王国超
- 作品数:35 被引量:51H指数:5
- 供职机构:石河子大学更多>>
- 发文基金:国际科技合作与交流专项项目公益性行业科研专项公益性行业(农业)科研专项更多>>
- 相关领域:农业科学生物学医药卫生更多>>
- BVDV Npro基因原核表达载体的构建及表达
- 本研究对BVDV Npro基因进行了克隆,选用大肠杆菌表达体系表达对其进行表达,通过SDS-PAGE和Western blot分析发现表达的重组Npro蛋白具有良好的反应原性,为进一步研究BVDVNpro非结构蛋白的功能...
- 王国超乔军孟庆玲刘昱成陈双庆陈创夫
- 关键词:牛病毒性腹泻病毒基因克隆原核表达载体重组蛋白
- 文献传递
- 黄病毒科瘟病毒属三种病毒多聚蛋白基因同义密码子偏爱性分析
- 猪瘟病毒(CSFV)、牛病毒性腹泻病毒(BVDV)和羊边界病毒(BDV)是黄病毒科瘟病毒属成员,分析这3种病毒多聚蛋白酶基因密码子使用特点,初步探讨3种病毒的多聚蛋白酶基因进化及对不同宿主的适应策略。本文运用EMBOSS...
- 王国超刘昱成乔军孟庆玲杨海波贺志昊彭叶龙谢堃陈创夫
- 关键词:动物疾病同义密码子
- 文献传递
- 少孢节丛孢菌胞外丝氨酸蛋白酶P186基因的克隆、序列分析及表达被引量:1
- 2014年
- 根据GenBank中少孢节丛孢菌丝氨酸蛋白酶P186基因序列设计特异性引物,运用RT-PCR扩增获得目的基因片段,构建重组表达质粒pET32a-P186,转化到大肠杆菌BL21(DE3),以IPTG进行了诱导表达。结果表明,P186基因cDNA全长为1224 bp,编码407个氨基酸,其中第1~21位为信号肽序列,氨基酸序列的第156~167位、192~202位、343~353位分别是天冬氨酸(Asp160)、组氨酸(His192)、丝氨酸(Ser345)活性位点所在区域,属于Subtilase家族,包括2个潜在的N-联糖基化位点( Asn249、Asn342)及与底物结合的S1区( SBP) Ser251 Ile252 Gly253和Ala277 Ala278 Gly279。SDS-PAGE分析结果显示,表达产物的分子质量约为62 kDa。 Western Blot 分析结果表明,P186重组蛋白可以与抗蛋白粗提液多克隆抗体发生反应。为了揭示少孢节丛孢菌捕食线虫的分子机制,首次克隆并表达了少孢节丛孢菌丝氨酸蛋白酶P186基因,为进一步研究丝氨酸蛋白酶P186的生物学功能奠定了基础。
- 赵海龙孟庆玲乔军陈双庆王国超谢堃胡政香才学鹏
- 关键词:少孢节丛孢菌克隆
- BVDV-2 E2基因的原核表达及重组蛋白反应原性的研究被引量:4
- 2013年
- 为了对BVDV进行诊断,根据GenBank登录的BVDV-2E2基因序列,设计特异性引物,对BVDV-2新疆分离株SW E2基因进行扩增,克隆入T载体中测序,然后亚克隆入BL21(DE3)表达载体pET-28a中,构建重组表达载体pET-28a-E2,并转化入大肠埃希氏菌中。用IPTG进行诱导重组菌,SDS-PAGE和Western blot分析表达产物。SDSPAGE分析证实表达的重组融合蛋白相对分子量为32ku;Western blot分析表明该重组蛋白可与BVDV-2多克隆抗体发生特异性血清学反应,证实表达的重组E2蛋白具有良好的反应原性,为BVDV-2诊断试剂研发奠定基础。
- 刘昱成孟庆玲乔军王国超张倩贺志昊杨海波陈创夫
- 关键词:BVDVE2基因原核表达
- 羊口疮病毒新疆流行株的分离鉴定及其遗传进化分析被引量:11
- 2015年
