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重组质粒pET32a-hIL-23R-CHR及其构建表达: 本发明利用基因工程技术，构建了重组质粒pET32a-hIL-23R-CHR，并通过PCR法获得了8种hIL-23R-CHR突变体，突变体比天然形式具有更高的结构稳定性和活性，可用于自身免疫性疾病的治疗。本发明还提供了该重...; 高向东郭薇朱玥姚文兵罗成王辰; 文献传递

一种人IL12Rβ1-CHR蛋白及其Fc融合蛋白: 本发明公开了一种人IL12Rβ1-CHR蛋白及其Fc融合蛋白，编码该类蛋白的基因以及该类蛋白在治疗自身免疫疾病方面的用途。本发明提供的蛋白对于hIL-12/IL-23具有高亲和力，并可在体外和体内拮抗IL-12/IL-2...; 姚文兵郭薇王辰高向东王欣郁冬梅雷雯; 文献传递

新型IL23拮抗剂: 本发明涉及一种能结合并拮抗IL-23作用的重组人IL-23受体胞外区/Fc融合蛋白。融合蛋白编码基因富含哺乳动物细胞偏爱密码子，并经CHO稳定转染细胞株高表达。该蛋白由基因优化的IL-23R-CHR活性片段和人免疫球蛋白...; 高向东郭薇王欣姚文兵王辰郁冬梅陈语聪王宇恒; 文献传递

Fc融合蛋白在药学领域的研究进展被引量：6: 2014年; Fc融合蛋白是指利用基因工程等技术将某种具有生物活性的功能蛋白分子与Fc片段融合而产生的新型重组蛋白,其不仅保留了功能蛋白分子的生物学活性,还具有一些抗体的性质,如通过结合相关Fc受体延长半衰期和引发抗体依赖细胞介导的细胞毒性效应等。对Fc融合蛋白及其在药学领域的研究进展进行了综述。; 王宇恒郭薇王欣王辰高向东姚文兵; 关键词：FC受体

人Th17细胞体外诱导分化条件的研究被引量：3: 2016年; 通过密度梯度离心法从人新鲜血液中分离获得人外周血单核细胞(PBMCs),比较分析加入不同细胞极化因子(IL-1β、IL-6、TGF-β和IL-23)以及诱导不同时间(1,2,3,4 d)对Th17细胞分化的影响,利用流式细胞仪、ELISA方法以及Q-PCR技术考察相关指标,评估人体外Th17细胞的分化水平。研究表明,IL-1β、IL-6、TGF-β和IL-23单独均能对Th17细胞的分化起到促进作用,联用IL-1β、IL-6、TGF-β和IL-23时可使Th17细胞体外分化效率达到最佳。随着诱导时间的延长,Th17细胞分化水平逐渐升高,培养3 d时达到峰值,继续增加培养时间分化率反而出现降低。最终确立人Th17细胞体外分化的最佳诱导条件:在加入CD3抗体和CD28抗体的基础上,同时加入IL-1β、IL-6、TGF-β以及IL-23共同培养人PBMCs3 d可有效地刺激人Th17细胞的分化,并且流式细胞检测Th17细胞分化率达到近10%,ELISA检测细胞上清液中IL-17A含量达到近3 ng/m L,Q-PCR方法分析IL-17 mRNA基因表达升高达15倍,此方案具有操作简便、周期短、成本低廉等优点,为Th17细胞的功能研究及相关疾病治疗药物的研发建立了有效的检测平台。; 王辰郭薇王欣郁冬梅王宇恒姚文兵; 关键词：人外周血单核细胞 TH17细胞体外诱导分化

小鼠Th17细胞体外诱导分化条件的研究被引量：1: 2013年; 为筛选并建立小鼠体外有效的Th17分化,比较并建立3个小鼠Th17细胞体外分化模型:ICR移植排斥Th17细胞分化模型,MOG抗原肽诱导Th17细胞分化模型以及非抗原特异性Th17细胞分化模型,ELISA法分别检测细胞上清炎性因子IL-17的表达水平,软件分析统计学意义,在此基础上进一步优化Th17细胞分化相关影响条件,流式细胞仪检测Th17细胞(CD4+IL17+)的分化水平从诱导前0.58%增加到8.28%,确立小鼠Th17细胞体外分化最佳方案,为研究小鼠Th17细胞分化机制以及相关自身免疫性疾病治疗靶向分子筛选提供有效的检测平台。; 郭薇王辰罗成王宇恒王欣高向东; 关键词：TH17细胞免疫排斥体外分化

P40家族成员及其在自身免疫性疾病中的作用被引量：4: 2011年; 作为P40家族中研究最为广泛的细胞因子,白细胞介素-12(Interleukin-12)其最显著的特点是有助于Th1细胞分化,参与由Th1细胞所介导的免疫性疾病。而白细胞介素-23(Interleukin-23)与Th17细胞增殖有关,最新发现Th17介导的免疫反应在实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)和多发性硬化症(MS)疾病方面发挥重要作用,并且其分化途径的提出对传统的Th1/Th2细胞免疫也带来了新的挑战[1]。该家族的另外两个成员P40单体和P40同源二聚体也参与免疫调控,实验证明P40分子不仅在细胞内感染及炎症过程中起着重要的调节作用,而且与银屑病、多发性硬化症、Crohn's病等多种自身免疫性临床疾病的发病密切相关。; 郭薇朱玥罗成王辰姚文兵; 关键词：白细胞介素-12 白细胞介素-23 自身免疫性疾病

重组质粒pET32a-hIL-23R-CHR及其构建表达: 本发明利用基因工程技术，构建了重组质粒pET32a-hIL-23R-CHR，并通过PCR法获得了8种hIL-23R-CHR突变体，突变体比天然形式具有更高的结构稳定性和活性，可用于自身免疫性疾病的治疗。本发明还提供了该重...; 高向东郭薇朱玥姚文兵罗成王辰

可溶性重组人IL23R-CHR在大肠埃希菌中的表达、纯化及活性研究: 2013年; 利用人白细胞cDNA文库体外扩增获得hIL23R-CHR目的基因,克隆至原核表达载体pET22b/pET28a/pET32a,转化BL21(DE3)宿主菌,并对工程菌的表达方式(直接表达、可溶性标签融合表达、分泌表达及包涵体表达)及表达量进行比较,确立pET 32a为表达载体,经IPTG诱导表达后通过镍亲和柱分离纯化融合蛋白Trx-IL23R-CHR,肠激酶4℃酶切Trx-IL23R-CHR分子24 h,上镍柱进行二次纯化,获得纯度达90%以上的rhIL23R-CHR分子。亲和力实验证实:原核重组表达的hIL23R-CHR与hIL23在物质的量比为1∶1时可以有效结合,小脑HE病理切片提示rhIL23R-CHR分子对实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)模型鼠有一定的保护作用。; 郭薇王辰王宇恒高向东; 关键词：IL-23 原核表达分离纯化

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王辰