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转牛Myf6基因小鼠脾脏功能的研究被引量：2: 2015年; 为了研究外源基因转入对动物免疫功能的影响,即转牛Myf6基因小鼠脾脏淋巴细胞的增殖能力以及相关细胞因子IL-2、IFN-γmRNA表达的变化,试验随机选择5只转牛Myf6基因的子一代小鼠,采用MTT法体外检测脾淋巴细胞增殖能力和实时荧光定量PCR研究宿主脾脏中的IL-2mRNA、IFN-γmRNA表达变化。结果表明:Myf6子一代小鼠T淋巴细胞、B淋巴细胞的增殖指数与阴性对照组相比显著降低,IL-2 mRNA相对表达量显著降低,IFN-γmRNA表达也出现了显著下降。说明外源基因Myf6转入抑制了小鼠的脾脏免疫机能。; 王彬胡倩常淑伟高朋严云勤曹允考; 关键词：转基因免疫增殖 IL-2 IFN-Γ

一个牛α-actin基因的启动子及其应用: 一个牛α-actin基因的启动子及其应用，属于遗传工程技术领域，其特征在于牛α-actin基因262bp启动子片段内部一段含有3个SRE正调控元件的170bp的核酸序列，将其使用不同引物进行PCR扩增，得到2个170bp...; 严云勤佟慧丽李树峰胡倩赵丹丹李光鹏张伟伟; 文献传递

牛骨骼肌α-actin基因5′上游调控元件及内含子功能的初步分析被引量：2: 2015年; 采用PCR定点突变分析法确定牛骨骼肌α-actin启动子-361^-462bp区域的调控元件Sp1/KLFs、ZF5F和Pax3结合位点的功能;利用基因重组技术,将内含子Ⅰ和内含子Ⅱ分别连在启动子缺失片段的上游和下游,构建双荧光素酶表达载体,使其转染牛骨骼肌卫星细胞和胎儿成纤维细胞,进行活性检测。结果显示,Sp1/KLFs降低牛骨骼肌α-actin基因启动子活性,ZF5F和Pax3均能增强启动子活性。内含子在启动子上游增强了启动子活性,在其下游降低了启动子活性,且顺式调控元件和内含子均具有肌肉特异性。结果表明,初步确定了参与牛骨骼肌α-actin基因转录调控的负顺式调控元件Sp1/KLFs,正顺式调控元件ZF5F和Pax3,发现了内含子插入启动子的位置很重要,为以后构建牛骨骼肌α-actin高活性的启动子奠定了基础。; 胡倩曹允考佟慧丽张伟伟赵丹丹王彬高朋严云勤; 关键词：启动子活性调控元件内含子

牛结蛋白基因启动子的初步改造研究被引量：1: 2016年; 本研究在前期研究工作的基础上,通过添加特异的调控元件对牛结蛋白(Desimn)基因启动子进行改造,以期获得活性较高且具有肌肉组织特异性的启动子。本研究以300bp的牛结蛋白基因启动子为基础,对其进行改造,即通过串联多拷贝的正调控元件的方式,成功构建了3个改造后的结蛋白基因启动子片段:pGL3-desmin300-desmin180、pGL3-MD-αD1-desmin300和pGL3-αD2-αD1-desmin300。结果表明,pGL3-desmin300-desmin180、pGL3-MD-αD1-desmin300和pGL3-αD2-αD1-desmin300的启动子活性分别是野生型启动子pGL3-desmin300的1.67、2.56和2.88倍,说明改造后的启动子片段具有较高的启动活性。同时,牛骨胳肌卫星细胞和成纤维细胞试验结果表明,以上3组改造后的启动子片段具有较强的肌肉特异性,以上高效肌肉特异性启动子片段的应用为提高肌肉产量的转基因家畜肉的生产提供重要帮助。; 亓利思佟慧丽李树峰胡倩严云勤; 关键词：结蛋白调控元件

