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哮喘血清诱导气道上皮细胞中MAL的表达及柴朴汤干预的影响被引量：4: 2015年; 目的观察大鼠哮喘血清诱导气道上皮细胞表达T细胞成熟相关蛋白(T-lymphocyte maturation associated protein T,MAL)以及用柴朴汤血清干预对气道上皮细胞MAL表达的影响。方法健康SD雄性大鼠64只,随机抽取32只分为柴朴汤高(3.00 g/kg)、中(1.50 g/kg)、低(0.75 g/kg)剂量组、生理盐水组,每组8只,连续给药7 d,每天2次,药后经心脏采血分离血清分别得到柴朴汤高、中、低剂量血清组、正常血清组。剩余32只以卵蛋白、氢氧化铝造哮喘模型,通过心脏采血后分离得哮喘血清,并取肺组织进行HP染色。取正常大鼠气道上皮细胞培养,分别设正常血清组、柴朴汤高剂量血清+哮喘血清组(下称柴哮高组)、柴朴汤中剂量血清+哮喘血清组(下称柴哮中组)、柴朴汤低剂量血清+哮喘血清(下称柴哮低组)、正常血清+哮喘血清组(下称盐哮血清)及哮喘血清组,诱导各组上皮细胞,用半定量逆转录-聚合酶链反应(Reverse Transcription Polymerase,RT-PCR)检测大鼠气道上皮细胞中MAL的表达,用免疫组织化学(Immunohistochemistry,IHC)检测MAL蛋白在气道上皮细胞中的表达。结果哮喘血清干预后,与正常血清组比较,MAL m RNA和蛋白表达显著降低(P<0.05),盐哮血清组较正常血清组也明显降低(P<0.05);柴哮高、中、低组较盐哮血清组及哮喘血清组有所增强(P<0.05),柴朴汤血清作用后,气道上皮细胞中MAL的表达明显上调。结论哮喘血清可诱导气道上皮细胞中MAL的表达下调,柴朴汤上调MAL的表达,维护气道上皮细胞的正常形态和功能。; 刘鑫夏之罗晓青熊花; 关键词：哮喘柴朴汤气道上皮细胞血清药理学

柴朴汤对气道上皮细胞表达TGF-β1的调控作用: 2015年; 目的观察柴朴汤调控气道上皮细胞表达转化生长因子-β1(transfoming growth factor-β1,TGF-β1)的影响,探讨柴朴汤治疗哮喘的分子机制。方法在2012年12月—2014年1月选取健康雄性SD大鼠进行实验,将大鼠气道上皮细胞均匀等量接种于6孔板上,大鼠气道上皮细胞共分6组:正常血清组(A组),柴朴汤高剂量血清组+哮喘血清组(B组)、柴朴汤中剂量血清组+哮喘血清组(C组)、柴朴汤低剂量血清组+哮喘血清组(D组)、生理盐水血清组+哮喘血清组(E组)、哮喘血清组(F组)。以免疫组织化学法(免疫组化)检测TGF-β1蛋白在气道上皮细胞中的表达。以半定量RT-PCR检测TGF-β1 m RNA的表达。组间差异显著性检验用F检验,两两比较用t检验,P<0.05为差异有统计学意义。结果 A组TGF-β1蛋白阳性颗粒的平均光密度(average optical density,AOD)值最低,为(0.25±0.08),B、C、D、E、F组TGF-β1蛋白的AOD值分别为(0.40±0.10)、(0.49±0.06)、(0.60±0.06)、(0.65±0.11)、(0.67±0.12),AOD值依次增高,A组与其余各组比较差异均有统计学意义(均P<0.05);B、C组比较差异无统计学意义(P>0.05),B、C组与D、E、F组分别比较差异均有统计学意义(均P<0.05),D、E、F组相互比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。TGF-β1 m RNA在A组中表达最低,为(0.47±0.05),B、C、D、E、F组分别为(0.58±0.05)、(0.59±0.04)、(0.66±0.04)、(0.67±0.06)、(0.68±0.06),表达逐渐增加,A组与其余各组比较差异均有统计学意义(均P<0.05);B、C组相互比较,差异无统计学意义(P>0.05);D、E、F三组相互比较差异均无统计学意义(均P>0.05),B、C组与D、E、F组比较差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论哮喘血清刺激气道上皮细胞后使TGF-β1表达上调,而柴朴汤可调控气道上皮细胞TGF-β1表达。; 刘鑫江珍珠熊花罗晓青; 关键词：气道上皮细胞柴朴汤含药血清转化生长因子-Β1

