汲言山
- 作品数：32 被引量：101H指数：7
- 供职机构：军事医学科学院基础医学研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学轻工技术与工程更多>>
- 人CD34抗原基因克隆及鉴定
- 1995年
- ＣＤ３４抗原是一个阶段特异性白细胞分化抗原，在早期造血调控方面起着重要的作用。本文采用ＲＴ－ＰＣＲ方法，从高效表达ＣＤ３４抗原的ＫＧ－ｌａ细胞系中成功地克隆出ＣＤ３４抗原全长ｃＤＮＡ，并对重组基因进行了酶切鉴定和序列分析。结果表明除胞内区有一碱基改变，其它序列与报道完全一致。
- 舒翠玲汲言山沈倍奋王建安孙启鸿胡美茹
- 关键词：CD34抗原基因克隆
- 人CD_（34）抗原基因在痘苗病毒系统中的表达
- 1995年
- 从ｐＵＣ１８－３４重组质粒双酶切分离得到编码人ＣＤ＿（３４）抗原的全长ｃＤＮＡ片段，将此基因插入痘苗病毒载体ＳｍａＩ位点，构建了重组质粒ＮＳＡ１１７５－３４。采用Ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ方法，将质粒ｐＪＳＡ１１７５－３４导入已被野生痘苗病毒感染的ＴＫ￣－１４３细胞，用ＢｕｄＲ和ＬａｃＺ双筛选，获得带有人ＣＤ＿（３４）抗原基因的重组痘苗病毒。经活细胞免疫荧光（ＩＦＡ）和碱性磷酸酶－抗碱性磷酸酶（ＡＰＡＡＰ）检测表明，重组痘苗病毒能够特异地表达人ＣＤ＿（３４）抗原。人ＣＤ＿（３４）抗原基因的表达，为探讨ＣＤ＿（３４）抗原结构和功能以及研制ＣＤ＿（３４）单克隆抗体奠定了基础。
- 舒翠玲汲言山沈倍奋董家新孙英勋赖春宁孙启鸿于鸣胡美茹
- 关键词：CD34抗原基因表达
- 小麦蛋白质的加热效应被引量：12
- 1993年
- 随着小麦热处理温度的升高,其食用品质先变好后变差,同时盐溶、醇溶和稀乙酸溶解的蛋白质数量下降,而残留蛋白质数量增加。凝胶过滤分析表明:醇溶蛋白质分子量分布越来越连续。较高分子量的蛋白质组分随温度升高而减少。SDS-PAGE分析得到:醇溶蛋白质较高分子量亚基减少,小麦全部蛋白质亚基的种类和数量基本无变化。热处理温度<100℃时,小麦蛋白质之自由巯基总量无变化。表明热处理小麦食用品质的改善不是依赖蛋白质二硫键的增加,而是面筋蛋白质的存在状态和相互间作用能力的改善。
- 汲言山赵友梅秦礼谦
- 关键词：小麦蛋白质烘焙品质
- 一种制造重组人粒-巨噬细胞集落刺激因子的方法
- 本发明涉及一种利用基因工程技术制造重组人粒-巨噬细胞集落刺激因子方法，其目的在于提高粒-巨噬细胞集落刺激因子的表达水平，便于纯化制备。利用PCR技术改构其cDNA成熟肽编码区5′端，消除其强二级结构，将其插入高效表达载体...
- 汲言山沈倍奋
- 文献传递
- E-选择素突变体的构建和表达
- 1998年
- 从ｐＵＣ１８／Ｅ－选择素（Ｅ－ｓｅｌｅｃｔｉｎＣＤ６２Ｅ）重组质粒，以ＰＣＲ的方法扩增得到Ｅ－ｓｅｌｅｃｔｉｎ突变体ＣＤ６２Ｅ１和ＣＤ６２Ｅ２基因。将其分别插入痘苗病毒表达载体ｐＪＳＡ１１７５的单一ＳｍａⅠ位点，在痘苗病毒真核系统中进行了表达。初步的细胞粘附功能试验结果表明，Ｅ－ｓｅｌｅｃｔｉｎ分子不同结构域的缺失可削弱其粘附能力，为进一步研究Ｅ－ｓｅｌｅｃｔｉｎ公子的结构与功能奠定了基础。
- 胡美茹蔡铀庆孙英勋于鸣裴武红汲言山沈倍奋
- 关键词：E-选择素疫苗病毒突变体
- 免疫毒素用于自体骨髓移植治疗白血病的实验研究及初步临床被引量：1
- 1991年
