赵旺生
- 作品数：67 被引量：142H指数：8
- 供职机构：西南科技大学生命科学与工程学院更多>>
- 发文基金：公益性行业(农业)科研专项国家自然科学基金转基因生物新品种培育专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 西农萨能羊BTN基因RNA干扰序列的筛选及重组腺病毒载体的构建与鉴定被引量：2
- 2010年
- 【目的】构建西农萨能羊BTN基因RNA干扰的重组腺病毒载体,为研究BTN基因的功能和作用机制奠定基础。【方法】设计并合成3对针对BTN不同位点的shRNA编码序列,克隆到pENTR/CMV-GFP/U6-shRNA载体中,并与已构建好的表达BTN的pDsRed1-C1-BTN载体共转染HEK293细胞,筛选有效的干扰序列。通过与腺病毒骨架质粒重组,制备表达干扰BTN基因的shRNA的腺病毒,经PacⅠ线性化后,在HEK293细胞中包装并扩增病毒,用TCID50法进行病毒滴度测定,获得高滴度的病毒上清液。【结果】成功构建了西农萨能羊BTN基因的RNAi腺病毒表达载体,腺病毒经包装和扩增后,病毒滴度可达到5×109PFU/mL。【结论】获得了有功能的pAd/PL-DEST/CMV-GFP/U6-shRNA病毒重组子。
- 赵旺生罗军王伟滕炎玲王桢林先滋
- 关键词：RNA干扰腺病毒载体
- 牦牛附睾组织不同区段防御素家族基因的表达谱和生物信息学分析
- 2023年
- 牦牛是高原地区牧民收入的主要经济来源之一,如何提高牦牛的繁殖力一直备受关注。β-防御素是一类具有广谱抗菌活性的肽,研究牦牛β-防御素(Bos mutusβ-defensins,bBD)家族在附睾的表达具有重要意义。本实验使用实时荧光定量PCR技术分析牦牛附睾不同区段β-防御素基因的表达情况。结果显示,共有9个β-防御素基因在附睾头、体和尾的表达存在极显著差异。bBD109、bBD119、bBD121、bBD123、bBD128、SPAG11基因集中于附睾头部表达;bBD125与bBD136集中于附睾体部表达;bBD15同时在附睾头部和体部高表达。结合生物信息学分析发现,这9种β-防御素均存在保守的氨基酸序列、反向折叠的β-转角;bBD136脂溶性最高、疏水性强,bBD125和SPAG11相反;β-防御素基因编码蛋白均为不稳定蛋白(bBD123除外),并且预测分析都存在SP型信号肽(除bBD125外);β-防御素家族基因在附睾不同区段的差异性表达情况以及编码蛋白质的各种理化性质与结构组成等特征都表明其可能在精子成熟过程中发挥着重要作用。
- 张馨王红梅潘美兰李春海潘城赵旺生
- 关键词：Β-防御素附睾牦牛生物信息学分析
- GnRH免疫去势调控绵羊下丘脑-垂体-肌肉生长轴机制的研究进展
- 2023年
- 促性腺激素释放激素(GnRH)是下丘脑分泌的十肽神经激素,在哺乳动物生殖活动中起着重要的调节作用。GnRH免疫去势是利用外源性GnRH刺激动物机体产生大量的GnRH特异性抗体,引起生殖内分泌系统平衡失调,改变下丘脑-垂体-性腺轴间的正常反馈调节关系,减少生殖激素的合成与释放,从而达到免疫去势的目的。文章综述了GnRH免疫对动物生殖轴的影响,动物下丘脑-垂体-肌肉/骨骼生长轴的调控过程,对动物生长的影响和T(睾酮)对动物生殖、生长的影响,以期为进一步研究GnRH免疫去势调控绵羊下丘脑-垂体-肌肉生长轴的机制提供参考。
- 宋天增宋天增赵旺生陈晓英张明曾宪垠刘桂琼