哮喘豚鼠气道TGF-β1重塑及黄芪的干预研究被引量：6: 2014年; 目的观察黄芪对慢性哮喘豚鼠模型气道重塑的影响及机制。方法 SPF级雄性豚鼠40只随机分成:对照组、模型组、黄芪注射液组、地塞米松组,每组10只。采取HE染色观察气道重塑,图像分析仪分析肺组织气道重塑情况,免疫组化方法测气道中TGF-β1蛋白的表达。结果与对照组相比,模型组气道壁结构发生改变,支气管管腔变窄,气道上皮细胞脱落,平滑肌增生/增殖肥大。经黄芪或地塞米松治疗后上述改变明显减轻。模型组支气管壁厚度、支气管壁平滑肌厚度、支气管壁平滑肌细胞核数量分别较对照组显著增加。模型组TGF-β1蛋白的积分光密度值(IOD)均较正常组明显增高,黄芪治疗后TGF-β1 IOD值显著下降。结论黄芪注射液能够抑制慢性哮喘模型的气道重塑,其机制可能通过抑制TGF-β1的表达有关。; 张满燕熊花陆煜刘鑫; 关键词：哮喘 TGF-Β1 气道重塑

NGF在哮喘大鼠模型中的表达及柴朴汤的干预研究被引量：1: 2013年; 目的通过观察NGF在哮喘大鼠模型中的表达变化,并用柴朴汤进行干预,探讨柴朴汤在哮喘大鼠中的治疗作用,为哮喘的预防及治疗提供进步的思路。方法健康SD大鼠40只,随机分为对照组、哮喘组、NGF-抗体组及柴朴汤组。以卵清白蛋白致敏及反复激发复制哮喘大鼠模型,柴朴汤及NGF抗体进行干预,常规切片观察气道内管壁厚度及气道平滑肌厚度;RT-PCR检测NGFmRNA的表达;免疫组化法检测NGF蛋白的表达。结果哮喘组大鼠支气管及血管周围大量炎症细胞聚集,总气管壁、气管内壁及气道平滑肌增厚,肺组织NGFmRNA及NGF蛋白的表达增高,与对照组比较,差异有显著性(P<0.05)。柴朴汤组及NGF-抗体组与哮喘组相比炎症细胞浸润程度下降,气道壁结构改变如平滑肌增厚减轻,气道重塑程度降低,大鼠肺组织内NGF蛋白的表达降低。结论柴朴汤可减轻哮喘大鼠气道重塑,其机制可能与下调NGF的表达有关。; 刘鑫罗晓青张恒平刘斌熊花王小莉黄艳; 关键词：哮喘 NGF 柴朴汤气道重塑

柴朴汤含药血清对支气管上皮细胞TLR-4及NF-κB表达的影响被引量：7: 2015年; 目的:观察柴朴汤含药血清对支气管上皮细胞(bronchial epithelial cells,HBECs)中核转录因子-κB(nuclear transcription factor-kappa B,NF-κB)及Toll样受体-4(Toll-like receptor 4,TLR-4)表达的影响,探讨柴朴汤治疗哮喘的机制。方法:制备柴朴汤含药血清及哮喘血清。将体外培养的气道上皮细胞分为6组进行处理:正常血清组(A组),柴朴汤高剂量血清+哮喘血清组(B组),柴朴汤中剂量血清+哮喘血清组(C组),柴朴汤低剂量血清+哮喘血清组(D组),生理盐水+哮喘血清组(E组),哮喘血清组(F组),采用免疫细胞化学及real-time PCR检测哮喘血清及不同剂量的柴朴汤含药血清对支气管上皮细胞中TLR-4、NF-κB蛋白及mRNA表达的影响。结果:TLR-4、NF-κB蛋白及mRNA在A组表达最弱,经哮喘血清干预后E、F组TLR-4、NF-κB蛋白及mRNA表达均明显增强,与A组比较差异有统计学意义(P<0.05);柴朴汤干预后B、C、D组NF-κB蛋白及mRNA表达下降,与E、F组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:哮喘血清可诱导气道上皮细胞TLR-4及NF-κB表达明显增强,而柴朴汤含药血清能下调哮喘血清诱导的支气管上皮细胞中TLR-4及NF-κB的表达。; 刘鑫刘穆华罗晓青熊花; 关键词：气道上皮细胞 TOLL样受体-4