- 目前自体骨髓移植被越来越多地用于白血病治疗,然而在缓解期从病人抽取的骨髓细胞可能含有残留的肿瘤细胞,当大剂量放、化疗后回输给病人,将来有可能引起白血病复发。现在有很多方法可以用来去除这些瘤细胞,免疫毒素是安全有效的方法之一。本文报道了由抗CD2、CD5和CD8单抗与蓖麻毒素组成的抗T免疫毒素,抗CD9、CD10单抗与蓖麻毒素组成的抗C-ALL免疫毒素在体外对靶细胞的特异性细胞毒作用,及用于临床净化骨髓的初步结果。
- 沈倍奋黎燕贺永怀陈兴汲言山赵薇薇王文香杨科藤爱萍梅巍
- 关键词：自体骨髓移植免疫毒素白血病
- α_1－抗胰蛋白酶PCR定点突变体的构建与分析
- 1995年
- 利用一对寡核苷酸引物，对含有α＿１－抗胰蛋白酶（α＿１－ＡＴ）ｃＤＮＡ基因的质粒进行定点诱变，使３５８Ｍｅｔ－ＡＴＧ突变为Ａｒｇ－ＡＧＧ。经过Ｓａｎｇｅｒ双脱氧链要末端终止法进行ＤＮＡ序列测定，表明α＿１－ＡＴ被成功地定点突变。将突变得到的α＿１－ＡＴＰｉｔｔｓ基因克隆入ｐＢＶ２２０载体中并进行表达，得到了有抗原活性的凝血酶抑制剂α＿１－ＡＴＰｉｔｔｓ表达产物。以一对引物代替两对引物，节省了引物合成的费用，方法简便、快速、经济。
- 叶玲刘建伟金灵逯好英汲言山孙淑英
- 关键词：突变体凝血酶抑制剂引物PCR
- 人髓过氧化物酶基因cDNA克隆及急性白血病髓过氧化物酶基因的表达被引量：2
- 1993年
- 应用PCR技术和DNA重组技术从HL-60细胞中克隆人髓过氧化物酶(MPO)轻链和部分重链基因cDNA片段,经核酸序列分析确证克隆片段全长769bp。将克隆的MPO cDNA片段作为探针,对一组白血病细胞系和急性白血病病例样本细胞的mRNA进行Northern印迹和点印迹分析,结果显示,MPO基因表达产物与急性白血病的粒细胞源性相关,因而它可作为白血病分型中确定细胞源性的重要标志。
- 朱元晓赖春宁王建安汲言山王槐春白炎
- 关键词：CDNA克隆白血病过氧化物酶
- 人脐静脉内皮细胞E-选择素分子克隆
- 1999年
- 为探讨Ｅ－选择素结构与功能的关系。方法：采用人脐静脉内皮细胞，经分离培养及激活后，提取 总 ＢＮＡ，用 Ｍ－ＭＬＶ逆转录酶将其转录成 ｃＤＮＡ第一链，设计引物行ＰＣＲ扩增。结果：其产物经电泳测定为 １．９ ｋｂ的 片段，即Ｅ－选择素ｃＤＮＡ的全长编码区。先将ｃＤＮＡ连接至ＰＵＣ－１８载体并转化至ＪＭ－１０９中，提取质粒ＤＮＡ。再将 Ｅ－选择素酶切为３个片段进行序列测定，显示人脐静脉内皮细胞Ｅ－选择素与文献报道略有差异：即５３位Ｇ→Ａ；６５５ 位Ｔ→Ｃ而导致氨基酸的改变（亮氨酸→脯氨酸）；１９１４－１９１６位缺失ＡＧＣ（丝氨酸）。结论：为进一步研究Ｅ－选择素 结构与功能的关系，制备探针与单克隆抗体打下基础。
- 马民慧汲言山胡美茹沈倍奋
- 关键词：人脐静脉内皮细胞粘附分子E-选择素CDNA
- E－选择素cDNA克隆和表达被引量：6
- 1996年
- 从内皮细胞总ＲＮＡ中用ＲＴ－ＰＣＲ方法扩增出Ｅ－选择素ｃＤＮＡ全长编码区，并将其克隆到ｐＵＣ１８载体中，构建了重组质粒ｐＵＣ１８／Ｅ－ｓｅｌｅｃｔｉｎ，对此质粒进行了酶切及ＤＮＡ序列分析鉴定。将Ｅ－ｓｅｌｅｃｔｉｎｃＤＮＡ插入到天坛株痘苗病毒载体ＳｍａＩ位点，构建了表达质粒ｐＪＳＡ１１７５／Ｅ－ｓｅｌｅｃｔｉｎ。采用Ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ方法，ｐＪＳＡ１１７５／Ｅ－ｓｅｌｅｃｔｉｎ转染ＴＫ－１４３细胞，用ＢｕｄＲ和ＬａｃＺ双筛选，获得带有人Ｅ－选择素ｃＤＮＡ的重组痘苗病毒。经活细胞荧光染色和ＡＰＡＭ检测，重组痘苗病毒能有效地表达人Ｅ－选择素ｃＤＮＡ。
- 胡美茹汲言山舒翠玲马民慧董家新孙涛沈倍奋
- 关键词：E-选择素粘附分子痘苗病毒基因克隆CDNA
