表达载体p Gensil-1中,构建p Genesil-1-DNMT3a-shRNA、p Genesil-1-HK-shRNA重组质粒。方法应用转化技术将重组质粒转化到大肠杆菌DH5a中,通过卡那霉素抗性筛选出阳性菌落后提取质粒进行酶切和测序鉴定,应用质粒转染技术转染耐顺铂肺腺癌A549细胞(A549-DDP),利用RT-PCR技术检测转染重组质粒24、48、72 h后DNMT3a的沉默效率。结果测序结果与合成序列一致,重组质粒不能够被PstⅠ切开,转染p Genesil-1-DNMT3a-shRNA能够明显抑制DNMT3a的表达,抑制率分别达到25.5%,56.2%,63.4%,且呈明显时间依赖性,而p Genesil-1-HKshRNA无明显抑制作用。结论成功构建了DNMT3a基因shRNA及HK质粒真核表达载体,为进一步实验研究奠定了基础。
吴艳凤李德涛郑倩李雪薛成军陈辉
关键词:RNA干扰重组质粒
RASSF1A逆转A549-DDP细胞对顺铂耐受的实验研究
2013年
RASSF1A表达下降可能是肺癌对顺铂获得性耐药的主要因素之一。为了寻找预测顺铂对肺腺癌A549细胞化疗敏感性的生物标志,该研究以对顺铂耐药的同源A549细胞(A549-DDP)为研究对象,利用转染技术上调RASSF1A表达。RT-PCR和Western blot检测转染前后RASSF1A在mRNA和蛋白水平的表达情况。在不同浓度顺铂作用下,通过MTT法、克隆形成实验检测转染前后细胞活力并计算IC50和计数克隆形成数。在同一浓度顺铂作用下,流式细胞仪检测转染前后细胞凋亡分数的改变。结果显示:顺铂作用24 h后,转染RASSF1A表达质粒的A549-DDP细胞对顺铂IC50明显低于A549-DDP细胞[(39.9±6.3)μmol/L vs(53.0±5.8)μmol/L,P=0.036];不同浓度顺铂连续作用5天后,转染RASS-F1A表达质粒的A549-DDP细胞形成的克隆数明显少于A549-DDP细胞组;在同一浓度顺铂作用下,转染RASSF1A表达质粒的A549-DDP凋亡分数明显大于A549-DDP细胞[(7.10±0.01)%vs(3.80±0.18)%,P=0.002]。结果提示,RASSF1A表达下降可能是肺腺癌A549细胞对顺铂获得性耐药的重要因素之一,RASSF1A表达在临床上作为肺癌患者顺铂化疗耐受的生物标志值得进一步研究。
侯玉磊吴艳凤薛成军李凤增罗海霞郑倩陈辉
关键词:肺癌A549顺铂
DNMT3a表达上调与A549细胞对顺铂耐受关系的实验探究被引量:2
2013年
基因甲基化状态改变是肿瘤获得性耐药产生的重要途径之一。DNMTs是基因甲基化的重要调节因子。为了寻找预测肺腺癌A549细胞对顺铂敏感性的生物标志,该研究以A549细胞和对顺铂耐受的同源A549细胞(A549-DDP)为研究对象,利用质粒转染技术上调A549细胞DNMT3a表达,通过RT-PCR检测转染前后DNMT3a在mRNA水平的表达情况。在不同浓度顺铂作用下,通过MTT法、克隆形成实验检测转染前后细胞增殖率并计算IC50和计数细胞克隆形成数。在相同顺铂浓度作用下,流式细胞仪检测转染前后细胞凋亡分数的改变。结果显示:顺铂作用24 h后,转染DNMT3a表达质粒的A549细胞对顺铂IC50明显高于A549细胞[(9.19±0.91)μmol/L vs(4.96±0.58)μmol/L,P=0.000],转染后的细胞凋亡率明显低于未转染细胞[(1.33±0.38)%vs(5.22±0.67)%,P=0.039];不同浓度顺铂连续作用5 d后,转染DNMT3a表达质粒的A549细胞形成的克隆数均明显高于A549细胞组。结果提示,DNMT3a表达上调是肺腺癌A549细胞对顺铂获得性耐受的重要原因之一。检测肺癌患者血清DNMT3a水平作为预测肺癌患者对顺铂敏感性的生物标志值得进一步研究。
吴艳凤侯玉磊薛成军李德涛郑倩陈辉
关键词:非小细胞肺癌A549细胞株顺铂化疗耐受
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