汪进益
- 作品数：87 被引量：225H指数：8
- 供职机构：同济大学附属东方医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市教育发展基金会“曙光计划”项目上海市科学技术发展基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- MyoD和Cx43基因转染成纤维细胞后心肌移植治疗大鼠心肌梗死的实验研究
- 2007年
- 目的将生肌调节因子(MyoD)基因和间隙连接蛋白43(Cx43)基因体外转染真皮成纤维细胞(DFs)后,自体移植到大鼠心肌梗死区内,观察其在宿主体内生长、增殖情况及对心肌结构和心功能的影响。方法选取急性心肌梗死(AuI)模型制备成功的50只SD大鼠随机分入AMI对照组、DFs移植组、Cx43移植组、MyoD移植组和MyoD／Cx43移植组(n=10)。4周后进行细胞移植实验:①AMI对照组:取100μL细胞培养液基质植入到梗死心肌瘢痕组织中;②DFs移植组:在梗死心肌瘢痕组织中植入100μL用5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)标记未经基因转染的DFs细胞悬液;③Cx43移植组:在梗死心肌瘢痕组织中植入100μL用BrdU标记经Cx43基因转染DFs(Cx43-DFs)的细胞悬液;④MyoD移植组:在梗死心肌瘢痕组织中植入100μL用BrdU标记经MyoD基因转染DFs (MyoD-DFs)的细胞悬液;⑤MyoD／Cx43移植组:在梗死心肌瘢痕组织中植入100μL用BrdU标记经MyoD和Cx43基因联合转染DFs(MyoD／Cx43-DFs)的细胞悬液,以上各组移植细胞密度均为2．0×106／mL。另选假手术组8只仅开胸而不缝扎,不作任何注射,作为正常对照组。在细胞移植前和移植后4周内观察心电图(ECG)和血浆脑钠素(BNP)浓度的变化;于移植4周后采用Langendorff离体心脏灌流和多外围设备转接器(MPA)信号采集分析系统评价大鼠左心室功能;染色法测定心肌梗死面积(MIS);应用免疫组化技术检测BrdU标记移植细胞存在及connexin43蛋白分布的情况;并通过透射电子显微镜观察移植区细胞的超微结构和缝隙连接形成情况。结果细胞移植术后,AMI对照组死亡2只、DFs移植组死亡1只、Cx43移植组死亡1只、MyoD移植组死亡2只、MyoD／Cx43移植组死亡1只,最终进入结果分析确定为每组8只。细胞移植术后4周, MyoD／Cx43移植组MIS为(25．05±4．44)％,低于MyoD移植组的(34．65±4．55)％、Cx43移植组的(41．92±6．64)％及DFs移植组的(42．61±4．17)％
- 刘中民范慧敏汪进益
- 关键词：CX43MYOD成纤维细胞LANGENDORFFBRDU左心室内压
- Cx43转基因自体成肌细胞移植治疗心肌梗死的实验研究
- 2007年
- 目的观察间隙连接蛋白43(Cx43)基因转染自体骨骼肌成肌细胞(SMCs)后心肌内细胞移植对犬急性心肌梗死(AMI)后心功能和心肌结构的影响。方法构建真核表达质粒载体pLenti6／V5-DEST-Cx43,利用慢病毒表达包装系统将目的基因Cx43 cDNA转染入体外培养的SMCs,并经克隆筛选后得到Cx43基因高表达的SMCs (Cx43-SMCs)。将24只AMI模型制备成功的杂种犬采用计算器随机法分为SMCs移植组、Cx43-SMCs移植组和对照组等3组(n=8),于犬AMI后4周分别在各组心肌梗死区进行细胞移植:SMCs移植组注入用5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)标记的SMCs、Cx43-SMCs移植组注入用BrdU标记的Cx43-SMCs、对照组注入等量的细胞培养液。分别在AMI前1天、AMI后4周和细胞移植4周后,用超声心动图(UCG)测量左室射血分数(LVEF)、左室舒张末期内径(LVDD)和左室收缩末期内径(LVSD);同时进行病理组织学检查和应用免疫组织化学技术检测BrdU标记移植细胞的存在情况;并通过透射电子显微镜观察移植区细胞的超微结构和缝隙连接形成情况。结果实验杂种犬在AMI前、AMI后4周(即移植前)、移植后4周均获得良好UCG图像。AMI前UCG检查显示犬的左室形态和收缩功能均正常,建立AMI模型4周后,与对照组相比,SMCs移植组和Cx43-SMCs移植组各实验犬的左心室腔扩大,左室前壁变薄,收缩活动减弱至消失,LNEF降低,LNDD和LVSD均增加(P<0．05),为成功的AMI模型。移植后4周,与移植前AMI时比较,SMCs移植组和Cx43-SMCs移植组的LVEF升高,LNDD和LVSD则减少(P<0．05),心功能趋于恢复,其中Cx43-SMCs移植组较SMCs移植组为显著(P<0．05)。病理组织学检查显示在细胞移植组心肌瘢痕区及其边缘均发现了植入的移植细胞;免疫组化检测结果显示心肌瘢痕区边缘有BrdU阳性细胞存在和分布,移植细胞的颜色呈棕褐色,与正常原位心肌细胞不同,其中Cx43-SMCs移植组植入的Cx43-SMCs在宿主心肌组织内排�
- 范慧敏刘中民汪进益
- 关键词：CX43成肌细胞移植细胞左室前壁BRDU病理组织学检查
- 真核表达载体pLenti6/V5-DEST-MyoD/Cx43的构建及其在大鼠皮肤成纤维细胞的表达活性
- 目的：构建携带大鼠生肌调节因子(myogenic determination,MyoD)基因和间隙连接蛋白43(connexin 43, Cx43)基因的真核表达质粒慢病毒载体,探讨 MyoD 和 Cx43基因诱导大鼠真...