哮喘豚鼠气道IL-13变化及黄芪的干预研究被引量：1: 2013年; 目的探讨哮喘豚鼠气道中IL-13表达的变化,及黄芪对其的干预作用。方法健康雄性豚鼠40只随机分成4组:正常对照组(A组),模型组(B组),黄芪注射液组(C组),地塞米松组(D组)。以腹腔内注射联合雾化吸入卵蛋白复制哮喘气道重塑模型,图像分析仪分析气道重塑情况,免疫组化方法测气道中的表达。结果①哮喘气道平滑肌增生是气道重塑的主要原因,黄芪可通过抑制气道平滑肌增生,从而抑制气道重塑。②免疫组化显示:气道中IL-13的表达在B组中表达较A组高,C组与D组较B组均明显降低,差异有显著性(P<0.01)。结论①在哮喘豚鼠气道重塑模型气道中IL-13的表达明显增高,支持其在哮喘发病中的作用。②黄芪治疗哮喘的机制可能与抑制IL-13的表达生成有关。; 张满燕熊花陆煜刘鑫; 关键词：哮喘 IL-13

柴朴汤对气道上皮细胞中MAL表达的调控作用: 目的阐明柴朴汤调控气道上皮细胞表达T细胞成熟相关蛋白/(T-lymphocytematuration associated protein T,MAL/)的分子机制,明确柴朴汤上调MAL能减少气道上皮细胞分泌转化生长因子...; 熊花; 关键词：哮喘气道上皮细胞 MAL; 文献传递

基因芯片技术筛选哮喘大鼠差异表达基因的研究被引量：3: 2013年; 目的利用基因芯片技术寻找哮喘大鼠与正常大鼠之间差异基因的动态变化,寻找参与哮喘发病的新基因。方法分别于激发哮喘2、4、8周处死大鼠收集肺泡灌洗液行炎性细胞及嗜酸性粒细胞计数,取肺组织行HE染色、病理图像分析,提取肺组织RNA行基因芯片筛选及实时定量PCR验证。以基因表达倍数值2.0和基因表达倍数值-2.0为阈值来确定差异表达基因,然后用GO及Pathway分析对差异表达基因进行功能分类分析,结果以P<0.05为差异显著性标准。结果从24 358条表达基因谱中,筛选出哮喘大鼠与正常大鼠持续性差异表达2倍以上的基因有13条,其中发现Mal和TPD52L1等新基因参与哮喘疾病过程。结论 Mal、TPD52L1基因在肺组织中异常表达,影响哮喘的病程进展。; 刘鑫熊花刘斌王小莉罗晓青黄艳; 关键词：哮喘基因芯片 MAL

柴朴汤调控VEGF、TGF-β1的表达对哮喘大鼠气道重塑的影响被引量：2: 2014年; 目的探讨柴朴汤治疗哮喘的作用机制及与血管内皮生长因子(VEGF)、气通上皮能分泌转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的关系.方法40只大鼠随机分成4组:正常对照组(A组)、地塞米松干预组(B组)、柴朴汤干预组(C组)、模型组(D组),每组10只.采取苏木精-伊红染色观察气道重塑,RT-PCR方法检测肺部VEGF、TGF-β1 mRNA表达,免疫组化方法检测气道壁VEGF、TGF-β1蛋白表达.结果D组显示支气管上皮组织增生,支气管平滑肌肥大,周围可见大量炎性细胞浸润,并伴有新生血管的形成,管腔变窄,管壁及基底膜增厚,管腔内可见黏液栓.D组大鼠VEGF和TGF-β1的mRNA相对灰度值均为最高(P<0.05),VEGF和TGF-β1的蛋白的积分光密度值(IOD)均为最高(P<0.01);A组均为最低(P<0.05,P<0.01);B、C组间表达差异无统计学意义(P>0.05),但低于D组.结论哮喘大鼠VEGF、TGF-β1表达水平增高,VEGF、TGF-β1可能参与了哮喘大鼠的气道重塑.早期使用柴朴汤治疗可下调VEGF、TGF-β1蛋白的表达,从而减轻气道重塑.; 黄艳旷昕熊花刘鑫罗晓青刘斌; 关键词：哮喘柴朴汤转化生长因子-Β1 气道重塑

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熊花

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