- 关键词：绵羊免疫去势促性腺激素释放激素
- 犏牛精原细胞分化相关基因PP2A的克隆与表达探究
- 2021年
- 蛋白磷酸酶2A(protein phosphatase 2A,PP2A)有着逆转蛋白激酶的作用,对调控磷酸化信号的通路有重要作用。因细胞周期蛋白依赖激酶(cyclin-dependent protein kinases,CDKs)在精子发生的过程有着重要的功能,而PP2A能通过去磷酸化功能影响CDK的活性,即PP2A可能对精子发生的过程产生影响,进而推测PP2A与雄性犏牛不育有关。为了验证PP2A是否对精子的发生产生影响,在本研究中对犏牛睾丸PP2A基因进行克隆得到其CDs区序列,并通过生物信息学法对其分析,同时利用Q-PCR技术检测PP2A基因在牦牛和犏牛的睾丸及附睾中的表达情况。结果表明:犏牛PP2A基因的CDs区编码长度为930 bp,由309个氨基酸组成,是带负电的酸性亲水稳定蛋白;同偶蹄类的同源性较高,在系统进化树中距离较近;不是分泌蛋白而是结合转运蛋白,无跨膜的结构域。牦牛PP2A在睾丸和附睾中的表达都极显著高于犏牛(P<0.01),犏牛的PP2A在睾丸和附睾中的表达下调,推测其可能会对某些重要的信号通路造成一定影响并进一步作用于犏牛精子的发生过程,即PP2A与雄性犏牛不育有关。
- 袁梦李鹏程王红梅杨刘玥玲赵旺生
- 关键词：PP2A雄性不育精子发生
- 西农萨能奶山羊泌乳中期和后期乳腺组织差异基因的筛选被引量：2
- 2010年
- 旨在利用抑制性削减杂交（SSH）技术筛选西农萨能奶山羊泌乳中期和后期的差异表达基因,并用实时定量PCR（Q-PCR）分析差异基因的表达丰度,探讨奶山羊不同泌乳阶段乳腺组织的基因表达规律。本研究以西农萨能奶山羊泌乳中期和后期乳腺组织的mRNA互为检测子（Tester）和驱动子（Driver）构建cDNA消减文库（M-L和L-M）,随机挑选克隆测序,进行序列比对分析,并检测部分差异基因在乳腺组织中的表达丰度。结果,成功构建了泌乳中期和后期的cDNA文库,随机挑选30个克隆测序,得到M-L和L-M文库中与细胞凋亡、抗氧化、脂类代谢、能量代谢等生理过程相关的差异基因,对其中的6个基因进行实时定量分析,发现5个均为阳性克隆,表达水平增加了1.3~5.5倍不等。结果表明,利用SSH技术成功构建了泌乳中期和后期乳腺组织正反向消减cDNA文库,筛选出24个差异基因,为进一步研究奶山羊乳腺组织基因调控机理奠定了基础。
- 武会娟罗军赵旺生王伟
- 关键词：乳腺组织差异表达基因实时定量PCR
- 西农萨能羊BTN基因RNA干扰序列筛选及重组腺病毒载体构建与鉴定
- ＜正＞引言嗜乳脂蛋白（BTN）作为乳腺特异表达蛋白,是一种带有胞质C-端尾巴的跨膜糖蛋白,集中分布在乳腺上皮细胞顶层质膜。BTN仅在泌乳期乳腺中特异表达,而且受乳腺不同的生理阶段影响。在牛及小鼠上的研
- 赵旺生罗军王伟张晓李建华
- 关键词：RNA干扰腺病毒载体
- 文献传递
- 枇杷的研究现状和应用前景被引量：22
- 2006年
- 枇杷是我国一种产量居世界首位的水果,具有极高的食用价值和药用价值。枇杷的叶、花、果和核均可入药,然而由于化学成分不同,导致其药理各不相同。对枇杷各部分的药用价值、有效成分的药学原理以及经济学意义进行了综述,并就其应用前景进行了展望。
- 张婷婷令桢民赵旺生
- 关键词：枇杷
- 犏牛GC基因的克隆、生物信息学分析及表达研究
- 2023年
