王运生 作品数:59 被引量:838 H指数:8 供职机构: 湖南农业大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家重点基础研究发展计划 湖南省自然科学基金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 环境科学与工程 自动化与计算机技术 更多>>
辣椒果实胎座中生防细菌对白绢病的防效 被引量:1 2020年 从辣椒果实胎座中分离出60株内生细菌,平皿对峙培养发现13株细菌对辣椒白绢病菌(Sclerotium rolfsii Sacc.)有拮抗作用,其中6株对白绢病抑制率较高的生防菌对辣椒疫病(Phytophthora capsici)和辣椒炭疽病(Colletotrichum capsici)病原菌也有抑菌活性。16Sr RNA鉴定结果表明,菌株G242和T443为贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis),菌株YZ12、G241、T151、T442为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)。以单一菌株或菌株复配进行盆栽试验,结果 G241和T443复配后对辣椒白绢病的防效达到88.41%,高于单一菌株G241(29.14%)和T443(38.16%)的防效。 吕翠 张亮 黄军 刘清术 郑井元 王运生 戴良英 陈武关键词:辣椒 生防菌 辣椒白绢病 防效 辣椒胶孢炭疽菌CFEM效应因子鉴定及转录组分析 被引量:2 2021年 [目的]本文旨在研究辣椒胶孢炭疽菌(Colletotrichum gloeosporioides)常见真菌细胞外膜蛋白(common in several fungal extracellular membrane proteins,CFEM)的组成和结构。[方法]以辣椒胶孢炭疽菌CSLL^(-1)1的基因组为研究对象,通过生物信息学分析其CFEM效应因子的信号肽、跨膜结构域和亚细胞定位信号等结构特征;利用转录组学途径分析其在病菌与寄主互作过程中的表达特征,并对部分CFEM效应因子进行亚细胞定位分析。[结果]CSLL^(-1)1共编码30个CFEM效应因子,其中26个具有信号肽并可分泌至胞外;17个含有数目不等的跨膜结构域。CFEM效应因子Cghn02929、Cghn09727、Cghn12645和Cghn14146在侵染辣椒果实各阶段均具有较高表达水平,推测其可能参与病菌整个侵染过程。Cghn14146、Cghn09727和Cghn13279定位于细胞膜和细胞质,而Cghn02929、Cghn13471定位于细胞核、细胞膜和细胞质。[结论]明确了辣椒胶孢炭疽菌CFEM效应因子的组成和结构特征,探明了CFEM效应因子间的表达水平和亚细胞定位差异。 刘思珍 欧阳超 满益龙 盛家伟 陈岳 张鑫 郑立敏 李智强 李大伟 张德咏 刘勇 王运生 谭新球关键词:辣椒 胶孢炭疽菌 生物信息学分析 亚细胞定位 短短芽胞杆菌B011基因组中芽胞形成调控基因spo0E的鉴定与表达分析 被引量:1 2023年 短短芽胞杆菌B011是一株具有广谱抗菌活性的植物内生菌,发酵后期形成芽胞。据报道,芽胞形成调控基因Spo0E的编码产物能对Spo0A~P蛋白因子去磷酸化,从而实现芽胞形成的负调控。为了能够进一步验证B011基因组中Spo0E基因的功能和表达情况,为B011菌株的遗传改造提供候选基因,本研究基于B011全基因组序列,通过生物信息学工具预测得到了9个spo0E类似基因,并与其他已公布全基因组序列的101个短芽胞杆菌Brevibacillus菌株进行比较,结果表明短短芽胞杆菌spo0E家族基因在物种分化前就已经存在。