- 范慧敏刘中民汪进益
- 文献传递
- 氧自由基对血管内皮细胞钙电流的影响及山莨菪碱的干预作用被引量：2
- 2008年
- 目的观察山莨菪碱(anisodamine,Ani)在氧自由基(oxygen free radical,OFR)作用体外培养人脐静脉血管内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)后对其钙池操纵的Ca2+通道电流(store-operated Ca2+currents,Isoc)的影响。方法利用全细胞膜片钳记录技术,应用快速加药灌流装置将0.5、1.0、1.5 mmol/L三种不同浓度的Ani对OFR作用HUVECs后ISOC的影响。结果OFR能增强HUVECs的ISOC,而Ani对OFR作用HUVECs后所引起ISOC的增大作用具有抑制效应。当膜电位钳制于-100 mV时,1.5 mmol/L Ani可使ISOC的峰值电流从(-388.59±58.66)pA下降至(-287.37±23.03)pA,抑制率为(25.013±9.49)%;OFR作用后,1.5 mmol/LAni可使ISOC的峰值电流从(-577.04±93.69)pA下降至(-302.38±35.13)pA,抑制率为(47.24±3.82)%。各组间及与对照组相比均有显著的统计学差异(P<0.01,n=6)。结论Ani具有明显抑制HUVECs细胞ISOC的作用,对OFR所致的血管内皮损伤确有保护作用。
- 郑洁芳汪进益忻元峰洪暄范慧敏刘中民
- 关键词：山莨菪碱氧自由基血管内皮细胞
- 体外循环血浆对体外培养人脐静脉血管内皮细胞钙池操纵的钙通道电流的影响被引量：1
- 2009年
- 目的探讨经体外循环(cardiopulmonary bypass,CPB)后人体炎性血浆对体外培养的人脐静脉血管内皮细胞(Human Umbilical Vein Endothelial Cells,HUVECs)的钙池操纵的钙通道电流(store-operated Ca2+currents,Isoc)的影响。方法CPB后血浆采自我科心血管外科手术患者,患者均知情同意。将已培养好的HUVECs按所加入的血浆不同分为4组,每组6例:即组Ⅰ(加入CPB刚开始0min时血浆的对照组)、组Ⅱ(加入CPB后25min的血浆)、组Ⅲ(加入CPB后50min的血浆)及组Ⅳ(加入CPB后50min含左旋精氨酸的血浆)。应用全细胞膜片钳记录技术测定并观察各组HUVECs的Isoc变化。结果在HUVECs上可记录到Isoc;当钳制电位为-100mV时,组Ⅰ~组Ⅳ中HUVECs的Isoc分别为(-302.38±35.13)pA、(-388.59±58.66)pA、(-577.04±93.69)pA及(-365.42±34.79)pA,各组比较差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01),其中组Ⅳ明显低于组Ⅲ(P<0.01)。结论CPB后人体炎性血浆可增强血管内皮细胞的钙通道电流,左旋精氨酸可减轻此作用,这对于进一步深入研究CPB围术期血管内皮细胞钙超载的发生机制和防治具有重要意义。
- 汪进益范慧敏张旭敏卢蓉李健刘中民
- 关键词：体外循环血管内皮细胞膜片钳技术
- 电视胸腔镜手术治疗肺转移瘤38例报告被引量：5
- 2014年
- 目的：探讨电视胸腔镜手术（ video-assisted thoracoscopic surgery ， VATS ）治疗肺转移瘤的可行性和疗效。方法2004年9月-2012年12月电视胸腔镜手术治疗38例肺转移瘤。均采用双腔气管插管单肺通气，患侧腋中线第7或8肋间做1．5 cm切口为观察孔，置入胸腔镜；胸腔镜引导下分别于腋前线第3或4肋间及肩胛下角线第6或7肋间另做2个操作孔。内镜缝合切割器距肿瘤边缘1．5 cm行楔形切除术，常规清扫或切除区域肿大淋巴结。结果38例行VATS肺楔形切除术。无围手术期死亡，无术后严重并发症，无切口肿瘤种植。1、3、5年累计生存率分别是86．8％、52．6％、31．6％。结论对于有适应证的肺转移瘤采用VATS治疗可行。