- 【目的】研究羊口疮病毒(Orf virus,ORFV)新疆流行株的遗传变异情况。【方法】采集新疆石河子地区疑似感染ORFV的羔羊唇部结痂病料,通过PCR扩增、Vero传代细胞分离培养、电镜观察、动物回归试验等方法,检测、分离和鉴定ORFV毒株,对分离鉴定的3株ORFV毒株保护性抗原基因B2L和F1L及毒力基因VIR、GIF和VEGF分别进行克隆、测序及遗传进化分析。【结果】从病料中分离鉴定出3株ORFV新疆流行株(ORFV-SHZ1、ORFV-SHZ2和ORFV-SHZ3)。分析结果显示,ORFV分离株保护性抗原基因B2L、F1L相对保守,B2L和F1L基因编码氨基酸序列与其他参考株的同源性分别为88.6%~97.9%和86.7%~97.4%;3个毒力基因的变异相对较大,尤其是VEGF基因。VIR、GIF和VEGF基因编码氨基酸序列与其他参考株的同源性分别为91.8%~97.3%,85.2%~97.0%和71.5%~98.5%。基于B2L和VIR基因的遗传进化树分析表明,ORFV-SHZ1和ORFV-SHZ2分离株均与台湾分离株的亲缘关系最近。【结论】试验分离的ORFV新疆流行株可能是由台湾株与其他毒株重组后产生的,且其毒力基因发生了较大的变异。
- 杨海波孟庆玲乔军才学鹏贺志昊刘昱成彭叶龙王国超陈创夫都曼.努尔坎杰
- 关键词:羊口疮病毒遗传进化分析
- 捕食线虫性真菌-少孢节丛孢菌粘附蛋白基因的克隆及生物信息学分析
- 陈双庆孟庆玲乔军赵海龙王国超赵新霞罗建勋才学鹏
- 羊口疮病毒新疆野毒株SHZ1 B2L和F1L基因的克隆及遗传进化分析
- 引言:羊口疮(Orf)又称羊接触传染性脓疱皮炎或传染性脓疮等,是由痘病毒科、副痘病毒属的羊传染性脓疱病毒所引起的一种绵羊和山羊的接触性传染病.目的:为了研究羊口疮病毒(ORFv)新疆野毒株的遗传进化情况.方法:参照Gen...
- 杨海波贺志昊孟庆玲乔军彭叶龙王国超刘昱成陈创夫
- 少孢节丛孢菌胞外丝氨酸蛋白酶P186基因的克隆、序列分析及表达
- 引言寄生性线虫对畜牧业的生产发展可以产生巨大的影响。食线虫性真菌是线虫的自然天敌,它们能捕食活的线虫和寄生在虫卵里,把它们当作自己的营养来源,因此这种生物防控方法日益受到各国学者的广泛关注。少孢节丛孢菌(Arthrobo...
- 赵海龙孟庆玲乔军陈双庆王国超谢堃胡政香
- 检测SA肠毒素SEI的试剂及制备方法和试剂盒
- 本发明公开了快速检测SA(金黄色葡萄球菌)肠毒素SEI的试剂及制备方法和所构成的试剂盒,通过基因工程技术制备了SA重组肠毒素SEI,并与抗SA肠毒素SEI单克隆抗体和羊抗鼠IgG配合组装成ICCGIC试纸条,实现针对液体...
- 乔军孟庆玲孟丹乔梦凡伍晔晖王学领曹旭东刘昱成王国超田振中张星星蔡扩军赵春光
- 文献传递
- 牛乳头瘤病毒基因2型流行株全基因组的克隆及序列分析被引量:8
- 2013年
- 为了解牛乳头瘤病毒(Bovine Papillomavirus,BPV)新疆流行株基因型及其基因组遗传变异情况,用乳头瘤病毒L1基因简并引物FAP59/FAP64对新疆沙湾县奶牛皮肤肿瘤组织样品进行PCR扩增,测序后确定,BPV基因型;设计6对BPV基因型特异性引物,经扩增、测序、拼接后获得BPV流行株全长基因组序列。L1基因序列分析表明,BPV2-SW01流行株为BPV-2基因型;该毒株基因组全长7 944bp,包括E6、E7、E1、E8、E2、E4、E3、E5、L2和L1 10个开放阅读框(ORF)。遗传进化树分析显示,BPV2-SW01归于Delta乳头瘤病毒属,与BPV-1和BPV-13进化关系最近。
- 贺志昊孟庆玲乔军刘昱成杨海波王国超才学鹏陈创夫
- 关键词:全基因组序列遗传进化分析