转录组测序结果表明,FO446_19435和FO446_04050两个spo0E家族基因在B011中高表达,表达模式表现为先升高,在发酵18 h达到最高,此后下降,这两个基因均存在SQELD基序,推测这两个基因为B011中的两个主效spo0E基因。研究结果可为短短芽胞杆菌B011的进一步开发和利用提供一定的基础。 周向平 王运生 王运生 陈武 王凯歌 刘峰 周立 袁志辉关键词:芽胞 全基因组 双组分系统YvrG/YvrH调控伊短菌素生物合成的研究 2024年 伊短菌素(edeine)是短短芽孢杆菌(Brevibacillus brevis)X23产生的线性非核糖体抗菌肽,具有抑菌谱广、抑菌活性强的特点。通过转录组测序,发现双组分调控因子yvrG/yvrH与伊短菌素生物合成基因簇(ede BGC)的表达模式相反,推测YvrG/YvrH可能参与ede BGC的转录调控。本研究利用Red/ET同源重组技术构建yvrG/yvrH的X23缺失菌株、回补菌株、过表达菌株,通过表型分析及实时荧光定量PCR(RT-qPCR)技术研究YvrG/YvrH对伊短菌素生物合成的影响。结果显示,ΔyvrG/yvrH的抑菌活性显著降低,且ede BGC的表达水平下调,伊短菌素的合成受到了抑制,产量降低了46.75%。综上所述,YvrG/YvrH正调控伊短菌素的生物合成。本研究为伊短菌素代谢工程改造提供了基因调控元件。 于佳 张亮 刘天波 蔡海林 易克 邱丽婷 王运生 刘清术 陈武关键词:抑菌活性 生物合成 Brevibacillus brevis B011次级代谢物中抗青枯菌活性物质的纯化鉴定及生物合成基因簇分析 被引量:2 2023年 青枯病是世界上最为严重的植物细菌性病害之一,生物防治是防控其危害的热点研究领域,而分泌抑菌活性物质被认为是生防菌抑制病原菌的主要作用机制。本研究在前期筛选到对青枯菌有良好拮抗活性的短短芽孢杆菌B011(Brevibacillus brevis B011)基础上,采用色谱法分离纯化到抗青枯菌的主要活性物质,通过串联质谱和核磁波谱分析方法鉴定了其结构,并根据B011菌株全基因组序列,预测了活性化合物生物合成相关基因及其合成途径。结果表明,B.brevis B011次生代谢物中抑制青枯菌的主效活性物质为伊短菌素A(edeine A),次效活性物质为N-乙酰基色胺[N-(2-(1H-indol-3-yl)ethyl)acetamide]。这两种化合物对青枯菌的抑制活性为首次报道。基因簇预测结果表明,B011菌株基因组中存在完整的edeine合成基因簇,共包括17个基因,即edeA~edeQ,且基因簇中的基因结构完整,基因序列高度保守。B011基因组中有多个N-乙酰基色胺的生物合成相关基因,包括17个脱羧酶编码基因和54个乙酰转移酶编码基因,可能分别参与色氨酸脱羧反应和色胺的乙酰基转移反应,但具体由哪些基因参与还需进一步的研究。研究结果可为该生防菌的应用提供理论指导,也可为后续解析其生物合成途径及通过合成生物学方法进行定向改造奠定基础。 周向平 陈武 刘天波 王运生 王凯歌 刘峰 李小慧 袁志辉关键词:生物合成基因簇 相似穿孔线虫在中国的适生区预测 被引量:77 2007年 【目的】相似穿孔线虫(Radopholus similis)是中国一类检疫对象,随着国际贸易日益加剧,该线虫传入中国的风险也日益加大,急需对其适生性进行分析。【方法】利用已广泛用于物种潜在分布预测的GARP与MAXENT两种生态位模型预测相似穿孔线虫在中国的适生区,并对预测结果进行了阈值依赖和非阈值依赖比较。【结果】两个模型均能较好地预测相似穿孔线虫的潜在地理分布;预测在中国适生区主要分布在南方各省,包括海南、广东、福建、云南、台湾等省区;经检验MAXENT预测结果较GARP好。