鸡肠道枯草芽孢杆菌的分离鉴定及生物特性研究被引量：8: 2014年; 为研究和开发动物新型微生态制剂,最大程度的提高经济效益,改变抗生素滥用、药物残留等现状,从健康鸡肠道中分离出1株芽孢杆菌,并命名为W,且对其进行形态观察、生化试验鉴定和16S rRNA序列分析及同源性比较。结果表明,本菌株与Bacillus subtilis strain CICC 10023(GU980947.1)的同源性达99.5%,最终确定该菌株为枯草芽孢杆菌,对该菌株进行药敏试验和安全性试验。结果表明,该菌对青霉素、杆菌肽耐药,对小鼠无致病性。; 王彬曹允考魏亚松常淑伟胡倩温建新; 关键词：枯草芽孢杆菌

利用CRISPR/Cas9技术制备敲除Myostatin基因牛胎儿成纤维细胞株: 2015年; CRISPR/Cas9系统作为第3代人工核酸内切酶,是一种具有广阔应用前景的基因定点修饰工具。肌肉生长抑制素(Myostatin,MSTN)基因能够负向调节肌肉的生长,影响动物的产肉量。为了获得MSTN基因敲除的细胞株,给转基因动物的制备提供材料,试验利用CRISPR/Cas9系统的不同类型的表达载体对牛MSTN基因外显子序列随机设计靶位点,利用T7核酸内切酶I(T7EI)从中挑选出敲除效率最高的靶位点的表达载体,在无筛选标记条件下对牛胎儿成纤维细胞进行基因敲除。结果表明:经过长时间培养获得了基因敲除的细胞株。说明CRISPR/Cas9技术用于基因敲除方面的研究应用前景广阔。; 杨宇张伟伟胡倩佟慧丽严云勤; 关键词：细胞株

牛α-actin基因启动子的改造及其功能验证: 培养高产、优质的肉牛一直是畜牧生产所追求的目标。传统的杂交育种方法存在效率低，周期长等问题。转基因技术可在较短时间内培育出具有优质性状的肉牛新品种，应用前景广泛。高效肌肉特异性启动子能够启动外源基因在骨骼肌细胞中的高效表...; 胡倩; 关键词：杂交育种基因表达; 文献传递

转基因动物细胞中外源基因整合位点的分析被引量：1: 2015年; 旨在通过测定转基因动物中外源基因在宿主染色体上的整合位点来阐述外源基因的整合机制及对该过程中出现的有关问题进行讨论。本研究以MYF6(Myogenic factor 6)转基因小鼠及FAT-1转基因牛为试验材料,采用TAIL-PCR(热不对称交互式PCR)、hiT AIL-PCR(高效热不对称交互式PCR)及本试验室改进的hiT AIL-PCR法,对转基因动物进行了外源基因的整合位点的检测及测序分析。本研究检测到3个MYF6转基因小鼠和一个FAT-1转基因牛的外源基因插入到染色体上的片段,还获得了大量的未能整合到染色体上的PCR片段。通过对以上片段的测序分析,我们发现重组质粒并不一定是在酶切位点断裂,重组质粒可以发生随机断裂,首尾相连等,外源基因整合如宿主染色体,可以同源重组的方式进行整合,也可以进行随机插入。同时,发现并分析了在转基因动物检测中可能存在的问题。通过对外源基因在转基因动物体内整合位点的分析,能够明确转基因动物的遗传背景,能够为转基因动物的生产提供帮助。; 常淑伟严云勤佟慧丽刘丹胡倩王彬高鹏曹允考; 关键词：整合位点同源重组

大豆产量及品质等相关性状对有机无机肥配施的响应研究: 大豆是中国重要粮食作物,已有五千年栽培历史。黑龙江省大豆总产量和种植面积均占全国百分四十以上,是我国大豆的主产区,大豆产量处于我国领先地位。由于大豆是一种需肥度高的作物,所以在大豆种植过程中,合理使用肥料能促进其生长发育...; 胡倩; 关键词：大豆品种施肥方案土壤肥力

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胡倩