- 本研究通过分子克隆技术对犏牛GC基因(维生素D结合蛋白VDBP)的编码区进行克隆,分析GC基因的生物信息学特征及其在犏牛和牦牛附睾组织中的表达特点。生物信息学分析结果显示:犏牛GC基因CDS区长1425bp,编码474个氨基酸;GC蛋白无跨膜结构,肽链中亲水性氨基酸的数量显著高于疏水性氨基酸,表明其具有亲水性;组成犏牛GC蛋白的474个氨基酸中,306个氨基酸位于α螺旋区,占氨基酸总数的64.56%;141个氨基酸以无规则状态存在,占总数的29.75%;15个氨基酸位于延伸链区,占总数的3.16%;12个氨基酸位于β转角区,占总数的2.53%;犏牛GC基因氨基酸序列与黄牛、牦牛、水牛等物种存在较高的同源性,分别为99.86%、99.14%和98.32%。qPCR(实时荧光定量)分析结果显示:GC基因在犏牛附睾的表达量高于牦牛(P<0.05)。本研究为犏牛附睾组织中精子发生的相关机理提供了一定的基础数据。
- 吴静潘美兰张馨陈先李春海王鹏张小明潘城张贞贞赵旺生
- 关键词：犏牛GC基因附睾生物信息学分析
- 色瓦绵羊RPL8基因的组织表达特征及生物信息学分析
- 2023年
- 【目的】研究色瓦绵羊核糖体蛋白L8基因(RPL8)在各组织部位的表达特征及其潜在功能作用,揭示RPL8基因调控色瓦绵羊产奶质量的分子作用机制,为推进色瓦绵羊的分子遗传育种提供理论依据。【方法】PCR扩增色瓦绵羊RPL8基因,通过ProtParam、ProtScale、SignalP 5.0、TMHMM 2.0等在线软件分析RPL8基因结构特征及潜在功能,并以实时荧光定量PCR检测其在色瓦绵羊各组织中的表达分布情况。【结果】RPL8基因在色瓦绵羊乳腺、肌肉、心脏、肾脏、脾脏、肝脏、小肠、瘤胃和卵巢等9个组织中均有表达,在小肠、乳腺和卵巢中的相对表达量极显著高于其他组织中的相对表达量(P<0.01)。色瓦绵羊RPL8基因编码区(CDS)序列长774 bp,共编码257个氨基酸残基;基于RPL8基因核苷酸序列相似性构建的系统发育进化树显示,色瓦绵羊与山羊、牦牛、牛等反刍物种的亲缘关系较近。色瓦绵羊RPL8蛋白相对分子量为28024.66Da,理论等电点(pI)为11.04,是一种稳定的碱性亲水性蛋白,不具有跨膜结构,主要定位于细胞质(占78.3%);色瓦绵羊RPL8蛋白存在15个磷酸化位点[7个丝氨酸(S)位点,8个苏氨酸(T)位点],其二、三级结构中均以无规则卷曲为主。色瓦绵羊RPL8蛋白的互作蛋白均为核糖体蛋白,其同源性高达99.90%,其中,RPS5、RPS16、RPL11、RPS3、RPS18和RPS11属于通用核糖体蛋白家族,RPL13属于真核核糖体蛋白家族。【结论】色瓦绵羊RPL8是一种胞内稳定的碱性亲水性蛋白,具有核糖体蛋白的基本结构特征。RPL8基因在色瓦绵羊各组织中的表达具有普遍性,尤其在乳腺和卵巢中呈高表达,说明RPL8基因除了发挥其家族基本功能作用外,在色瓦绵羊乳腺和卵巢组织中可能还影响乳脂含量与卵泡的周期性发育。
- 赵旺生张馨李蕊潘君茹史明艳李永青孙宇孙宇
- 关键词：核糖体蛋白乳腺卵巢
- 奶山羊短链脂肪酸受体GPR41 CDS区的克隆及组织表达分析
- 随着生活水平的提高，人们对肉、奶等食品的需求不仅是色、香、味，更是营养价值的全面提高。转基因技术在改良家畜的肉质、产奶、产毛等经济性状方面具有不可替代的优势，目前己成为畜禽抗病育种及生产性能改良的重要手段。了解家畜脂代谢...
- 孙雨婷罗军王伟赵旺生石恒波
- 关键词：奶山羊转基因克隆
- 文献传递
