许兰俊 作品数:11 被引量:6 H指数:1 供职机构: 北京大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 新疆医科大学科研创新基金 国家高技术研究发展计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
人PDCD5蛋白的结构功能研究 <正>PDCD5是一个新的转位蛋白,在细胞的凋亡过程中起重要作用。一些数据已经表明PDCD5可以在细胞间运输,但发生细胞跨膜转运的分子机制仍不清楚。我们通过多维核磁共振方法,并利用流式细胞仪和荧光共聚焦显微镜对PDCD5... 姚宏伟 许兰俊 冯银刚 刘东升 陈英玉 王金凤文献传递 抗人PDCD10单克隆抗体的制备和鉴定 2006年 目的:制备鼠抗人程序性细胞死亡分子10(programm ed cell death 10,PDCD10)的单克隆抗体,探讨PDCD10蛋白的结构和功能。方法:利用重组PDCD10蛋白为免疫原,免疫BALB/C小鼠,取免疫小鼠的脾细胞和同系小鼠的骨髓瘤细胞Sp2/0进行常规融合,通过间接ELISA的筛选和有限稀释克隆化,获得鼠抗PDCD10蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,通过ELISA,W estern b lot和免疫荧光实验等方法对其特性进行鉴定。结果:成功地建立了3株稳定分泌抗PDCD10蛋白的单克隆抗体杂交瘤细胞株,分别命名为5G1,4F7和3H5。3株单克隆抗体的免疫球蛋白亚类分别为IgG1(4F7和5G1)和IgG2b(3H5)。ELISA检测的单克隆抗体腹水效价可达1∶107。3株单克隆抗体与重组PDCD10蛋白有较强的特异性反应,而与大肠杆菌细胞裂解液以及谷胱苷肽-S转移酶(glutath ioneS-transferase,GST)没有交叉反应。同时,5G1单克隆抗体也能特异性地结合真核细胞内源性和超表达的PDCD10蛋白,免疫荧光竞争结合实验以及W estern b lot的结果证明3株PDCD10的单克隆抗体能够识别不同的抗原表位,内源性以及超表达的PDCD10蛋白主要定位在细胞核。结论:获得了效价高、特异性好的PDCD10蛋白的单克隆抗体,为PDCD10的生物学功能研究奠定了基础。 陈瑶瑶 赵云罡 张婷 许兰俊 马曦 赵红珊 陈英玉关键词:蛋白质类 细胞凋亡 杂交瘤 用于检测可溶性PDCD5蛋白的ELISA方法和试剂盒 本发明提供一种用于检测可溶性PDCD5蛋白的ELISA方法和试剂盒,该方法包括以下步骤:(1)将待测样品与负载PDCD5蛋白第一抗体的固体载体相接触;(2)加入能够与检测标记结合的PDCD5蛋白第二抗体;(3)加入检测标... 陈英玉 马大龙 宋泉声 张颖妹 潘欢 许兰俊文献传递 人程序性细胞死亡分子5与乙酰化转移酶Tip60相互作用的研究 许兰俊趋化素样因子超家族成员7(CKLFSF7/CMTM7)单克隆抗体的制备以及初步鉴定 人趋化素样因子超家族是本室在国际上首先克隆的具有自主知识产权的人类新基因。该家族由9个基因即CKLF(Chemokinek-like Factor,趋化素样因子)和CKLFSF1-8(Chemokine-like Fac... 许兰俊 张婷 陈瑶瑶 王彧 邵陆宁 韩文玲 马大龙 陈英玉文献传递 PDCD5、MDM2、Tip60和P53在食管鳞状细胞癌中的表达及其相关性 被引量:5 2011年 目的探讨PDCD5、MDM2、Tip60和P53在新疆食管鳞癌患者的癌组织、癌旁组织和正常组织中的表达及相关性。方法 RT-PCR检测PDCD5、MDM2和Tip60 mRNA表达;免疫组织化学法检测PDCD5、MDM2、Tip60和P53蛋白的表达(18例哈萨克族、22例汉族)。结果癌组织中PDCD5、MDM2和Tip60 mRNA的阳性率为80.0%、65.0%和97.5%,MDM2 mRNA在癌组织中阳性率高于正常和癌旁组织(P<0.05);半定量RT-PCR结果显示癌组织PDCD5、MDM2、Tip60 mRNA低于正常组织(P<0.05)。癌组织PDCD5、MDM2和P53蛋白表达率低于正常组织(P<0.05);癌组织中PDCD5蛋白的阳性表达与分化程度有关(P<0.05);PDCD5与MDM2 mRNA、Tip60与P53蛋白在癌组织中的表达有相关性(P<0.05)。