【结论】相似穿孔线虫可随花卉苗木的国际运输传入中国,并可在中国南方沿海地区及花卉进出口大省云南省等地区发生;上述地区的进出口口岸应加强对相似穿孔线虫的检疫工作。 王运生 谢丙炎 万方浩 肖启明 戴良英关键词:相似穿孔线虫 GARP MAXENT 柑橘主要病害成灾机理及绿色防控关键技术与应用 被引量:1 2020年 柑橘是我国重要的水果产业,有4,000多年的栽培历史.目前,我国柑橘种植面积为4,000万亩,产量4,000余万吨,均居世界前列.但柑橘溃疡病、黄龙病为重要的检疫性病害,柑橘砂皮病影响树势和果品外观,造成严重的经济损失.据怀化市植保植检站调查,严重的果园,柑橘砂皮病的病果率在80%以上,病情指数高达63.3,砂皮病果最低以几分钱一斤被处理掉.按砂皮病果比正常果平均价格低1元/kg计算,2013年、2014年、2015年,怀化市柑橘砂皮病果约50万吨、56万吨、85万吨,3年损失分别达5亿元、5.6亿元、8.5亿元. 易图永 王运生 谭小平 何可佳 戴良英 洪艳云 张佳峰 刘双清 唐前君关键词:植保植检站 检疫性病害 病果率 黄龙病 柑橘溃疡病 湖南猕猴桃溃疡病菌16S rDNA和16S-23S rDNA间隔区序列的克隆与分析 被引量:2 2015年 为明确湖南省猕猴桃溃疡病其致病菌的种类与特征,以猕猴桃主栽品种红阳、米良1号的溃疡病感病枝条为材料,采用BPA培养基、平板划线和梯度稀释法分离病原菌。利用引物27F/1492R和Psa F1/Psa R2对湖南省猕猴桃溃疡病菌16S r DNA和16S-23S r DNA间隔区序列(ITS)进行PCR扩增并进行核苷酸序列测定及相似性分析。获得Psa-JSHY株系、Psa-LXHY株系以及Psa-LXML株系的16S r DNA基因片段1 383 bp及16S-23S r DNA间隔区序列280 bp,且序列一致。经序列相似性比较表明:所分离株系的16S r DNA与法国181、新西兰ABAC9、意大利IKB4等株系的16S r DNA基因序列一致,与日本的KW11等株系存在3个碱基的差异,相似性为99.78%,与国内分离的11-830-1株系存在4个碱基的差异,相似性为99.71%;16S-23S r DNA-ITS序列与中国SXHY11-1、西班牙EFA131.1、葡萄牙PA838、韩国KBE9等株系的ITS序列一致。构建16S r DNA及16S-23S r DNA-ITS序列的进化树,可以看出所分离的株系与已报道的P.syringae pv.actinidiae各菌株聚在同一个进化枝上。以上结果表明,湖南地区分离的3个猕猴桃溃疡病菌致病株系均属于P.syringae pv.actinidiae。 尹春峰 林文力 肖伏莲 卜范文 段科平 王运生关键词:猕猴桃溃疡病 RDNA 生态位模型在外来入侵物种风险评估中的应用研究 随着全球经济一体化进程的不断加快,世界贸易自由化越来越成为一种趋势。以此为背景的国际大环境为外来物种的入侵、传播和扩散创造了条件。外来物种的入侵在给世界很多国家造成不可逆转的生态灾难的同时也造成了巨大的经济损失。由于我国... 王运生 肖启明 戴良英 谢丙炎关键词:外来入侵物种 风险评估 文献传递 湖南省柑橘黄龙病菌的PCR检测及序列分析 被引量:2 2012年 从湖南省8个市(县)采集柑橘黄龙病疑似植株的叶片,以特异引物进行PCR检测。结果表明:8个市(县)所采样品均检测到了柑橘黄龙病病原菌,其中新宁、武冈、隆回、洞口和通道县为首次发现,各地病原菌序列与柑橘黄龙病亚洲种(M94319)的同源性高达99.1%~100%;不同地区的柑橘黄龙病病原菌存在微小差异,其中新宁与通道县病株差异稍大。这说明由特异性引物建立的PCR检测技术具有特异性强、准确率高、可重复性好等特点,可用于柑橘黄龙病的快速检测。 唐娅媛 易图永 王运生 戴良英关键词:PCR检测