- 汪进益洪暄刘刚陈国涵李钦传刘中民
- 关键词：肺转移瘤电视胸腔镜手术预后
- MyoD和Cx43基因转染成纤维细胞后心肌移植治疗大鼠心肌梗死的近期疗效观察及安全性评价
- 刘中民范慧敏汪进益
- 大鼠心肌成纤维细胞体外培养的生物学特性及转基因研究被引量：2
- 2008年
- 目的观察大鼠心肌成纤维细胞（CFs）体外培养的生长增殖情况及肌肉转录调节因子（MyoD）基因转染对其生物学特性的影响。方法采用改良的差速贴壁法培养大鼠CFs，利用携带MyoD cDNA的真核表达载体pLenti6／V5-DEST-MyoD转导培养的大鼠CFs，用稻瘟菌素筛选2周，挑选转基因单克隆细胞，传代培养，进行细胞形态观察、生长曲线以及细胞免疫化学鉴定。结果成功建立高纯度大鼠CFs的细胞培养模型，且具有良好的细胞形态、正常的生长增殖等生物学功能。转染细胞的MyoD cDNA基因表达阳性，其下游抗α-肌动蛋白（α-actin）呈阳性表达，胞质呈棕黄色，并且含有与细胞纵轴平行排列的肌丝，细胞核用苏木素复染后呈淡蓝色。在2．0×10^5／mL细胞密度的CFs接受转MyoD基因后，抗α-actin阳性率为（27．04±9．41）％。结论真核表达载体成功介导MyoD cDNA转导入体外培养的大鼠CFs，诱导其转化为具有潜在功能的类骨骼肌细胞，CFs可成为心血管疾病基因治疗的靶细胞。
- 汪进益范慧敏刘中民卢蓉马亮李杨
- 关键词：心肌成纤维细胞细胞培养转基因靶细胞
- 吾咽困难有可能是食管癌
- 2023年
- 今年62岁的王先生最近总是感觉到喉咙不适,起初他以为是“慢性咽炎”的老毛病又犯了,自行购买了“润喉片”来缓解病情,可服用了一段时间后并没有好转,甚至开始感到食物难以咽下,于是赶紧前往医院,经过详细诊断和消化道内镜检查,结果诊断为早期食管癌。
- 汪进益
- 关键词：早期食管癌消化道内镜检查慢性咽炎
- 快速康复外科在营养风险筛查食管癌患者治疗中的应用被引量：3
- 2015年
- 【摘妻】目的探讨快速康复外科（FTS）理念在营养风险筛查（NRS）食管癌患者围术期中的应用。方法选取2008年1月至2013年6月80例接受手术治疗的食管癌患者，经营养风险筛查2002（NRS2002）法筛查后，FTS策略进行围术期管理（FTS组，n=80）；同期80例接受传统围术期管理（CPM）的食管癌患者作对照（CPM组，n=80）。比较两组患者术后首次排气、排便时间、拔除胸腔引流管时间、住院时间以及手术并发症等情况。结果两组患者的年龄、性别、肿瘤分期等差异无统计学意义（P〉0．05）。与CPM组相比，FTS组患者术后首次排气时间[（95．8±3．0）h vs（62．7±2．9）h]、首次排便时间[（5．08±1．85）d vs（3．56±1．46）d]、拔除胸腔引流管时间[（4．66±0．26）d vs（2．93±0．36）d]、术后住院时间[（11．61±1．21）d vs（8．67±0．85）d]以及总并发症发生率[7．50％（6／80）vs 18．75％（15／80）]等均显著减少，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论食管癌患者经营养风险筛查与处理后，在围手术期应用FTS策略可有效促进患者术后康复，减少术后并发症发生率以及缩短住院时间，改善患者的临床结局。
- 汪进益洪暄陈国涵李钦传刘中民
- 关键词：手术期间营养支持康复