结论 PDCD5、MDM2、Tip60和P53四者之间可能存在共同的激活机制,构成了肿瘤细胞凋亡的多种途径。 孙伟 马秀敏 丁剑冰 郭辉 朱月洁 许兰俊 白靖平关键词:食管癌 PDCD5 P53 MDM2 趋化素样因子超家族成员3(CKLFSF3/CMTM3)单克隆抗体的制备以及初步鉴定 <正>背景:目的人趋化素样因子超家族是本室在国际上首先克隆的具有自主知识产权的人类新基因。该家族由9个基冈即CKLF(Chemokine-like Factor,趋化素样因子)和CKLFSF1-8(Chemokine-l... 张婷 许兰俊 韩文玲 马大龙 陈英玉文献传递 人重组蛋白PDCD5在治疗自身免疫病中的应用 本发明提供一种人重组蛋白PDCD5在治疗自身免疫病中的应用。人重组蛋白PDCD5能够诱导CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞分化、抑制Th17细胞的分化、抑制炎症细胞因子IL-17A和TNF-α的产生,具有免疫抑制... 陈英玉 马大龙 肖娟 宋泉声 张颖妹 许兰俊 许冬小鼠抗人磷脂酰肌醇3激酶相互作用蛋白1单克隆抗体的制备和鉴定 2010年 目的:制备鼠抗人磷脂酰肌醇3激酶相互作用蛋白1(PIK3IP1)的单克隆抗体(mAb),探讨PIK3IP1蛋白的结构和功能。方法:利用重组蛋白GST-PIK3IP162-168为免疫原,免疫BALB/c小鼠,取免疫小鼠的脾细胞和同系小鼠的骨髓瘤细胞Sp2/0进行常规融合,通过间接ELISA的筛选和有限稀释克隆化,获得鼠抗人PIK3IP1蛋白mAb的杂交瘤细胞株,通过ELISA,Westernblot和免疫荧光技术等方法对其特性进行鉴定。结果:成功地建立了1株稳定分泌抗PIK3IP1蛋白的mAb杂交瘤细胞株,命名为5C6,其免疫球蛋白亚类为IgG1。ELISA检测的腹水效价可达1:107。5C6mAb与重组GST-PIK3IP162-168蛋白有较强的特异性反应,而与大肠杆菌裂解液以及谷胱苷肽2S转移酶(GST)没有交叉反应。同时,5C6mAb也能特异性地结合真核细胞超表达的全长PIK3IP1蛋白和变异体PIK3IP1-v1,但检测不到内源性的PIK3IP1蛋白。共聚焦免疫荧光显微镜结果显示PIK3IP1和PIK3IP1-v1定位于胞质,在胞质中呈现不均一的斑点状分布。结论:获得了效价高、特异性好的PIK3IP1蛋白的mAb,为进一步研究PIK3IP1的生物学功能提供了有用的工具。 常莹 许冬 陈瑶瑶 莫小宁 许兰俊 陈英玉关键词:蛋白质 杂交瘤 鼠抗人CMTM7单克隆抗体的制备和鉴定 被引量:1 2008年 目的:制备鼠抗人CMTM7(CKLF-like MARVEL transmembrane domain containing 7)蛋白的单克隆抗体,探讨CMTM7蛋白的分子结构和生物学功能。方法:通过生物信息学对CMTM7的蛋白序列进行分析,选取了3段序列合成多肽并与钥孔戚血蓝素(keyhole limpet hemocyanin,KLH)偶联,混合后免疫Balb/c小鼠。取免疫小鼠的脾细胞和同系小鼠的骨髓瘤细胞SP2/0进行常规融合,间接ELISA方法进行筛选和有限稀释克隆化,获得鼠抗CMTM7蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,用Westernblot、免疫荧光以及免疫细胞化学等方法对其特性进行鉴定。结果:成功地建立了2株稳定分泌抗CMTM7蛋白的单克隆抗体杂交瘤细胞株,分别命名为MC9和2C9,其免疫球蛋白亚类均为IgG1。MC9单抗识别的抗原表位位于CMTM7氨基酸残基163~175区域(CMTM7163-175),可用于Western blot、免疫荧光和免疫细胞化学分析(immunocytochemistry,ICC)。2C9单抗识别的抗原表位位于CMTM7氨基酸残基19~44区域(CMTM719-44),该单抗只能用于Westernblot分析。初步的功能研究提示,CMTM7蛋白在植物血凝素(phytohemagglutinin,PHA)活化早期的外周血淋巴细胞中表达上调。结论:获得了特异性好、能够识别不同抗原表位以及不同用途的鼠抗人CMTM7蛋白的单克隆抗体,为研究CMTM7蛋白的分子结构以及功能特性奠定了基础。 许兰俊 张婷 邵陆宁 宋泉声 韩文玲 陈英玉关键词:趋化因子类 抗体 单克隆 肽类 杂交瘤